摘要：目的探讨肝细胞性肝癌(HCC)的影像学征象与手术预后的关系,深入认识影像征象的意义,为临床设计更加合理的治疗方案提供客观依据。方法搜集65例经手术病理证实的HCC患者资料。65例HCC患者术前都进行CT或MRI平扫及增强扫描,其影像学征象包括肿瘤包膜、大小、肿瘤血管、门静脉癌栓、肿瘤坏死、合并肝硬化、肿瘤数目(单发或多发)等情况,将上述影像征象与预后进行统计分析。结果 65例HCC手术患者,手术前行影像学扫描,发现其中有包膜43例,无包膜22例;≤3 cm 19例,>3 cm 46例;MSCT或MRI多期增强扫描,HCC在动脉期显示肿瘤血管41例,未见肿瘤血管显示24例;门静脉癌栓15例,未见癌栓50例;肿瘤坏死51例,14例未见坏死灶;合并肝硬化16例,未见肝硬化49例;肝内出现多发结节53例,单发结节12例。65例术后随访2年,肿瘤转移或复发26例,未见转移或复发39例。HCC影像所表现的肿瘤包膜、大小、门静脉癌栓、合并肝硬化与预后的相关性差异有显著统计学意义(P0.05)。结论 HCC影像表现在一定程度上可反映患者的手术预后情况,为术前指导临床制定个体化治疗或手术方案提供依据。

摘要：目的评价肝动脉化疗栓塞(TACE)预防肝细胞性肝癌(HCC)切除术后复发的疗效。方法计算机检索MED-LINE、EMBASE、CENTREN等数据库,截止日期到2011年1月。收集公开发表的关于HCC切除术后TACE治疗与单纯手术治疗比较的随机对照试验,对纳入的文献进行资料提取和质量评价,采用Revman5.0软件进行统计分析。结果共纳入9个随机对照试验,共740例患者。HCC切除术后使用抗肿瘤抗生素或者铂类联合其他化疗药的TACE治疗,能降低术后1年复发率,相对危险度(RR)及其95%可信区间(CI)为0.52(0.35～0.77)和0.76(0.61～0.93);同时提高术后1年生存率,RR及95%CI分别为0.36(0.13～0.97)和0.44(0.27～0.71)。发热、恶心/呕吐及肝功能异常是术后TACE最多见的不良反应。结论 HCC切除术后行TACE治疗,能降低存在高危复发因素(肿瘤直径大于5cm、多发结节、肿瘤侵犯门脉或肝静脉)HCC患者术后复发率,同时提高短期生存率,且不良反应少。但是由于纳入的文献存在一定的缺陷,对此结论的解释应保持谨慎,尚需更多设计严格、随访时间足够长的大样本随机对照试验来验证。

摘要：背景与目的:CD4+CD25+T细胞又称为调节性T细胞(Treg),是一群具有免疫抑制功能的T细胞亚群。近来的研究表明Treg能够显著地抑制免疫反应,导致肿瘤细胞的免疫耐受。然而,Treg在肝癌临床中的意义目前尚未阐明。本研究旨在探讨Treg水平与肝癌临床病理特征及预后的关系。方法:采用前瞻性研究设计,117例原发性肝癌患者于1999年1月至2000年12月住院且首次行肝癌根治性手术切除,术前用流式细胞仪检测其外周血Treg水平。术后随访至2005年12月30日。分析外周血Treg水平与肝癌临床病理特征及生存率的关系。40例正常对照来自健康献血者。结果:肝癌患者外周血中Treg的水平为(12.54±4.69)%,正常对照组为(8.81±1.98)%,两者比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。全组1、3、5年生存率分别为83.8%、49.6%、35.9%。在单个病灶的患者中,Treg水平与肿瘤的边界有关,肿瘤边界不清楚者Treg水平显著增高;外周血Treg水平与其它临床病理特征无关。外周血Treg水平增高的患者预后差。结论:肝癌患者外周血Treg比例升高是影响预后的独立危险因素。

