摘要：详细介绍粗糙表面细胞的黏附机理,结合表面加工方法较全面地总结和分析钛系材料不同表面粗糙度对细胞黏附的影响及细胞黏附的表面粗糙度模型。综述表明:粗糙表面通过改变表面力场、表面电荷和表面能、增加比表面积及表面缺陷等方式促进细胞在植入体表面的黏附:钛系材料表面粗糙度对不同细胞黏附的影响不同,粗糙表面可促进细胞基因表达:由于表面加工方法造成表面化学状态变化并影响表面电荷和表面能,所以应根据不同的表面加工方法来设计植入体的表面形貌,以获得适合细胞黏附的表面粗糙度。此外,探讨钛表面细胞吸附的分子动力学研究方法,结果显示可利用分子动力学方法在分子水平研究表面特征对蛋白质和细胞黏附的影响机理。

摘要：生物医用材料旨在通过调控材料和细胞之间的相互作用来实现组织的再生和修复。黏附过程直接决定了细胞是否能够充分发挥生物学性能,因此通过对材料表面的物理和化学改性来调控细胞黏附,对于生物材料具有至关重要的意义,也是非常活跃的研究热点。材料表面物理改性通常通过对包括表面粗糙度、形貌、模量和多孔结构等物理性质的调控,为细胞构建适合黏附的材料表面。而化学改性则借助于表面电荷及亲疏水性调控、促黏分子修饰等化学手段来提高材料表面与细胞间的相互作用力,进而促进细胞黏附。近年来,材料表面调控细胞黏附的研究取得了许多新的突破性进展。例如在传统的促黏分子表面修饰之外,人们逐步发现对促黏分子序构的精准调控也可以有效地提高材料表面的促黏性能。而刺激响应性表面则可以根据外界信号的刺激,使得材料表面在促黏和抗黏之间实现智能的转换。本文从物理改性、化学修饰、刺激响应性表面构建等角度出发,全面总结和讨论了材料表面性质对细胞黏附的调控作用,梳理了材料表面的设计思路,多种材料表面的修饰改性方法等最新进展,并展望了未来材料表面对细胞黏附的调控思路。

摘要：近年来人们对肿瘤的耐药机制进行了大量研究,如某些耐药基因(MDR)和细胞表面蛋白(P-糖蛋白和多药耐药相关蛋白)介导的多药耐药[1].然而针对这些耐药机制所设计的治疗方法,尽管在体外研究中效果显著,但在临床上却难以奏效,特别是对实体瘤的治疗更是令人失望.这提示体内肿瘤作为一个细胞群集体,其生物学特性和对药物的敏感性与体外单层培养的癌细胞有着明显的差异。

摘要：胰腺癌侵袭和转移的分子生物学机制非常复杂，基质金属蛋白酶-2（MMP-2）能够降解细胞外基质，与癌细胞分泌的血管生成及淋巴趋化因子一起参与浸润癌特异性的组织重塑和基底膜降解过程。本研究设计和构建带有U6启动子的MMP-2基因特异性的小干扰RNA表达质粒，将构建好的质粒转染人人胰腺癌Bxpc-3细胞株中，

摘要：背景:细胞黏附斑在其生物力学方向的研究虽然取得了很多进展,但仍然处于初期阶段,面临着理论模型与实验观察结果出现差异,一些模型缺乏实验依据,进一步优化模型设计等问题。目的:对近年国内外关于细胞黏附斑生物力学研究及其相关进展进行综述。方法:以"细胞黏附、黏附斑、黏附强度、细胞力学分子键、弹性界面"为中文关键词,以"cell adhesion,focal adhesions,adhesion strength,cell mechanics,molecular bond,flexible interface"为英文关键词。采用计算机检索中国知网数据库CNKI1995-01/2010-04、Pubmd数据库和Elsevier(ScienceDirect)数据库1975-01/2010-04有关细胞黏附斑生物力学的文献。排除重复研究。结果与结论:计算机初检得到109篇文献,排除因研究目的与本文无关及内容重复的研究64篇,共保留45篇文献做进一步分析。通过查阅国内外文献,国内外对黏附斑的研究主要集中在黏附斑的生物力学性质方面,重点从黏附斑与细胞骨架的相互作用、黏附斑的大小和黏附力的关系、细胞黏附界面弹性和黏附力的关系方面展开相关研究。随着细胞生物学、分子生物学和数学有限元建模分析方法的发展,为黏附斑的生物力学研究提供了新的空间。黏附斑的建模方法被进一步改进,更加接近生物学实验数据,有关黏附斑的力学问题也有了新的发现,黏附斑生物力学方向的研究有助于其他生物微观模型的建立和分析,有助于从力学角度解释细胞黏附的机制以及肿瘤细胞侵袭转移等一些关键问题。

