摘要：目的探讨缺氧对人真皮Fh向肌Fh表型转化的影响及其机制。方法取对数生长期第3代健康成人真皮Fb，用含体积分数10％FBS的DMEM培养基培养，进行以下5项实验。（1）实验1、2、3均将所取细胞按随机数字表法分为常氧组、缺氧组，每组10皿。常氧组细胞于含体积分数21％氧气环境中培养，缺氧组细胞于含体积分数1％氧气环境中培养。培养0、48h，2组分别取5皿细胞，实验1用实时荧光定量RT—PCR法检测细胞中肌Fh标志物α平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA表达，实验2用蛋白质印迹法检测细胞中α-SMA、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达，实验3用蛋白质印迹法检测细胞中NF-κB蛋白表达。（2）实验4将细胞按随机数字表法分为常氧组、缺氧组、缺氧＋吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）组，每组5皿。前2组细胞同实验1处理，缺氧＋PDTC组细胞同缺氧组细胞处理并在培养基中加入4mL终物质的量浓度为10μmol／LPDTC。培养48h，蛋白质印迹法检测各组细胞中NF—κB蛋白表达。（3）实验5将细胞按随机数字表法分为常氧组、缺氧组、缺氧＋PDTC组、常氧＋PDTC组，每组5皿。前3组细胞均同实验4处理，常氧＋PDTC组细胞同常氧组细胞处理并在培养基中加入4mL终物质的量浓度为10μmol／LPDTC。培养48h，蛋白质印迹法检测各组细胞中α—SMA、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD—t检验。结果（1）与常氧组相应时相点比较，缺氧组Fb培养0h时α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达量以及NF-κB蛋白表达量均无明显变化（t值为-1．21～2．04，P值均大于0．05），培养48h时α—SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达量以及NF—κB蛋白表达量均显著升高（t值为-12．57～-3．44，P值均小于0．01）。（2）培养48h，缺氧组Fh中NF—κB的蛋白表达量为0．83±0．12，显著高于常氧组的0．17±0．06（t=-16．96，P〈0．001）；缺氧＋PDTC组Fh中NF—κB蛋白表达量为0．31±0．08，显著低于缺氧组（t=12．73，P〈0．001）。（3）培养48h，缺氧组Fb中α-SMA、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达量分别为0．73±0．09、1．25±0．10、1．16±0．07，显著高于常氧组的0．14±0．06、0．87±0．08、0．77±0．13（t值为9．24—11．24，P值均小于0．001）；常氧＋PDTC组Fh中α—SMA蛋白表达量为0．24±0．07，显著高于常氧组（t=4．22，P〈0．01），Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达量分别为0．25±0．06、0．32±0．11，显著低于常氧组（t值分别为-4．31、-3．88，P值均小于0．01）；缺氧＋PDTC组F11中α-SMA、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白表达量分别为0．09±0．08、0．38±0．12、0．47±0．08，显著低于缺氧组（t值为11．78～22．98，P值均小于0．001）。结论缺氧能够显著上调人真皮Fb中α—SMA、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达，其可能促进了Fb向肌Fb的表型转化，且可能与NF—κB信号通路的激活有关。

摘要：背景:生物材料植入体内后引发的异物反应会导致其被纤维组织包裹,阻碍植入物与宿主组织的相互作用,损害植入物的功能,进而缩短其寿命。目的:重点讨论生物材料异物反应的调控策略进展,包括基于生物材料表面改性、药物递送和仿生表面修饰的策略,同时探讨了这些方法的优势和局限性。方法:应用计算机在PubMed、Wiley、EBSCOhost、ScienceDirect和Elsevier数据库检索2000年1月至2024年3月期间的相关文献,以“biological materials,foreign body reaction,fibrosis,macrophage,myofibroblasts,inflammation,regulation,tissue repair”为检索词,最终纳入69篇文献进行分析。结果与结论:通过调整生物材料的表面特性(例如尺寸、形状、粗糙度、表面电荷、亲水性以及机械刚度等)能够减轻其对免疫系统的刺激,进而降低发生异物反应的风险;通过可控量的药物刺激产生持久的化学反应,结合使用可控降解的载体材料,可以减轻异物反应;生物材料仿生表面修饰(如两性离子涂层、蛋白质分子涂层等生物活性分子涂层)在短期能有效减轻异物反应。由于植入物和组织再生的免疫反应具有复杂性,在设计和制造植入物时也应考虑异物反应和组织再生之间的整体平衡。

