摘要：目的建立组织工程心肌研究中系统观察免疫组化检测结果的程序与方法。方法取新生大鼠心脏制作石蜡组织切片;用0.25%胰酶消化法分离原代新生大鼠心肌细胞,一部分进行细胞爬片培养,一部分与液态胶原混合构建组织工程心肌并施加力学拉伸刺激,制作组织工程心肌石蜡组织切片。对三者分别进行心肌肌钙蛋白t(ctnt)及细胞间隙连接蛋白43(Cx43)抗体的免疫组化染色。比较观察天然心肌组织、体外培养心肌细胞及组织工程心肌组织免疫组化的检测结果,对其形态结构的变化进行综合分析。分别选取5个不同视野对细胞总数和ctnt阳性细胞进行计数,计算百分比。在细胞和再造心肌组织培养过程中观察自发收缩的细胞区域与ctnt着色区域的关系。结果天然心肌和组织工程心肌切片分别反映了天然在体心肌和体外构建心肌的细胞形态和组织结构特征;心肌细胞爬片显示了体外心肌细胞与非心肌细胞的形态,以及随体外培养时间的延长其形态和数量比例的改变。细胞在体外培养时间越长,成纤维细胞比例越高。尽早将分离的原代新生大鼠心肌细胞与液态胶原混合体外再造心肌组织进行三维拉伸培养有助于抑制其中的成纤维细胞的增殖速度。将分离细胞爬片培养4h后可相继观察到能自发收缩的细胞,其收缩区域与染色片中ctnt的着色区域基本相符;再造的组织工程心肌的收缩自拉伸后48h开始,逐渐从单个细胞到肌束再到整条再造心肌,频率逐渐加快,从1～2/min到5～10/min。结论建立了观察与分析组织工程心肌免疫组化结果的程序和方法,为优化实验设计与条件提供了客观参数,也为构建其他组织的形态学观察与分析方法提供了有利借鉴。

