摘要：目的探讨胰岛素治疗对严重烫伤大鼠骨骼肌消耗的作用及相关机制。方法将48只雄性7~8周龄Wistar大鼠按随机数字表法分为单纯烫伤组和胰岛素治疗组,每组24只。2组大鼠称取体质量、用血糖仪检测尾部末梢血糖水平后,均在94℃热水中浸烫12s制成30%体表总面积Ⅲ度背部烫伤模型。伤后1~7d每天8:00,胰岛素治疗组大鼠皮下注射甘精胰岛素1U/kg,单纯烫伤组大鼠给予等量生理盐水;伤后1~7d每天8:00(注射胰岛素后)、13:00、18:00,2组大鼠均给予肠内营养乳剂灌胃各1次,每次10mL/kg。伤后1~4、6、7d每天注射胰岛素前及伤后8、9、11、12、14d晨,用血糖仪检测2组大鼠尾部末梢血糖水平。称取2组大鼠伤后14d未行任何处理时的体质量。伤后4、7、14d,每组分别取8只大鼠,采集胫骨前肌标本,称取伤后14d胫骨前肌质量,透射电镜观察伤后7d胫骨前肌肌细胞超微结构变化,末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿三磷酸缺口末端标记法测定伤后4、7、14d胫骨前肌肌细胞凋亡率,免疫组织化学法检测伤后4、7、14d胫骨前肌半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达,蛋白质印迹法检测伤后4、7、14d胫骨前肌内质网应激反应(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、caspase-12活性体、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)蛋白表达。对数据行完全随机设计t检验、重复测量方差分析、析因设计方差分析、t检验及Bonferroni校正。结果伤前2组大鼠血糖水平、体质量相近(t=0.204、0.405,P>0.05)。伤后1、6、9、11、12、14d,2组大鼠血糖水平相近(t=0.229、3.339、1.610、0.178、0.181、0.079,P>0.05);伤后2、3、4、7、8d,胰岛素治疗组大鼠血糖水平显著低于单纯烫伤组(t=7.245、4.165、4.609、4.018、3.995,P<0.05或P<0.01)。伤后14d,胰岛素治疗组大鼠体质量和胫骨前肌质量分别为(271±19)、(0.47±0.05)g,均明显高于单纯烫伤组的(254±12)、(0.43±0.04)g(t=2.159、2.375,P<0.05)。伤后7d,单纯烫伤组大鼠胫骨前肌肌细胞部分细胞核固缩、变形,染色质分布不均,内质网肿胀;胰岛素治疗组大鼠胫骨前肌肌细胞凋亡改变和内质网肿胀较单纯烫伤组减轻。伤后4、7、14d,胰岛素治疗组大鼠胫骨前肌肌细胞凋亡率均较单纯烫伤组明显降低(t=4.262、9.153、9.799,P<0.01)。伤后7、14d,胰岛素治疗组大鼠胫骨前肌caspase-3表达均较单纯烫伤组明显减少(t=10.429、7.617,P<0.01)。与单纯烫伤组比较,胰岛素治疗组大鼠伤后4、14d胫骨前肌GRP78蛋白表达明显增加(t=4.172、4.437,P<0.05),伤后7、14d胫骨前肌caspase-12活性体蛋白表达明显减少(t=11.049、11.181,P<0.01),伤后4、7、14d胫骨前肌CHOP蛋白表达明显减少(t=13.837、9.572、6.930,P<0.01)。结论胰岛素治疗可能通过缓解ERS,减少严重烫伤大鼠骨骼肌肌细胞凋亡和骨骼肌消耗。

摘要：针对骨骼肌肉系统设计3种标记后延迟时间(PLD),分别为1500、2000、2500ms。采集不同PLD三维连续动脉自旋标记(3DpCASL)的图像。由2名观察者独立评分观察评分一致性,分析不同PLD下图像质量之间的差异。从2名观察者独立测得的血流量(BF)值入手,分析观察者内及观察者间测得BF值的一致性,并进一步分析不同PLD下BF值差异。研究结果显示3DpCASL图像观察者间主观评分一致性较好,PLD=1500ms是下肢骨骼肌3DpCASL成像最佳参数。3种PLD下测得的BF值一致性均较好,3种PLD对BF值影响不大。

