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犬结核SYBR Green荧光定量PCR检测方法的建立: 收藏
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引用; 《中国动物传染病学报》2009年第2期17卷 55-59页; 作者：王伟陈鸿军刘佩红王水明周锦萍于圣青丁铲中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 上海市动物疫病预防控制中心上海200102 江苏省出入境检验检疫局南京211000; 本研究基于IS1081基因建立了鉴定犬结核的SYBRGreen荧光定量PCR方法。在最佳反应条件下反应效率为1．09，获得的标准曲线相关系数R值达0．9995，标准曲线的线性范围达到1～1×10^7拷贝8个数量级，最低可检测到约10个目的拷贝，即31...; 本研究基于IS1081基因建立了鉴定犬结核的SYBRGreen荧光定量PCR方法。在最佳反应条件下反应效率为1．09，获得的标准曲线相关系数R值达0．9995，标准曲线的线性范围达到1～1×10^7拷贝8个数量级，最低可检测到约10个目的拷贝，即31．4fg DNA。根据溶解曲线分析，扩增产物中无引物二聚体的影响，说明所设计引物特异，退火温度合适。这表明本研究建立的SYBR Green荧光定量方法灵敏度高、定量范围广。利用该方法对临床样品进行检测，结果发现：与结核杆菌分离培养方法比较，符合率为85％。240份犬猫鼻拭子中150份被检测为阳性，这说明犬猫鼻腔中分枝杆菌携带率很高。; 来源：详细信息评论

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