摘要：背景:已有研究提示,雷帕霉素靶蛋白信号调控骨骼肌蛋白翻译过程,在运动引起的蛋白质合成变化中起作用。目的:观察耐力运动对骨骼肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达的影响,以及雷帕霉素靶蛋白在运动诱导骨骼肌生长中的作用途径。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-10/12北京体育大学运动人体科学学院实验室完成。材料:健康雄性、SPF级2月龄的SD大鼠12只,体质量180～200g,随机为运动组和对照组,每组6只。方法:运动组先进行适应性训练:上坡跑,坡度为5°,速度分别为10,15,20m/min强度递增的跑台运动,30min/次,1次/d,共6d;然后进行正式运动:上坡跑,跑台坡度5°,速度20m/min,60min/次,1次/d,6d/周,共4周的跑台运动。②对照组均不运动,其他生活条件与运动组相同。主要观察指标:采用反转录-聚合酶链反应方法测定腓肠肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达,采用BCA方法测定腓肠肌总蛋白含量。结果:实验纳入的12只大鼠全部完成训练,均进入结果分析,中途无脱落。①运动组腓肠肌总蛋白含量显著高于对照组(67.0±11.7,46.8±7.9;P<0.05)。②运动组雷帕霉素靶蛋白表达量显著高于对照组表达量(0.43±0.04,0.25±0.03;P<0.05)。结论:耐力运动后大鼠腓肠肌总蛋白含量上升,骨骼肌雷帕霉素靶蛋白mRNA表达上升,提示雷帕霉素靶蛋白可能参与肌肉生长对运动适应的调控。

摘要：在氧化葡萄糖酸杆菌中建立一种调控基因表达的工具。通过顺式/反式作用的非编码小RNA与核糖体结合位点(RBS)的相互作用,在翻译水平上对氧化葡萄糖酸杆菌中目标基因的表达进行调控。以绿色荧光蛋白作为报告基因,在所构建的顺式调控系统中,插入RBS上游的顺式阻遏序列,能够在转录后与RBS形成茎环结构,从而抑制报告基因的表达。这一茎环结构能够被与顺式阻遏序列具有更高亲和力的抗阻遏序列打开,从而重启报告基因的翻译;在所构建的反式调控系统中,由独立启动子控制转录的非编码小RNA与RBS互补形成双链,通过阻碍核糖体与mRNA的结合抑制报告基因的表达。在此基础上,设计并导入了一系列反式作用的小RNA,实现了对氧化葡萄糖酸杆菌中内源基因pstI表达的抑制。本研究提供了一种在氧化葡萄糖酸杆菌中不同于传统基因敲除的调控基因表达的方法。