摘要：背景:缺血预处理能有效提高骨骼肌缺血耐受性,减轻骨骼肌缺血再灌注期间的坏死范围,但缺血预处理对骨骼肌收缩功能的影响文献报道不多。目的:探讨缺血预处理对骨骼肌缺血再灌注期间收缩功能的影响。设计:以实验动物为研究对象的随机对照研究。单位:华中科技大学同济医学院及解放军第二五二医院。材料:实验地点为解放军第二五二医院中心实验室。选用健康雄性SD大鼠14只。方法:采用大鼠后肢缺血再灌注模型,将14只大鼠随机分为对照组和实验组。对照组:持续缺血4h,再灌注1h;实验组:缺血5min,再灌注5min,重复3次后,持续缺血4h再灌注1h。测定缺血再灌注期间腓肠肌收缩功能变化及再灌注1h后,血清磷酸激酶(CK),丙二醛和腓肠肌99锝m亚甲基二磷酸钠(99TcmMDP)吸收量变化。主要观察指标:缺血预处理对腓肠肌收缩力及对血清CK,丙二醛及99TcmMDP吸收量的影响。结果:实验组腓肠肌收缩力在缺血4h时为(14.32±5.05)g,再灌注1h时为(25.71±7.58)g,对照组分别为(0,4.73±2.05)g,两者相比差异有显著性意义(P<0.05),实验组血清CK为(104.85±9.84)nkat/L,丙二醛为(3988.60±455.92)nmol/L,99TcmMDP吸收量为(56.0±8.1)mBq/g·min,对照组CK为(136.36±14.50)nkat/L,丙二醛为(6542.90±536.72)nmol/L,99TcmMDP吸收量为(97.3±5.8)mBq/g·min,两者相比差异有显著性意义(P<0.05,P<0.01)。结论:缺血预处理能有效改善缺血再灌注期间骨骼肌的收缩力,减轻骨骼肌坏死程度。因此,缺血预处理对缺血骨骼肌的收缩功能具有保护作用。

摘要：目的:观察慢性损伤骨骼肌中炎症细胞因子白细胞介素8的水平,以及热传导银质针对其产生的影响。方法:实验于2004-08在解放军总医院康复医学科实验室完成。新西兰大白兔30只,将27只固定在自制屈伸练习器上作单一右膝关节被动屈伸活动,60次/min,30min/d,连续14d,造成股四头肌慢性损伤模型。随机取其中3只模型兔与3只正常兔的股四头肌进行白细胞介素8测定。另外24只模型兔随机均分为治疗组和对照组,其中治疗组行热传导银质针松解术:进针点为沿股中线与膑上缘1cm,2cm,3cm水平线交点(三针),以速眠新Ⅱ号(主要成分:氟哌啶醇、保定宁、新保灵、氯安酮等)按0.2mL/kg肌肉注射麻醉,银质针长10cm,直径1mm,针刺深度为针尖刺至股骨骨膜,针尾用电脑温控仪加热,温度为60℃,时间10min。针刺后单笼饲养。对照组兔自然修复,不做任何干预治疗。于术后1,3,7和14d处死兔子取股四头肌局部肌肉做白细胞介素8水平检测,比较其差异。结果:按实验设计于各时点对两组动物取材进行白细胞介素8的测定,所得数据均纳入最后的统计分析。①股四头肌慢性损伤模型兔骨骼肌中白细胞介素8水平显著高于正常兔[(408±13)和(40±26)ng/L,t=30.962,P=0.00]。②治疗组热传导银质针治疗后1和3d骨骼肌中白细胞介素8水平明显升高,3d时达高峰[(460±14)ng/L],高于同期对照组[(402±14)ng/L];7d以后下降[(306±13)ng/L],低于同期对照组[(396±13)ng/L];14d时明显低于对照组[(207±12)和(357±13)ng/L,t=6.986,11.922,20.800;P<均0.01]。结论:骨骼肌慢性损伤可导致兔股四头肌中白细胞介素8水平升高,热传导银质针治疗3d后因局部炎症反应而使骨骼肌中白细胞介素8水平升高,治疗7d后因密集热传导针的温热作用和长期松解作用而使骨骼肌中白细胞介素8水平明显低于自然修复兔。