摘要：背景:生物材料植入体内后引发的异物反应会导致其表面纤维化形成(又称为植入物纤维化),即生物材料被纤维组织包裹、使其丧失功能性、产生严重的临床并发症,是组织再生修复领域的一大难题。参与并调控植入物纤维化的关键细胞是巨噬细胞,但巨噬细胞对植入物纤维化进程的影响、机制及抑制纤维化的策略仍然不明确。目的:重点探讨巨噬细胞的极化和分化事件对材料纤维化的影响,包含促纤维化的信号通路,以及基于对巨噬细胞的特异性调控以抑制生物材料纤维化的策略。方法:应用计算机在PubMed,Wiley,EBSCOhost,ScienceDirect和Elsevier数据库检索截至2022年的相关文献,以“Macrophages,Biological materials,Fibrosis,Foreign body reaction,Myofibroblasts,Inflammation,Regulation,Surface topology,Mechanical properties,Chemical signals”为英文检索词,最终纳入60篇文献进行分析。结果与结论:①M1型和M2型巨噬细胞均可能参与生物材料纤维化形成,仅调节巨噬细胞极性的策略并不一定能抑制生物材料纤维化形成。②作为调控巨噬细胞介导生物材料纤维化的关键细胞事件,巨噬细胞向肌成纤维细胞的分化过程可以引起α-平滑肌肌动蛋标志物表达,显示该过程对纤维化有直接作用。③在巨噬细胞促纤维化的信号通路方面,分析认为不同表型的巨噬细胞其纤维化信号通路有可能存在差异。④在利用生物材料物理学特性调控巨噬细胞引起的炎症表达方面,主要有两个作用路径:一是从生物材料表面拓扑学的角度看,构建小于100 nm的图案表面,或者强化生物材料表面粗糙程度,有望实现降低巨噬细胞融合或表达炎性因子,减少巨噬细胞引起的纤维化;二是研究者可以更倾向于设计并制备具有较小弹性模量的生物材料,从而降低因植入物对损伤组织的应力传导,减少因巨噬细胞聚集后而引起的炎性因子表达,改善组织修复过程中的纤维化程度。⑤在利用化学信号调控巨噬细胞引起的炎症表达方面,主要从巨噬细胞来源炎症因子以及巨噬细胞招募、融合、分化的化学信号等方面实施调控策略;因此,有效利用抑制剂和抗氧化剂通过上述路径,可以对转化生长因子β1、活性氧、核转录因子κB及miRNA-21等实现反向调控,从而减缓因巨噬细胞而引起的纤维化作用。

摘要：组织纤维化是器官受损引发的伤口过度自愈反应,持续进展可致器官功能减退乃至衰竭,严重威胁着人类健康。目前抗纤维化药物存在生物利用度低、特异性差和副作用大等问题。此外,复杂的纤维化病理微环境阻碍了药物的有效递送,导致疗效降低。因此,如何实现精准、高效的递药以逆转纤维化已成为研究热点。重点针对肝、肺、肾纤维化,综述了近年来抗纤维化药物递送系统和主动靶向策略,为设计安全有效的抗纤维化药物递送系统,实现组织纤维化的高效治疗提供参考。

