摘要：猪带绦虫的幼虫猪囊尾蚴侵入宿主器官组织中寄生,可引起囊尾蚴病(俗称囊虫病),是一种世界性分布危害严重的寄生虫病.内蒙古自治区是囊虫病的高发区之一,近年来人群发病率呈上升趋势.因此,寻找敏感、特异性高的诊断方法以便及早诊断囊虫病的原发性感染甚为重要.目前,该病的诊断多依据临床表现、CT扫描和血清免疫学检测等,但特异性较差.我们根据猪囊尾蚴27 kDa蛋白基因保守序列设计了一对特异性引物,建立PCR与地高辛(DIG)标记特异性核酸探针相结合,快速、准确检测猪囊尾蚴的方法,现将结果报告如下

摘要：目的　使用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)检测龈下菌斑的牙龈卟啉菌 ,并与常规的培养法和间接免疫荧光法相比较。方法　设计纤毛亚单位蛋白基因内的一对引物 ,用PCR对 92个龈下菌斑标本进行扩增 ,与其他两种方法的检出率进行比较。结果　相同的菌斑标本 ,PCR的检出率为 94 6 % ,培养法为 48 9% ,间接免疫荧光法为 6 8 5 % ,前者明显高于后两者 (P <0 0 0 1)。结论　对牙周病致病菌的检测 ,PCR较培养法和间接免疫荧光法具有较高的敏感性。

摘要：目的 探索研制检测日本血吸虫的基因芯片。方法 依据日本血吸虫高度保守的编码免疫原性毛蚴抗原的5D基因,筛选、设计聚合酶链反应(PCR)的引物和基因探针,制成日本血吸虫基因芯片。检测时首先抽提尾蚴、成虫、虫卵、感染性钉螺的DNA,同时利用对照华支睾吸虫、姜片虫、卫氏并殖吸虫的DNA分别进行PCR扩增及不对称PCR荧光标记,然后用荧光标记后的靶序列与制备的检测芯片进行杂交,杂交结果用ScanArray 3000扫描仪扫描。结果 研制的基因芯片能有效地检测出单个尾蚴、虫卵、阳性钉螺或极微量成虫组织DNA,而常见的华支睾吸虫、姜片虫、卫氏并殖吸虫等未见阳性结果。结论 成功制备了检测日本血吸虫的基因芯片,并具有快速、灵敏、特异等特点。

摘要：目的　建立一种简便、快速、敏感和特异的检测巨细胞病毒 (HCMV)糖蛋白gB、gH基因型变异的方法。方法　以HCMV糖蛋白基因gH、gBn、gBclv为靶序列 ,设计 17条具有型特异性的寡核苷酸探针 ,聚合酶链反应 (PCR)扩增目的片段 ,反向杂交检测 2 3例中国和 6例德国移植患者HCMVgH、gBn、gBclv基因型变异 ,其结果与直接测序进行比较。结果　 2 3例中国患者HCMV糖蛋白为gH1和 2型 ,gB1、2和 3型 ,未见gB4型 ;而 6例德国患者的HCMV糖蛋白涵盖gH1和 2型 ,gB1、2、3及 4型。中、德两国患者均可同时感染 2种不同基因型的病毒株。反向杂交技术对检测患者同时感染不同基因型病毒株优于直接测序。结论　PCR 反向杂交技术具有简便、快速、敏感和特异的特点 ,适用于临床实验室检测HCMV糖蛋白基因型变异。

摘要：设计合成多聚合酶链反应(PCR)通用引物,结合限制性片段长度多态性(RFTL)分析,建立了腺病毒性角结膜炎的检测方法,初步应用于急性角结膜患者眼拭子标本的检测。