摘要：目的观察严重烧伤后大鼠骨骼肌功能变化,并探讨Janus激酶/信号转导及转录激活子3(JAK/STAT3)通路抑制剂对骨骼肌功能的影响及可能的机制。方法采用实验研究方法。取120只8周龄雄性Wistar大鼠,按随机数字表法分为假伤组、单纯烧伤组和烧伤+JAK/STAT3抑制剂组,每组40只,后2组大鼠于背部、腹部造成50%体表总面积Ⅲ度烫伤,假伤组大鼠致假伤。烧伤+JAK/STAT3抑制剂组大鼠腹腔注射JAK/STAT3抑制剂鲁索替尼。伤后0(即刻)、1、4、7、14 d,每组取8只大鼠,采用多通道电生理仪测量脉冲频率20、40、60、80、100、120、140、160 Hz刺激最佳肌肉长度的趾长伸肌产生的比力,测量脉冲频率50 Hz刺激0、10、20、30、60、120、180、240、300 s的最佳肌肉长度的趾长伸肌疲劳期比力,采用紫外分光光度法检测趾长伸肌羰基化合物含量,采用微量法检测趾长伸肌ATP含量。对数据行重复测量方差分析、析因设计方差分析、Bonferroni法、t检验。结果与假伤组比较,单纯烧伤组大鼠伤后0、1、7 d各脉冲频率,伤后4 d除20 Hz外各脉冲频率,伤后14 d于20、40 Hz脉冲频率刺激后趾长伸肌比力均显著下降(P<0.05或P<0.01)。与单纯烧伤组相比,烧伤+JAK/STAT3抑制剂组大鼠伤后1 d除20 Hz外各脉冲频率,伤后4、7、14 d各脉冲频率刺激后趾长伸肌比力显著升高(P<0.05或P<0.01)。与假伤组比较,单纯烧伤组大鼠除伤后7 d刺激240 s外,伤后各时间点刺激各时间点趾长伸肌疲劳期比力显著下降(P<0.05或P<0.01)。与单纯烧伤组比较,烧伤+JAK/STAT3抑制剂组大鼠伤后1 d除刺激60、300 s外各刺激时间点,伤后4 d除刺激240 s外各刺激时间点,伤后7、14 d所有刺激时间点疲劳期比力显著升高(P<0.05或P<0.01)。单纯烧伤组大鼠伤后0、1、4、7、14 d趾长伸肌羰基化合物含量分别为(0.651±0.155)、(0.739±0.194)、(0.618±0.086)、(0.813±0.162)、(0.615±0.115)nmol/mg,明显高于烧伤+JAK/STAT3抑制剂组的(0.538±0.069)、(0.369±0.059)、(0.273±0.061)、(0.334±0.109)、(0.318±0.101)nmol/mg(t=2.446、4.689、8.355、5.754、6.097,P<0.05或P<0.01)和假伤组的(0.196±0.019)、(0.156±0.004)、(0.169±0.023)、(0.156±0.027)、(0.175±0.008)nmol/mg(t=7.219、6.491、10.938、9.182、11.589,P<0.01)。单纯烧伤组大鼠伤后1、4、7、14 d趾长伸肌中ATP含量明显低于假伤组(t=7.159、7.591、7.473、4.026,P<0.01)和烧伤+JAK/STAT3抑制剂组(t=2.295、2.575、2.453、2.997,P<0.05)。结论严重烧伤后大鼠趾长伸肌在不同频率脉冲刺激后比力显著下降,且易于疲劳;阻断JAK/STAT3信号通路可通过降低肌蛋白氧化应激和增加ATP含量,进而减轻烧伤引起的肌力下降,改善其疲劳期肌力下降。