摘要：目的观察黄连膏对全层皮肤缺损小鼠创面愈合的影响并探讨其相关机制。方法取30只雄性C57BL／6J小鼠，在每只小鼠背部造成直径为7．5mm的圆形全层皮肤缺损创面，按随机数字表法将小鼠分为黄连膏组和基质组，每组15只。伤后1d开始，黄连膏组和基质组小鼠创面分别涂抹黄连膏和基质，2次／d。每组选取5只小鼠，观察伤后0、3、7、10、14d创面情况并计算创面愈合率。2组均于伤后3、7d分别处死未行大体观察的10只小鼠中的5只，伤后14d处死行大体观察后的5只小鼠，取创面组织及距创缘2mm内皮肤组织，HE染色观察组织形态进行组织学评分，免疫荧光染色观察组织中a平滑肌肌动蛋白（0l—SMA）和Ki-67双阳性细胞（肌成纤维细胞）表达，ELISA法检测组织中TGF-β和胶原蛋白的蛋白表达量。对数据行重复测量方差分析、析因设计方差分析、两独立样本t检验、单因素方差分析及Bonferronni检验或校正。结果（1）伤后0d，2组小鼠创面均红肿；伤后3、7d，2组小鼠创面均结痂、无红肿；伤后10d，黄连膏组小鼠创面面积明显缩小，基质组小鼠创面缩小面积小于黄连膏组；伤后14d，黄连膏组小鼠大部分创面愈合，基质组小鼠创面尚未完全愈合。伤后3、7d，2组小鼠创面愈合率相近（￡值分别为0．64和1．90，P值均大于0．05）；伤后10、14d，黄连膏组小鼠创面愈合率分别为（76±7）％、（93±5）％，显著高于基质组的（48±9）％、（68±11）％（t值分别为7．44和3．89，P值均小于O．01）。2组小鼠伤后7、10、14d创面愈合率均显著高于组内前一时相点（P值均小于0．01）。（2）伤后3d，2组小鼠创面组织学评分相近（t=-0．76，P〉0．05）；伤后7、14d，黄连膏组小鼠创面组织学评分分别为（7．0±1．6）、（11．6±2．1）分，显著高于基质组的（4．2±1．3）、（7．2±1．3）分（t值分别为1．96和2．50，P〈0．05或P〈0．01）。2组小鼠伤后7、14d创面组织学评分均显著高于组内前一时相点（P值均小于O．01）。（3）伤后3、7d，黄连膏组小鼠创面组织中α=SMA和Ki-67双阳性细胞百分比分别为（35±12）％、（62±10）％，显著高于基质组的（17±12）％、（34±6）％（t值分别为-2．48和-5．25，P〈0．05或P〈0．01）；伤后14d，黄连膏组小鼠创面组织中α—SMA和Ki-67双阳性细胞百分比为（25±5）％，明显低于基质组的（44±17）％（￡=2．50，P〈0．05）。黄连膏组小鼠伤后7d创面组织中α-SMA和Ki-67双阳性细胞百分比显著高于组内伤后3、14d（P值均小于0．01），基质组小鼠伤后7、14d创面组织中α-SMA和Ki-67双阳性细胞百分比显著高于组内前一时相点（P值均小于0．05）。（4）伤后3、7d，黄连膏组小鼠创面组织中TGF—β蛋白表达量分别为（396±45）、（722±96）pg／mL，显著高于基质组的（290±42）、（382±62）pg／mL（f值分别为-8．17和-6．65，P值均小于0．01）；伤后14d，2组小鼠创面组织TGF-β蛋白表达量相近（t=1．60，P〉0．05）。黄连膏组小鼠伤后7d创面组织中TGF—β蛋白表达量显著高于组内伤后3、14d（P值均小于0．01），基质组小鼠伤后7、14d创面组织中TGF-β蛋白表达量显著高于组内前一时相点（P值均小于0．05）。伤后3d，2组小鼠创面组织中胶原蛋白的蛋白表达量相近（t=1．99，P〉0．05）；伤后7、14d，黄连膏组小鼠创面组织中胶原蛋白的蛋白表达量分别为（47±10）、（70±14）ng／mL，显著高于基质组的（34±10）、（42±12）ng／mL（t值分别为3．15和3．52，P〈0．05或P〈0．01）。2组小鼠伤后7、14d创面组织中胶原蛋白的蛋白表达量均显著高于组内前一时相点（P〈0．05或P〈0．01）。结论黄连膏可能通过促进肌成纤维细胞生成，提高TGF-β、胶原蛋白的蛋白表达量，从而促进全层皮肤缺损小鼠创面愈合。

