摘要：RNAscope是以新型探针设计为优势的新一代原位杂交技术,现正逐步应用于多个研究领域,研究范围亦在不断拓展之中。我国肝病人口基数大,基于组织学生物信息检测及研究评价的需求性大,该技术有独特原位水平的特异性与敏感性,弥补了免疫组织化学与传统原位杂交的技术缺陷。实现多重性及单分子水平检测,可在肝病领域多个方面进行核酸水平的定性、定量分析并与组织原位结合实现可视化评价以凸显"金标准"的价值。现就近年来RNAscope技术在肝脏组织学方面的应用进行综述。

摘要：目的明确肝病模型鼠——TX小鼠的生理特点，为以其为模型的研究提供选择适合月龄动物的理论依据和自然生理情况下的对照值。方法选取7～12个月TX小鼠和同系DL小鼠，每个月龄雌雄各3只，测定肝、脑、肾和血清中的金属铜含量，测定血清铜蓝蛋白及AST等指标，HE染色观察组织病理学改变，电镜下观察超微结构。应用SPSS13．0软件进行统计分析，组间比较采用两组完全随机化设计资料均数的t检验。结果10、11个月龄时AST含量，TX小鼠的分别为（218．3±21．5）U／L和（197．5±38．3）U／L，DL小鼠分别为（171．5±24．1）U／L和（165．0±25．8）U／L，两组小鼠AST含量比较，t值分别为3．335和1．689，P值均〈0．05，差异有统计学意义。其他月龄小鼠AST含量，两组差异无统计学意义。肝、脑、肾的脏器每千克组织铜含量，TX小鼠平均值分别为（750．0±85．5）mg、（39．7±2．2）mg和（29．8±5．0）mg，DL小鼠平均值分别为（11．6±1．5）mg、（16．8±0．9）mg和（14．2±1．0）mg，TX小鼠肝、脑、肾脏器的铜含量均高于DL小鼠，t值分别为21．16，23．60，7．47，P值均〈0．05，差异有统计学意义。结论TX小鼠可作为一个理想的肝损害动物模型，针对实验目的不同应选择相应月龄的TX小鼠；TX小鼠存在自我恢复的趋势，以其为模型的研究应设立生理情况对照组，以便更好地比较出治疗处理的效果。

摘要：目的探讨Toll样受体4（TLR4）是否参与了酒精性肝病肠道高通透性。方法小鼠随机分为对照组和乙醇组，饲养6周后处死，检测血清AIT、AST及进行肝脏HE染色以验证造模是否成功，检测肠道通逮I生指标（血清内毒素水平和尿液乳果糖／甘露醇比值）及进行结肠组织HE染色，酶联免疫吸附法和免疫组织化学法检测TLR4在肠道的表达I青况。体外培养肠上皮细胞Caco-2，检测不同浓度乙醇溶液处理后细胞通透性和TLR4的表达。两组间比较采用成组设计f检验，多组间比较采用单因素方差分析LSD法。结果对照组和乙醇组小鼠血清越JT分别为（30．9±4．4）U／L和（46．5土6．9）U／L，f=3．012，P〈***分别为（29．3±3．8）U／L和（53．3±7．9）U／L，t=3．207，P〈0．01;内毒素分别为（O．27±0．04）Eu／L和（0．33±0．05）Eu／L，t=3．184，P〈0．01；尿液乳果糖／甘露醇比值分别是2．17％±0．31％和2．59％土0．44％，t=2．550，P〈0．05I小肠TLR4含量分别为（7．4±1．2）ng／ml和（13．1±2．0）ng／ml，t=3．626，P〈0．01I结肠TLR4含量分别为（9．1±1．6）ng／ml和（18．5±2．7）ng／ral，t=3．417，P〈0．01。结肠组织学无明显差异l免疫组织化学结果显示TLR4在乙醇组肠上皮细胞膜和胞质内呈弥漫性或颗粒状分布，对照组几乎无表达。体外实验可见Caco-2细胞通透性和TLR4的表达水平随乙醇浓度升高而增加。结论慢性乙醇摄入诱发肠上皮细胞TLR4大量表达，TLR4过度激活参与了肠上皮细胞的高通透性。