摘要：背景:高原训练作为一种有效提高机体耐力和速度的训练方法,日益为广大教练员所接受,但高原训练的最适宜海拔高度是高原训练中亟待解决的问题。目的:建立大鼠模拟高原训练模型,观察心肌细胞结构在高原训练中的变化,为高原训练的生理学研究提供科学的动物模型,为运动员高原训练提供更加科学的理论依据。设计:以航空航天医学海拔高度区域划分为依据,将实验动物分成不同海拔高原训练组和各对照组,分别进行形态学、细胞亚细胞电镜观察以及心肌肌钙蛋白t的生化分析,从形态学和生物化学两种途径对大鼠心肌损伤进行全面分析。单位:清华大学体育部运动人体科学实验室。材料:实验于2000-01/2002-12在清华大学运动人体科学实验室完成,选用SD大鼠372只。实验材料包括低压氧舱,日产H-500型透射电镜,血清心肌肌钙蛋白t指标的测试试剂盒。方法:所有大鼠372只先进行1周的适应性游泳训练后,随机分成9大组,54个小组,本文仅对其中6组进行分析,分别为模拟急性高原4000m缺氧训练组(n=32)、缺氧不训练对照组(n=24)、模拟急性高原4000m复氧训练1周组(n=32)、模拟急性高原4000m复氧训练2周组(n=32)、递增高原训练组(n=32)、平原训练对照组(n=24)。除平原训练对照组在正常条件下生活与训练外,其他各组均在模拟高原环境中进行游泳训练,每天1小时,每周训练7天,共训练4周。采用酶联免疫吸附法对大鼠血清心肌肌钙蛋白t指标进行测试与观察,模拟海拔4000m急性缺氧训练4周复氧训练2周的大鼠训练结束后,处死大鼠,取左右心室壁一小块心肌组织,经处理并采用醋酸铀及枸橼酸铅进行双染色后,采用日产H-500型透射电镜对切片进行的超微结构观察。主要观察指标:大鼠在不同海拔高度训练状态下血清心肌肌钙蛋白t指标与心肌超微结构电镜图谱测试及观察结果。结果:选用SD大鼠共计304只,无一只死亡,全部进入结果分析。①各组大鼠体质变化:缺氧训练组与缺氧不训练对照组、平原训练对照组之间的心肌增长率差异都有显著性(P<0.01)。而缺氧不训练对照组与平原训练对照组之间差异也有显著性(P<0.05),缺氧训练组、缺氧不训练对照组以及平原训练对照组的体质增长率分别是:22.41%、28.14%、33.48%,3组比较差异均有显著性(P<0.01～0.05)。②心肌肌钙蛋白t测试结果与统计分析:缺氧训练组和缺氧不训练对照组相比,心肌肌钙蛋白t值差异均有显著性,且随着训练周数的增加,心肌肌钙蛋白t值增大,并且差异有显著性(P<0.01)。在模拟4000m以下海拔进行为期1～4周的高原缺氧训练,各组心肌肌钙蛋白t值从0.09μg/L上升到0.128μg/L。在回到平原复氧训练2周后,各组心肌肌钙蛋白t指标均可逆转到0.09μg/L。③电镜观察结果:海拔4000m急性缺氧训练4周,心肌线粒体结构随训练时间的延长出现轻微肿胀,回平原复氧训练2周的大鼠心室肌纤维粗细肌丝形成的明、暗带清晰分明,肌节排列整齐,肌束之间除了含有成簇或零散分布的糖原颗粒外,还存在大量的线粒体,没有观察到浊肿、空泡变性、溶解坏死及间质水肿等病理现象的发生。结论:大鼠在海拔4000m以下的任何高度上进行训练都是比较安全的。如果用急性直接进入海拔4000m高度进行较大强度运动训练,大鼠心脏亚细胞结构发生轻微损伤,心肌肌钙蛋白t浓度增加,采用递增海拔高度的形式进行训练,对心肌损伤影响较轻,训练后恢复也较快。

摘要：为了研究低压电刺对牦牛肉 AtP、Calpain活力和细胞骨架蛋白降解的影响及其嫩化机理,将24头甘南牦牛随机分为2组,每组12头,屠宰,按试验设计对宰后牦牛胴体进行电刺激（ES）（输出电压21 V、功率50 W、时间90 s）和常规冷却排酸 NES（0-4℃、风速0.5 m/s）处理,并于0、24、72 h测定牦牛背最长肌的 AtP、calpain活力、糖原、剪切力值和细胞骨架蛋白降解情况.结果表明：宰后72 h AtP 下降了14.97%,较 NES 组下降幅度达6.59%,ES显著提高了AtP的下降速率；宰后0 h,ES组糖原较NES组低12.46%,加快了糖酵解速率；ES组在宰后0 h m-calpain和μ-calpain较 NES组活力分别提高了0.318 U/mL 和0.31 U/mL,同时提高了 m-calpain和μ-calpain活力,过早激活了μ-calpain；AtP与m-calpain有极显著的负相关性（P〈0.01）,而μ-calpain与糖原含量、剪切力三者相互之间有极显著的正相关性（P〈0.01）；低压电刺激极显著提高牦牛肉最终嫩度（P〈0.01）；电刺激在速度和数量上显著加速了Desmin和troponin-t的降解,加快了牦牛肉成熟,缩短了成熟时间.