摘要：目的 观察扩张皮肤移植后的变化,探讨扩张皮肤远期回缩的机制.方法 选用8条普通成年犬,在每条犬背部设计4个解剖部位相对应的皮瓣下置入扩张器,注水8周后行扩张器取出术,随机将8条犬分为4组,每组2只,在犬皮肤扩张移植时和移植后3、6周及3、6个月检测其组织学、电镜变化及α-平滑肌肌动蛋白（αt-SMA） mRNA和蛋白的表达.结果 表皮层和真皮层移植后6个月基本恢复正常;电镜下可见扩张后表皮细胞排列紧密,真皮层于扩张后成纤维细胞数量较多,功能活跃,真皮深层有肌成纤维细胞存在,其胞质内微丝明显.移植后3个月成纤维细胞功能恢复正常,胶原排列趋于整齐,肌成纤维细胞消失,组织学在3～6个月时恢复到对照组水平.α-SMA mRNA和蛋白水平的表达在3周后达到最高,分别为1.204 ±0.011和1.533 ±0.012,3个月时明显降低为0.910±0.008和0.519±0.007,差异有统计学意义（P＜0.05）,α-SMA mRNA和蛋白水平变化趋势一致.结论 扩张皮肤的组织学变化在移植后6个月逐渐恢复正常,扩张皮肤远期回缩的机制可能与扩张皮肤内的肌成纤维细胞数量和功能状态有关.

摘要：背景:目前,尚未在体外环境中构建出与正常气管软骨生物学和机械特性相似的组织工程化气管软骨。目的:测定体外和体内培养环境中软骨细胞-DegraPol支架复合物的机械力学值,探讨提高管状组织工程软骨力学适应性的培养方法。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-12/2008-02在深圳市人民医院医学研究中心完成。材料:分离培养2周龄SD幼鼠的剑突软骨细胞及肌成纤维细胞,分别接种DegraPol管状支架上,制备软骨细胞-支架复合物及肌成纤维细胞-支架复合物,以空白支架为对照。方法:将3组支架在2种培养条件下培养:①体外静态培养3周和6周。②体外培养3d后置于同系大鼠体内大网膜包裹1,2和6周。主要观察指标:体外/体内培养条件下的软骨细胞-支架复合物的机械力学强度。结果:体外培养条件下,最大应力和应变值培养6周者低于培养3周(P<0.05),软骨细胞-支架组的支架最大应力值和应变值高于其他2组(P<0.05)。体内培养条件下,3组最大应力值随培养时间延长而增加,培养6周的数值均高于培养1周,软骨细胞-支架组最大应力值高于其他2组(P<0.05);3组最大应变值随培养时间延长而降低,培养6周的数值均低于培养1周(P<0.05)。无论体内还是体外培养获得的组织工程软骨的生物力学强度均远远低于正常大鼠气管软骨。结论:体内培养方式有利于提高工程化组织的力学强度,但单纯静态体外培养或者体内培养获得的软骨细胞-支架复合物力学强度尚不能用于原位气管移植。

摘要：肾小管间质纤维化（renal interstitial fibrosis，RIF）是各种慢性肾脏病进展到终末期肾衰竭的主要病理基础。其主要病理改变表现为肾间质细胞外基质堆积、肾小管萎缩、肾间质肌成纤维细胞增多等，其过程受多种因素的共同影响，而肾间质肌成纤维细胞是合成细胞外基质的主要细胞。已有研究表明，

摘要：人体皮肤软组织可随深部结构的膨胀而逐渐伸张,这一生理病理现象给予整形外科医生以启发。1957年,Neumann将聚乙烯气球(囊)埋置于乳突区皮下致使组织扩张,试图为一例创伤性耳廓部分缺损的患者施行耳廓再造术,但因供注射空气用的聚乙烯导管的一端置于皮外而失败。1976年, Radovan发展了Neumann的设计思路,发明了以硅胶制成的可控式扩张器,后经不断完善并用于临床获得成功。1985年,张涤生院士率先将这一技术引进国内并取得良好的临床效果。