摘要：目的探讨内质网应激在大鼠酒精陡肝病肝细胞凋亡中的作用。方法采用酒精灌胃的方法建立大鼠酒精性肝病模型，分别于4、8、12、16周随机处死动物，留取血清和肝组织，同时设置正常对照组。检测大鼠血清总同型半胱氨酸（tHcy）浓度，比色法测定大鼠肝组织胱硫醚β合成酶（CBS）活性，逆转录-聚合酶联反应和免疫组织化学法分别检测肝组织葡萄糖调节蛋白78（GRP-78）、需钙蛋白酶2（calpain-2）和caspase-12前体蛋白（procaspase-12）的mRNA和蛋白质表达情况；脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测肝细胞凋亡情况。组间数据比较用完全随机设计的方差分析（SNK法或Tamhane’s法），相关陛分析用Pearson直线相关分析法。结果模型组大鼠16周末出现肝细胞弥漫小泡性脂肪变性、窦周纤维化，汇管区纤维组织增生并有纤维间隔形成。正常对照组及造模4、8、12、16周时，大鼠血清tHcy浓度分别为（5．10±0．56）μmol／L、（6．95±0．17）μmol／L、（8．36±0．17）μmol/L、（9．45±0．28）μmol／L和（9．85±0．12）μmol／L，肝组织匀浆CBS浓度分别为（613．92±17．09）U／g、（573．53±24．96）U／g、（503．42±44．67）U／g、（438．02±14．67）U／g和（390．45±31．17）U／g，随着造模时间的延长，tHcy浓度逐渐升高（F=338．60，P〈0．01），CBS活性逐渐降低（F=91．90，P〈0．01），且二者呈负相关关系（r=-0．632，P〈0．01）。随着造模时间的延长，GRP-78、calpain-2和caspase-12的mRNA相对表达量逐渐升高（F值分别为216．19、128．91和95．80，P值均〈0．01），且GRP-78mRNA的表达与tHcy浓度呈正相关（r=0．617，P〈0．01）GRP-78和calpain-2的蛋白质表达量逐渐增多，procaspase-12的蛋白质表达量逐渐减少。正常对照组及造模4、8、12、16周的大鼠肝细胞凋亡指数分别为2．17％±1．06％、29．59％±2．62％、40．91％±4．70％、57．39％±6．13％和65．71％±9．78％，呈上升趋势（F=188．30，P〈0．01）。结论肝细胞凋亡可能与CBS涪陛降低导致高同型半胱氨酸血症，从而诱发内质网应激，进而激活calpain-2和caspase-12的信号转导通路有关，这可能为酒精l生肝病发病的重要机制之一。