摘要：目的探讨对比剂肾病(CIN)和/或围手术期心肌损伤(PMI)对经皮冠状动脉介入(PCI)术后患者近期预后的影响。方法研究设计为前瞻性队列研究。研究对象选自2015年8—10月在中国人民解放军总医院第一医学中心心血管内科进行PCI术的急性冠状动脉综合征(ACS)患者。根据术后是否发生CIN和PMI将患者分为无损伤组、CIN组、PMI组和CIN+PMI组4组。术后随访12个月,终点指标为主要不良心血管事件(MACE)。比较4组患者基本特征(性别、年龄、ACS类型、合并基础疾病、既往史等)、术前血清肌酐、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、高敏肌钙蛋白t(hs-ctnt)、肌酸激酶(CK)MB、C反应蛋白、N端B型利钠肽前体(Nt-proBNP)水平和术后48-h内血清肌酐、hs-ctnt、CK-MB、Nt-proBNP水平及MACE发生情况的差异,采用COX多因素回归分析CIN和/或PMI对患者术后12个月内MACE发生情况的影响。结果纳入队列研究的患者共299例,男性216例(72.2%),女性83例(27.8%);年龄26~84岁,平均60岁;St段抬高型心肌梗死125例(41.8%);纳入无损伤组、CIN组、PMI组和CIN+PMI组患者分别为182例(60.9%)、18例(6.0%)、79例(26.4%)和20例(6.7%)。全组患者CIN发生率为12.7%(38/299),PMI发生率为33.1%(99/299)。12个月随访期间研究对象无丢失。299例患者中24例发生26例次MACE[心源性死亡、非致死性心肌梗死、靶血管血运重建、卒中各为3、5、5、13例次),MACE发生率为8.0%。无损伤组、CIN组、PMI组和CIN+PMI组MACE发生率分别为1.6%(3/182)、11.1%(2/18)、11.4%(9/79)和50.0%(10/20),组间差异有统计学意义(P<0.001)。COX多因素回归分析结果显示,与无损伤组比较,其他3组患者发生MACE的风险均增加[风险比(hazard risk,HR)=6.897,95%置信区间(confidence interval,CI):1.152~41.281,P=0.034;HR=7.623,95%CI:2.063~28.167,P=0.002;HR=43.087,95%CI:11.817~157.098,P<0.001]。结论CIN和PMI均可增加接受PCI治疗患者术后12个月内发生MACE的风险,当两者共存时,MACE发生风险进一步增加。

摘要：探讨单孔腹腔镜下胆囊切除的方法和临床应用。方法：经临床筛选的胆囊结石及胆囊息肉需行胆囊切除的患者10例，其中3例胆囊息肉、7例胆囊结石患者。结果：10例患者均成功地在单孔腹腔镜下施行了胆囊切除术，无中转开腹，手术时间60～100min，术中出血量10mL左右，术后住院3～5d，未发现并发症。结论：经过临床选择的病例，单孔腹腔镜胆囊切除是安全可靠的微创方法，对腹腔镜胆囊切除手术更具微创意义。

摘要：目的评价联合检测肌钙蛋白t(ctnt)和N末端B型利钠肽原(Nt-proBNP)在危重病患者预后中的作用。方法通过检测130例危重病患者血清ctnt和Nt-proBNP水平,比较APACHEⅡ<25分与APACHEⅡ≥25分组、有MODS组与无MODS组、死亡组与存活组的ctnt阳性率和Nt-proBNP阳性率;比较ctnt和Nt-proBNP双阳性组与ctnt和Nt-proBNP单阳性组间的病死率。结果 130例危重病患者APACHEⅡ<25分与APACHEⅡ≥25分组间ctnt阳性率及Nt-proBNP阳性率比较,差异具有统计学意义(P<0.01);有MODS组与无MODS组间ctnt阳性率比较,差异具有统计学意义(P<0.01),Nt-proBNP阳性率比较,差异具有统计学意义(P<0.05);死亡组与存活组间ctnt阳性率比较,差异具有统计学意义(P<0.01),Nt-proBNP阳性率比较,差异具有统计学意义(P<0.05);ctnt和Nt-proBNP双阳性组与ctnt和Nt-proBNP单阳性组间病死率比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 ctnt阳性或Nt-proBNP阳性在评估危重病患者的病情严重程度及预后中发挥重要作用,而联合检测血清ctnt和Nt-proBNP可更加有效地判断危重病患者的预后。