摘要：目的构建筛选最优Caprin⁃1敲除质粒并探讨超声微泡介导其转染对人肝癌HepG2细胞中cyclinD1、cyclinD2的表达及细胞增殖、周期的影响。方法构建Caprin⁃1敲除质粒KO⁃1、KO⁃2,测序鉴定重组质粒,将目的质粒转染入人肝癌HepG2细胞,超声转染条件利用前期研究成果,免疫印迹法(WB)筛选最优质粒,实时荧光定量PCR(qPCR)检测抑制Caprin⁃1表达后cyclinD1及cyclinD2表达情况,细胞增殖实验(CCK⁃8法)及流式细胞术(FCM)检测抑制Caprin⁃1表达对细胞增殖与周期的影响。结果设计Caprin⁃1敲除质粒Caprin⁃1⁃KO⁃1、Caprin⁃1⁃KO⁃2引物序列,提取质粒经过电泳及测序,鉴定质粒构建成功。转染目的质粒后,KO⁃2组Caprin⁃1表达显著降低,与阴性对照组(NC)、KO⁃1组比较,差异有统计学意义(P<0.05);且抑制Caprin⁃1表达明显抑制HepG2细胞的增殖,阻滞了细胞周期,cyclinD1,cyclinD2表达均明显下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论超声微泡介导Caprin⁃1⁃KO转染人肝癌HepG2细胞,Caprin⁃1⁃KO对人肝癌HepG2细胞增殖有抑制作用并使细胞周期发生阻滞,cyclinD1及cyclinD2表达下降,为进一步研究Caprin⁃1在肝癌发病机理中的作用提供思路。

摘要：目的：研究沉默磷脂酰肌醇蛋白多糖-3（glypican-3，GPC-3）基因转录抑制肝癌HepG2细胞裸鼠移植瘤生长与机制。方法：以人GPC-3基因序列设计并合成miRNA，构建GPC-3-miRNA干扰质粒。将其导入HepG2细胞，通过杀稻瘟菌素筛选出稳定株，移植裸鼠皮下成瘤。根据体积的均数值绘制肿瘤生长曲线，免疫组化法检测瘤组织内GPC-3、β-catenin、p-GSK3β及cyclinD1表达。结果：肝癌HepG2、Hep3B 和 MHCC-97H 细胞 GPC-3表达较强（50%～80%）， SMMC-7721和Bel-7402细胞中等（18%～25%），PLC/PRF/5和Bel-7404细胞较弱（8%～10%）。以特异miRNA干预GPC-3基因转录，明显抑制 HepG2细胞增殖，呈时间依赖性；沉默 GPC-3能明显抑制裸鼠皮下移植瘤生长，且瘤组织β-catenin、p-GSK3β及cyclinD1等关键信号分子表达降低。结论：沉默GPC-3影响Wnt/β-catenin通路关键信号分子表达可能是抑制HepG2增殖的分子机制。

摘要：目的　研究外周血肝癌发生相关甲胎蛋白 (AFP)基因在肝癌早期诊断和鉴别诊断中的价值。方法 :从肝癌组织和肝病患者外周血中制备总RNA ,经随机引物和逆转录酶作用合成cDNA ,再以逆转录巢式聚合酶链反应 (RT -PCR)扩增AFP基因 ,并分析其临床价值。结果　RT -巢式PCR扩增的AFP基因片段为 15 9bp ,与原设计一致 ;在 2 0份肝癌及其癌周和远癌组织中 ,AFP基因阳性率分别为 10 0 %、6 5 %和 0 % ;肝癌患者外周血AFP基因检出率为 5 3.7% ,明显高于肝硬化、急、慢性肝炎和肝外肿瘤组患者 (P <0 .0 1) ;在I、II和III期肝癌中AFP基因阳性率分别为 33.3%、2 6 .3%和 71.8% ;伴肝外转移者全数阳性 ;AFP <5 0ng/ml肝癌AFP基因阳性率为 5 0 % ,且与肝癌大小无关。结论　外周血AFP基因检测是肝癌诊断与鉴别诊断、肝外转移或术后复发的有用标志物。