摘要：背景:现代医学对酒精性肝损伤的发病机制尚未完全清楚,除了戒酒、支持、对症治疗外,尚无特效的治疗方法。中医药对本病的治疗有着明显的优势,既能改善临床症状又能调理机体免疫功能,有着较好的发展前景。目的:从整体观念出发探讨柴胡、黄芩以不同剂量比例配伍(2∶1,1∶1,1∶2)对大鼠急性酒精性肝损伤的防治作用。设计:完全随机分组设计,空白对照实验。单位:河南中医学院药学院临床中药学实验室。材料:实验于2002-09/11在河南中医学院临床中药学实验室完成。选用健康Wistar大鼠96只,雄性。随机将96只大鼠分为8组:空白组,模型组,柴胡组,黄芩组,小柴胡组,柴胡黄芩2∶1组,柴胡黄芩1∶1组,柴胡黄芩1∶2组,每组12只。方法:①按质量比2∶1,1∶1,1∶2分别称取柴胡、黄芩(480g,240g;360g,360g;240g,480g)制备柴胡水煎液。除空白组(以等体积的生理盐水溶液灌胃)外,其余各组均灌胃给予56度二锅头白酒7mL/kg,2次/d,连续10d造模结束。自造模第1天起,每日灌胃给药2次。空白组和模型组灌服等体积的蒸馏水,其余各组分别灌胃给予相应的药物水煎液,小柴胡组剂量为10g/kg,其余各给药组剂量皆为12g/kg。②末次给酒后16h,腹主动脉取血制备血清。迅速摘取肝脏、脾脏、胸腺、肾上腺。计算脏器指数:脏器指数脏器质量(g)/体质量(g)×100%。计算肾上腺维生素C含量(mg/g):狖[(测定管A值-空白管A值)/(标准管A值-空白管A值)]×标准管浓度(6mg/L)×样品测试前的稀释倍数/组织中蛋白含量(g/L)狚。③组间计量资料比较采用方差齐性检验及单因素方差分析。主要观察指标:各组大鼠肝脏、脾脏、胸腺、肾上腺(右侧)指数及右侧肾上腺中维生素C含量比较。结果:实验过程中模型组大鼠死亡3只,柴胡组、柴胡黄芩1∶1组各死亡2只,其余各组均死亡1只,进入结果分析空白组12只,模型组9只,柴胡组、柴胡黄芩1∶1组各10只,其余各组11只。①各组大鼠肝脏、脾脏、胸腺、肾上腺(右侧)指数的比较:各组大鼠肝脏指数差异不明显。模型组脾脏指数、胸腺指数、肾上腺指数均明显低于空白组(P<0.05～0.01)。柴胡组脾脏指数明显高于模型组,能使降低的脾脏指数趋于正常(P<0.05);黄芩组、柴胡黄芩1:1组、1:2组、小柴胡组胸腺指数明显高于模型组(P<0.05);柴胡黄芩1:2组、小柴胡组肾上腺指数明显高于模型组(P<0.05)。②各组大鼠右侧肾上腺中维生素C含量比较:模型组肾上腺组织中维生素C含量与空白组比较,差异不明显。柴胡组、小柴胡组、柴胡黄芩配伍组肾上腺中维生素C含量均明显低于模型组(P<0.05～0.01),以柴胡黄芩1∶1组的作用趋势最显著(P<0.01)。结论:干预肝脾、胸腺、肾上腺功能损伤可能是柴胡黄芩配伍抗急性酒精性肝损伤的机制之一;各配伍比例中以柴胡黄芩1∶2组作用最明显。

摘要：目的比较^131I及^131I联合保肝药物治疗Graves甲状腺功能亢进症（简称甲亢）合并肝损害的效果。方法采用随机区组设计将120例Graves甲亢合并肝损害患者分为2组：治疗组60例，应用^131I＋还原型谷胱甘肽片治疗；对照组60例，应用^131I治疗。所有患者采用个体化剂量口服^131I治疗，并于^131I治疗后1、3和6个月复查FL、Fr4、TSH、AIJT、AST及总胆红素（TBIL），观察患者Graves甲亢及肝功能恢复情况。采用电化学发光法测定血清FL、FT4、TSH水平；采用速率法检测血清ALT、AST水平，重氮盐法检测血清TBIL水平。计算并比较2种方法治疗的治愈率和有效率。数据比较采用f检验和，检验。结果2组患者^131II治疗后1、3和6个月甲状腺激素水平较治疗前差异均有统计学意义。治疗后2组甲状腺激素水平分别为：治疗组FT3≤（17．13±5．22）pmol／L、FT4≤（51．26±20．60）pmol／L、TSH≥（0．11±0．09）mU／L；对照组相应指标水平为≤（17．41±5．18）pmol／L、≤（50．60±20．45）pmol／L、≥（0．12±O．09）mU／L（t=5．1843—14．8564，P均〈0．01），而组间相比差异均无统计学意义（t=0．1478～0．3902，P均〉0．05）。治疗组服131I后1、3、6个月肝功能指标（ALT、AST和TBIL）明显降低，与治疗前差异均有统计学意义（t=6．4080—13．8795，P均〈0．01）。对照组服^131I后1个月患者肝功能指标开始降低，但与治疗前差异均无统计学意义（t=1．3262～1．9700，P均〉0．05）；3个月和6个月肝功能指标明显降低，与治疗前差异均有统计学意义（t=6．0144～10．5171，P均〈0．01）。131I治疗后6个月治疗组与对照组Graves甲亢的治愈率分别80．O％（48／60）和78．3％（47／60），有效率为98．3％（59／60）和95．O％（57／60），2组相比差异均无统计学意义（X2=0．0505和1．0344，P均〉0．05）；2组患者肝损害恢复正常率分别为88．3％（53／60）和65．O％（39／60），有效率为96．7％（58／60）和88．3％（50／60），差异均有统计学意义（X^2=9．1304和8．1067，P均〈0．05）。结论131I治疗Graves甲亢合并肝损害疗效良好，联合应用保肝药物可促进患者肝功能的恢复。