摘要：背景:在胚胎期,上皮型钙粘蛋白的表达对于肝组织的形成有决定作用。目的:将上皮型钙粘蛋白基因转染小鼠胚胎干细胞,观察其对分化细胞间黏附能力变化的影响。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-12/2008-12在中山大学附属第一医院外科实验室完成。材料:清洁级BALB/c系孕13d小鼠由中山大学实验动物中心提供。BALB/c系小鼠胚胎干细胞由中山大学眼科中心黄冰教授建系和保存。含CMV启动子的真核表达质粒pEGFP-N1由中山大学医学院吕志跃博士惠赠。方法:取BALB/c小鼠新鲜肝脏组织,提取总RNA,反转录合成cDNA。以合成的cDNA为模板,进行PCR扩增目的片段,将其和pEGFP-N1双酶切后连接构建pEGFP-上皮型钙粘蛋白,转染小鼠胚胎干细胞并进行体外分化。主要观察指标:RT-PCR及免疫细胞化学检测上皮型钙粘蛋白在分化系统中的动态表达,同时观察分化细胞间黏附能力的变化。结果:基因转染的胚胎干细胞分化后1～17d稳定表达上皮型钙粘蛋白,而普通胚胎干细胞分化后上皮型钙粘蛋白的表达则逐渐降低。稳定表达上皮型钙粘蛋白的分化细胞间黏附能力明显增强,并在19d时仍能保持致密的细胞连接和多层生长状态,普通胚胎干细胞则由拟胚体结构逐渐分化为松散的细胞群落。结论:稳定表达上皮型钙粘蛋白的胚胎干细胞分化后,细胞间黏附能力明显增强,并保持多层细胞生长状态。

摘要：根据GenBank中猪链球菌鸟氨酸氨甲酰转移酶基因(oct)序列(GenBank登录号:NZ_CP007497)设计引物,克隆猪链球菌ZY05719株的oct基因,构建p ET-28a-oct原核表达质粒并在大肠杆菌Rosetta中诱导表达,重组OCT蛋白即鸟氨酸氨甲酰转移酶用镍亲和层析柱纯化后,研究它对猪链球菌生物被膜形成的影响及介导猪链球菌黏附PK-15细胞的作用。结果显示,克隆出1 014 bp的oct基因,并检测出纯化的40 ku OCT融合蛋白具有良好的反应原性,且能提高猪链球菌形成生物被膜的能力及降低黏附PK-15细胞的作用。本研究成功克隆并表达了ZY05719株的oct基因,初步揭示了其生物学功能,为深入研究鸟氨酸氨甲酰转移酶在猪链球菌致病机制中的作用奠定了基础。

摘要：背景:体内胚胎期,上皮型钙粘蛋白对肝脏组织的发育起到决定作用,探讨其在胚胎干细胞分化中的动态表达对于肝脏组织的体外发育可行性具有重要意义。目的:观察上皮型钙粘蛋白在小鼠胚胎干细胞体外分化过程中的动态表达,及其与细胞间黏附状态的关系。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-12/2008-12在中山大学附属第一医院外科实验室完成。材料:BALB/c系小鼠胚胎干细胞由中山大学眼科中心黄冰教授建系和保存。清洁级BALB/c系孕13d小鼠20只,由中山大学实验动物中心提供。方法:BALB/c系小鼠胚胎干细胞克隆经胰酶消化后,利用含胎牛血清、2-巯基乙醇、HEPES、青霉素、链霉素的DMEM培养基悬浮培养,使其自然发育5d形成拟胚体,第6天转至培养板使其贴壁生长。取BALB/c系孕13d小鼠,取其胎鼠肝脏组织制备胎肝细胞及冰冻切片,作为对照组。主要观察指标:按胚胎干细胞初分化、拟胚体形成、细胞分化群落形成等阶段,于细胞分化第1,5,9,13,17天利用RT-PCR和免疫细胞化学法检测上皮型钙粘蛋白的表达,观察其表达水平与细胞黏附状态的关系。结果:RT-PCR检测结果显示,在胚胎干细胞自然分化系统中,上皮型钙粘蛋白mRNA于分化第1天未表达,在第5天拟胚体形成后表达最强,其后表达能力逐渐降低,至17d时不再表达,作为对照的BALB/c系小鼠胎肝细胞表达较强的上皮型钙粘蛋白mRNA。免疫细胞化学检测结果亦体现相同规律。胚胎干细胞在形态学上由单细胞发育为致密的包含3胚层结构的拟胚体,再继续分化为松散的细胞群落。结论:上皮型钙粘蛋白在胚胎干细胞体外培养系统中的表达水平与分化细胞间黏附状态变化呈一定的相关性,其在体外环境中丧失表达可能是分化细胞不能组织化的一个重要原因。