摘要：目的探讨不同高度钝力打击下,皮肤与骨骼肌挫伤后的修复过程差异。方法采用自主设计的自由落体打击装置,以打击高度为主要损伤程度考量因素,将自由落体从15、30、50 cm高度打击造成SD大鼠下肢三种不同程度的挫伤。采用组织形态学方法观察损伤后6 h、24 h、3 d、7 d、13 d皮肤及肌肉的修复过程。结果三个打击高度引起实验大鼠下肢挫伤,基本都可形成皮下组织和(或)肌肉内的出血,在伤后24h内修复的过程基本类似,但表现程度随打击高度增加而明显;15 cm挫伤组在3 d时出血区红细胞已基本融解消散,而30 cm挫伤组则延迟至7 d;伤后13 d时,15 cm和30 cm挫伤组表现基本类似,但50 cm挫伤组则仍处于增生旺盛期。结论随着打击高度的增加,皮肤及肌肉同时出血的比例明显增加,挫伤后组织修复的炎症反应、增生反应表现逐渐加重,修复的过程也出现相应的延长。综合法医学实践应用以及本研究结果,推荐以50 cm高度所致挫伤(2.58 J/cm^2)作为今后挫伤损伤时间研究的实验动物参考模型。

摘要：背景:低功率激光照射能促进骨骼肌损伤愈合的结局早已公认,但其确切作用机制仍不十分明确。目的:通过635nmGaAlAs激光照射急性骨骼肌钝挫伤大鼠,观察腓肠肌Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA的表达。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-07/2007-05在苏州大学体育学院中心实验室和苏州大学附属第一医院完成材料:健康雄性SD大鼠96只,体质量180～220g,随机分为自然愈合组54只和激光治疗组42只。根据取材时间进一步分为:正常对照组、损伤后即刻组及损伤后7个时间点,每组及每个时间点6只。方法:建立大鼠急性骨骼肌钝挫伤模型,激光治疗组采用美国Erchonia EML(ML2)型低功率GaALAs激光器在钝挫伤局部进行照射,自然愈合组不进行照射。主要观察指标:于损伤后即刻、伤后第1,2,3,7,14,21,28天以实时荧光定量聚合酶链反应法观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达,以光镜观察组织学改变,以黄嘌呤氧化酶法测定腓肠肌超氧化歧化酶活力、硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量结果:96只大鼠全部进入结果分析。①苏木精-伊红染色显示,激光照射组肌肉再生速度、愈合质量显著优于自然愈合组。②急性钝挫伤后,肌组织中超氧化物歧化酶活性降低,丙二醛含量增加,在损伤后第7天仍未恢复至正常水平;激光照射组上述指标变化幅度小于自然愈合组,在损伤后第7天已恢复至正常水平。③急性钝挫伤后,肌组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达增加,激光照射组升幅显著小于自然愈合组。结论:结局证明,635nmGaAlAs低功率激光能阻止胶原纤维的过度生成,抑制活性氧生成,减轻脂质过氧化损伤,促进肌肉再生。

摘要：目的 探讨罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂肪酸代谢及腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)α表达和活性的影响.方法 根据随机数字表将40只4～5月龄雄性Wistar大鼠随机分至健康对照组(n=16;给予基础饲料)和高脂喂养组(n=24;给予高脂饲料).喂养4周末,两组各取8只大鼠行高胰岛素.正葡萄糖钳夹实验,评价高脂喂养组胰岛素抵抗状态.造模成功后根据随机数字表将高脂喂养组(n=16)随机分至高脂喂养亚组(n=8)和罗格列酮干预亚组(n=8),继续喂以高脂饲料4周,罗格列酮干预亚组同时给予3 mg·kg-1·d-1罗格列酮灌胃.骨骼肌甘油三酯经氯仿-甲醇抽提后采用全自动生化分析仪测定.运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法 测定骨骼肌AMPKα1及AMPKα2 mRNA表达水平;运用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot方法 测定骨骼肌AMPKα1、AMPKα2及P-AMPKα蛋白表达水平.组间比较采用完伞随机设计的单因素方差分析.结果 第8周末,高脂喂养亚组葡萄糖输注率低于健康对照组[分别为(19.3±3.7)和(30.4±4.2)mg·kg-1·min-1,P0.05);骨骼肌AMPKα2 mRNA、蛋白表达和P-AMPKα蛋白表达高脂喂养亚组低于健康对照组,而罗格列酮干预亚组高于高脂喂养亚组(均P<0.05).结论 高脂饮食可导致大鼠骨骼肌脂质堆积及胰岛素抵抗.罗格列酮干预可增加胰岛素抵抗大鼠骨骼肌AMPKα2表达和AMPKα活性,降低骨骼肌脂质含量,提高胰岛素敏感性.