摘要：目的探讨GSTA1、GSTM3基因多态性与汉族人群抗结核药物性肝损伤的关系。方法采用病例对照研究设计,随机选取抗结核治疗致肝损伤患者199例作为病例组,无肝损伤患者199例作为对照组。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测研究对象GSTA1、GSTM3基因多态性,应用SPSS 17.0统计软件进行分析。结果 GSTA1基因C-69T位点的C、T等位基因在病例组的分布频率分别82.4%、17.6%,在对照组的分布频率分布为88.2%、11.8%,经检验得差异有统计学意义(2=5.30,P=0.027);GSTM3在内含子6处3个碱基未缺失型(即野生型A)与缺失型(即突变型B)在病例组的分布频率分别为69.3%、30.7%;在对照组的分布频率为72.1%、27.9%,组间差异无统计学意义(2=0.73,P=0.436)。GSTA1(T)/GSTM3(B)与GSTA1(C)/GSTM3(A)比较,差异有统计学意义(2=5.31,P=0.021)。GSTA1(T)/GSTM3(A)与GSTA1(C)/GSTM3(A)相比较差异无统计学意义,但GSTA1(T)/GSTM3(A)发生ADIH风险升高(OR=1.572)。在调整了吸烟、饮酒影响因素后,GSTA1 C-69T位点基因多态性与ADIH发生仍相关,其调整OR值为1.773。结论 GSTA1基因多态性可能与抗结核药物性肝损伤发生相关;尚不能认为GSTM3基因多态性与抗结核药物性肝损伤发生存在相关性;GSTA1/GSTM3联合突变会导致抗结核药物性肝损伤的发生风险升高,GSTA1单一突变与均不突变相比,也会使ADIH发生的风险升高。

摘要：近年来,药物性肝损伤(DILI)在我国发病率呈明显的增高趋势,急性重症药物性肝损伤致死率也在增加,严重影响了人民的健康。主要影响因素包括:抗生素的滥用、药品广告不切实际的宣传、农村地区过期药品的使用以及不当的用药方法等等,以上均导致了药物性肝损伤的发生。这就促使我们必须对药物性肝损伤引起足够的重视,为此,必须制定切实可行的防范措施,尽可能避免DILI的发生。

摘要：作为循证医学最高级别的随机对照临床研究(RCT)是目前肝脏病领域的热点,也是近50年来肝脏病学领域的进展之一。其研究结果不仅可提示某种治疗措施的有效性和安全性,提供最佳治疗策略依据,更为重要的是,通过设计科学、严格质控的研究,可提供强有力、有价值、客观的循证医学证据指导临床实践。目前国内外发布的肝脏病领域不同疾病的诊疗指南或指导原则无一例外的均建立在大量RCT所提供依据的基础上,因此,其重要性可见一斑,日益受到关注是必然的。

摘要：肝脏结构的复杂性和功能的多样性决定了肝功能试验指标的广泛性.目前临床上所使用的各种肝功能检查指标已达数百种之多,他们一般都是以肝脏的某种代谢功能为依据而设计分组[1],但只能反映某个侧面.