摘要：目的探讨聚合酶链反应结合反向线点杂交（PCR／RLB）技术在检测和鉴定真菌性鼻窦炎（FS）常见致病曲霉菌中应用的可行性。方法收集首都医科大学附属北京同仁医院2009年5月至2010年2月住院手术的FS患者活检石蜡包埋组织26例和活检新鲜组织8例，全部病例进行了病理学真菌检查、真菌培养及真菌ITS2区测序；提取各标本中真菌的DNA，用真菌特异性引物行PCR扩增，针对真菌的ITS2区设计曲霉菌种特异性探针，用5根曲霉菌种特异性探针与PCR产物进行反向线点杂交；将PCR／RLB与ITS2区测序、真菌培养及病理学检查的结果进行比较。阳性对照为5株曲霉菌株，阴性对照为真菌培养为非曲霉的石蜡包埋组织。结果活检标本病理学检查均可见菌丝；真菌培养14例阳性（41．2％）；测序16例（47．1％）得到结果；PCR／RLB鉴定34例均得出鉴定结果：黄曲霉14例，烟曲霉10例，黑曲霉4例，构巢曲霉1例，黄曲霉和烟曲霉同时阳性3例，烟曲霉与黑曲霉同时阳性2例。结论PCR／RLB技术可以对FS常见致病曲霉菌进行检测及鉴定，与病理组织学检查、真菌培养及DNA测序方法相比较，具有经济省时、敏感性高、特异性强、高通量等优势。

摘要：目的　探讨南方部队结核病的分子流行病学规律。方法　设计一对特异性IS6 110外向性引物 ,应用聚合酶链反应 (PCR)建立检测结核分支杆菌DNA指纹多态性的方法 ,分析结核分支杆菌DNA多态性与流行病学的关系。结果　共检测分析了 15 4株结核分支杆菌DNA的指纹多态性。根据这些菌株的指纹多态性特征共分为 8个类型 ,以Ⅰ型 (36 .4 % )、Ⅱ型 (31.8% )和Ⅲ型(2 1.4 % )为主 ,其余各型均少于 4 %。以 2 0～ 2 9岁和 30～ 39岁组在这三型中所占比例最大 ,分别为31.8%和 2 7.9%。驻城镇部队与驻乡村部队以及结核病患者有无卡介苗接种史 ,在这三型的分布差异无显著统计学意义 (P >0 .0 5 )。但初治与复治患者分离菌株的PCR扩增指纹类型的分布差异有显著统计学意义 (P <0 .0 5 )。所检测菌株是否具有耐药性 ,在这三型中的分布差异也有显著统计学意义 (P <0 .0 5 )。菌株耐药主要为单耐异烟肼和利福平 ,耐药菌株在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中所占比例分别是4 4 .4 %、2 9.6 %和 14 .8%。结论　PCR扩增指纹多态性分型技术是一种简便、快速、敏感、特异和重复性好的分型方法 ,可用于结核病的分子流行病学研究。南方部队结核分支杆菌的传播以Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型为主 ,应加强此三型菌株流行的监控。

摘要：随着聚合酶链反应（PCR）技术的发展，PCR核酸扩增类体外诊断试剂在临床应用中的地位越来越重要。由于检测目标的复杂性以及临床对测量线性、准确度、分析特异性、亚型检测能力、精密度、检测限／定量限和干扰物质等要求，针对PCR扩增类试剂有严格的控制体系。国际学术界为了确保定量PCR实验数据的质量，已有关于实时定量PCR实验需要满足的最低要求试验信息量（MIQE）等标准，对样本处理、实验设计、体系设置及质量控制等提出了明确的要求。但在核酸扩增类体外诊断试剂的应用中，对体系设置的要求尚有很多不明确之处。本文针对PCR扩增类检测试剂在开发、生产及使用中的规范要求，依次对PCR体系设置、质量控制体系建立、核酸提取和纯化的方法学要求等进行了归纳与分析，以推动相关设计与检测标准的建立。

摘要：通过聚合酶链反应(PCR)直接检测痰中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),为临床快速诊断MRSA感染提供了新的方法.我们设计定量实验,对这种方法的敏感性进行进一步的探讨,现报道如下.

摘要：根据色觉基因异常的特点，我们设计了一对２０个核苷酸长的引物以控制扩增红与绿色觉基因的第５个外显子。利用红与绿色觉基因第５个外显子酶切位点的差异对扩增ＤＮＡ片段进行酶解后电泳观察，以确定红或绿色觉基因异常的情况。并用色觉基因第４个内含子作为探针，以分子杂交法检测红与绿色觉基因第５个外显子相关片段的异常情况，两种方法结果一致。聚合酶链反应是一种简便、可靠、实用的异常色觉基因检出方法。