摘要：目的探讨严重烫伤大鼠骨骼肌中腺苷一磷酸活化蛋白激酶(AMPK)的表达和磷酸化水平变化及其在严重烫伤大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法采用实验研究方法。将100只6周龄雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为假伤组和烫伤组,每组50只。测量2组大鼠体重后,烫伤组背部造成30%体表总面积Ⅲ度烫伤,假伤组模拟致烫伤。伤后6 h及1、3、5、7 d,每组各取10只大鼠,测量体重及趾长伸肌和比目鱼肌重量。伤后6 h及1、3、5、7 d,收集2组大鼠胫骨前肌,采用实时荧光定量反转录PCR法检测肌肉萎缩盒F蛋白(MAFbx)和肌肉特异性环指蛋白1(MuRF1)mRNA表达;采用高效液相色谱法检测腺苷一磷酸(AMP)、腺苷二磷酸和ATP含量,并计算AMP/ATP比值及能荷;采用蛋白质印迹法检测AMPK-α及磷酸化AMPK-α(p-AMPK-α)蛋白表达,并计算p-AMPK-α/AMPK-α比值;2组各时间点样本数均为4。对数据行析因设计方差分析及LSD检验。结果伤前及伤后各时间点,2组大鼠体重相近(P>0.05)。伤后6 h,烫伤组大鼠趾长伸肌重量为(0.107±0.007)g,明显重于假伤组的(0.086±0.007)g(P0.05)。与假伤组比较,烫伤组大鼠伤后6 h胫骨前肌MAFbx mRNA及伤后6 h和1 d胫骨前肌MuRF1 mRNA表达明显上调(P0.05)。伤后6 h和7 d,烫伤组大鼠胫骨前肌p-AMPK-α/AMPK-α比值明显高于假伤组(P<0.05或P<0.01)。结论严重烫伤后大鼠骨骼肌能荷下降,AMP/ATP比值升高,激活AMPK;伤后早期AMPK的活化与MAFbx和MuRF1表达上调和骨骼肌重量下降一致,可能是严重烫伤大鼠骨骼肌萎缩发生的分子机制之一。

摘要：【目的】研究3D设计矫形鞋垫及医学运动锻炼对跖筋膜炎患者足底疼痛及足部功能的彰响。【方法】选取本院骨科2017年9月至2018年9月收治的80例(131足)跖筋膜炎患者为研究对象,以随机数表法分为观察组与对照组,各40例。观察组采取3D设计矫形鞋垫联合医学运动锻炼干预,对照组采取单纯医学运动锻炼干预。对比两组干预前后足部功能障碍恢复情况(包括足部疼痛和行动障碍),对比两组干预前后足部功能评分(AOFAS)、足部功能障碍评分,另对比两组干预前后跖筋膜厚度、最长持续行走时间差异。【结果】观察组干预后AOFAS评分显著高于干预前及对照组干预后,差异有统计学意义(P<0.05);观察组优良率73.00%显著高于对照组(35.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组干预后足部疼痛程度及行动障碍程度评分显著低于干预前及对照组干预后,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组干预后跖筋膜厚度显著低于干预前及对照组干预后,差异有统计学意义(P<0.05);观察组干预后最长持续行走时间显著长于干预前及对照组干预后,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】3D设计矫形鞋垫配合医学运动锻炼可有效缓解患者的足部疼痛及行动障碍,干预效果较好,值得临床推广使用。