摘要：背景:据作者查新检索medline,cnki等数据库,鲜见国内外有关体外研究糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(glycosylphosphatidilinoditol-specific phospholipaseD,GPI-PLD)对白血病细胞黏附功能影响方面的报道。目的:观察GPI-PLD对髓系白血病骨髓单个核细胞黏附功能的影响及其机制。设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2004-01/06在湘雅医院血液实验室完成。对象:骨髓标本来自于髓系白血病患者,由湘雅医院血液科提供。方法:利用具有完整糖基化磷脂酰肌醇(GPI)结构的胎盘碱性磷酸酶做底物,通过TX-114分相,定量检测骨髓单个核细胞中GPI-PLD活性,利用1,10-二氮杂菲抑制GPI-PLD的活性,实验分2组:处理组加二氮杂菲,使其终浓度为1mmol/L,对照组加入等量的PBS。用MTT方法检测处理组和对照组骨髓细胞对纤维连接蛋白的黏附率、免疫组织化学方法检测GPI-锚定蛋白CD24的表达。主要观察指标:髓系白血病细胞GPI-PLD活性,细胞黏附率及CD24的表达。结果:1mmol/L1,10-二氮杂菲作用髓系白血病骨髓单个核细胞5h细胞的GPI-PLD活性较对照组降低[(5.40±2.96)%,(42.08±7.21)%,P<0.01];GPI-PLD的活性被抑制后处理组细胞的黏附率较对照组增加[(61.19±29.14)%,(49.78±26.73)%,P<0.01],同时CD24的表达率上调[(18.5±11.14)%,(16.02±9.68),P<0.01]。结论:降低GPI-PLD活性能增加骨髓单个核细胞对纤维连接蛋白的黏附率,同时骨髓单个核细胞上GPI-锚定蛋白CD24表达增强。

摘要：背景:聚乳酸类高分子聚合物与羟基磷灰石复合材料的研究是目前骨修复材料的研究热点。聚L-乳酸/聚L-乳酸接枝的纳米羟基磷灰石(PLLA/PLLA-gHAP)为具有独立知识产权的新型骨修复材料,具有较好的力学强度,其与骨修复的功能细胞成骨细胞间的相互作用尚无相关报道。目的:观察新型骨修复材料PLLA/PLLA-gHAP对成骨细胞黏附、增殖功能的影响。设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2006-03/2007-03在东北师范大学细胞与遗传研究所完成。材料:①将骨修复材料PLLA/PLLA-gHAP及PLLA制备成2cm×2cm×0.5mm的板,浸泡、冲洗、消毒灭菌后备用。②将PLLA/PLLA-gHAP、PLLA两种板剪成0.5cm×0.5cm×0.5mm的小块,加入DMEM培养液,配成10,100g/L两种质量浓度的浸提液,于37℃孵箱中浸提72h,4℃保存备用。方法:取孕19～20d的Wistar大鼠胎鼠的颅骨进行成骨细胞体外培养。①光镜下观察成骨细胞形态,应用碱性磷酸酶染色、钙结节染色对其进行鉴定。②将成骨细胞分别接种在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料板上,24h后应用细胞技术器检测细胞黏附数量,扫描电镜观察细胞形态。③MTT法测定成骨细胞在不同质量浓度(10,100g/L)PLLA/PLLA-gHAP材料浸提液中的增殖情况,并与PLLA材料进行对比。主要观察指标:①成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料上的黏附数量和形态。②成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料浸提液中的增殖情况。结果:①在PLLA/PLLA-gHAP表面黏附的细胞数略多于PLLA材料,且黏附于PLLA/PLLA-gHAP材料表面的成骨细胞直径较大,伸出的伪足与材料间形成一种牢固的锚状结构。而在PLLA表面的细胞细胞直径较小,多为球形,很少伸出伪足。②10g/LPLLA/PLLA-gHAP浸提液组的细胞活性明显高于10g/LPLLA浸提液组和空白对照组;两种材料100g/L质量浓度组的细胞活性均低于空白对照组,但PLLA/PLLA-gHAP组的细胞活性仍高于PLLA组。结论:①成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP材料表面较PLLA材料表面显示更好的黏附能力。②成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP材料浸提液中较在PLLA材料浸提掖中显示更好的增殖能力。③新型PLLA/PLLA-gHAP材料具有较好的成骨细胞相容性,可能作为骨修复材料使用。