摘要：根据国外已发表的鹅细小病毒 (GPV) A株基因组核苷酸序列设计了一对引物 ,对国内两株鹅细小病毒毒株 (GPV CC株 )和 (GPV FS株 )主要结构蛋白 (VP2 - VP3)基因进行 PCR扩增 ,并克隆到p CR3.1T载体 ,分别获得正向、反向连接重组质粒 p VPC1、p VPC2和 p VPF1、p VPF2 ,经酶切鉴定筛选出阳性克隆质粒并进行核苷酸序列分析比较 ,序列分析结果表明 :GPV CC株和 GPV FS株 VP2 - VP3的核苷酸大小分别为 176 4bp和 176 3 bp,其中 GPV CC株与 A株同源性达到 98.9% ;GPV FS株缺失一个碱基 ,与 A株同源性为 93.5 % ,与 GPV CC株同源性为 93%。

摘要：根据国外已发表的番鸭细小病毒 (MDPV )FM株基因组核苷酸序列设计了 1对引物 ,应用PCR技术扩增了MDPVYZ株的VP2 和VP3 蛋白基因片段。将扩增后的VP2 和VP3 蛋白基因克隆到 pCR 3 .1T载体上 ,MDPVYZ株基因大小为 176 4bp ,编码 5 2 8个氨基酸 ,并对插入片段进行序列测定。测定结果表明 ,我国分离的MDPVYZ株蛋白基因序列与国外发表的序列的同源性为 98.5 %。

摘要：为建立一种快速的猪戊型肝炎病毒抗体检测方法,根据已克隆的戊型肝炎病毒株DQ1结构蛋白基因(ORF2)的抗原性及水溶性分析,在其序列上设计一对引物,上游引物和下游引物分别带有BamHⅠ、HindⅢ酶切位点,用PCR方法扩增,获得369 bp大小的相应片段,位于ORF2 128-497 bp处。将扩增片段克隆到pET-32a构建了原核表达载体pET32a-DQ01,经测序证明该片段正确插入。将pET32a-DQ01转化BL21并诱导表达,SDS-PAGE结果显示表达蛋白大小为33 ku,Western-blot结果表明表达的蛋白质具有生物活性,将表达蛋白作为诊断抗原,对反应条件进行优化,初步建立了ELISA诊断方法。

摘要：参照GenBank中收录的鹅细小病毒(GPV)B株基因序列设计并合成了扩增GPV分离株的3对引物,利用PCR技术扩增7株小鹅瘟病毒的非结构蛋白基因和结构蛋白基因。然后将其克隆到pMD18-T载体上,筛选重组质粒并进行了序列测定及分析,测序结果表明,GPV分离株非结构蛋白基因由1884个核苷酸组成,编码627个氨基酸;结构蛋白由2199个核苷酸组成,编码732个氨基酸。拼接非结构蛋白和结构蛋白的全序列,不同毒株的同源性分别为94.3%～99.2%和92.6%～98.5%。表明目前国内的鹅细小病毒的同源性比较高,但是强弱毒株也存在一定的差别。