摘要：肝脏是一些感染性疾病、自身免疫性和恶性疾病的好发部位。肝脏疾病过程中树突状细胞(dendritic cells，DC)往往存在功能异常，目前有关DC与肝病关系的研究报道多来自非肝脏DC。近几年对肝脏DC免疫生物学研究的不断积累使人们能更深入认识肝脏病的发病机制、免疫耐受性并有助于设计新的治疗策略。

摘要：目的:用脂质体法构建polo样激酶-1(polo-like kinase-1,PLK1)基因RNA(siRNA)。方法 :设计合成PLK1siRNA干扰序列,构建干扰载体,然后以该siRNA转染SMMC-7721细胞后,以实时定量Western Blot检测各组细胞PLK1蛋白表达情况。结果:应用靶向PLK1的siRNA转染SMMC-7721细胞48 h后,PLK1蛋白的表达siRNA分别较无关对照组和空白对照组有明显下降。结论:通过脂质体转染法成功构建靶向PLK1的siRNA,实现了细胞的稳定转染,为进一步研究奠定了基础。

摘要：目的:肝癌分子靶向治疗是目前研究的热点,肝癌相关基因mcl-1在肝癌增殖及凋亡中的作用尚不明确,本研究拟探讨mcl-1特异性siRNA对体外培养肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响。方法:设计、合成有效的mcl-1特异性siRNA序列,体外转染HepG2细胞;通过绘制细胞生长曲线和MTT实验检测mcl-1特异性siRNA对HepG2细胞增殖的影响;通过Annexin V/PI双标记流式细胞仪检测mcl-1特异性siRNA对HepG2细胞凋亡率的影响。结果:通过绘制细胞生长曲线发现,mcl-1特异性siRNA能够抑制HepG2细胞的增殖(P<0.05),MTT实验提示转染mcl-1特异性siRNA 24 h、48 h、72 h后,HepG2细胞存活率均显著下降(P<0.05);流式细胞仪检测分析发现,转染mcl-1特异性siRNA后Annexin V+/PI-细胞百分率显著增高(P<0.01),提示mcl-1具有促进HepG2细胞凋亡的作用。结论:Mcl-1蛋白具有促进肝癌细胞增殖,抑制肝癌细胞凋亡的作用,这种分子特性符合肿瘤靶向治疗的要求,Mcl-1可能成为肝癌靶向治疗的潜在靶点。

摘要：目的:构建磷脂酰肌醇蛋白多糖(glypican,GPC)-3 shRNA质粒,观察GPC-3活化干扰对肝癌(HepG2)细胞的抑制作用。方法:设计与合成多条针对GPC-3序列的shRNA,插入pGPU6/GFP/Neo载体,构建、转染HepG2细胞、筛选高效质粒,观察沉默GPC-3表达对肝癌细胞增殖的抑制作用与机制。结果:经BamHⅠ或PstⅠ酶切鉴定,证实插入pGPU6/GFP/Neo载体GPC-3 shRNA序列正确,成功构建GPC-3 shRNA干扰质粒。以脂质体介导,将GPC-3shRNA1～4分别转染HepG2细胞,shRNA1沉默GPC-3 mRNA最高效率达89.3%,可有效抑制HepG2细胞增殖,在72 h达71.1%;shRNA1干扰使HepG2细胞周期阻滞在G1期,促进癌细胞发生凋亡(65.6%)。结论:shRNA可有效干预肝癌细胞GPC-3基因转录,促进凋亡并抑制增殖,GPC-3可望成为肝癌基因治疗的靶目标。