摘要：【背景】肠杆菌科细菌是食源性和临床感染的主要病原菌,对人类和动物健康有重要影响,以API 20E为“金标准”的数值鉴定法是其主要的鉴定方法之一,但现有的数值鉴定方法存在手工单个加样或/和准确率低、价格贵的问题。【目的】研制出半自动化、准确性高及价格低的肠杆菌科细菌数值鉴定生化试剂盒。【方法】在本团队前期建立的肠杆菌科数值鉴定系统理论模型与配套软件的基础上,设计并优化筛选出的24种生化基质微量化配方,在此基础上,研制半自动冻干鉴定条;以现行商品化的数值鉴定条API 20E、MALDI-TOF MS及16S rRNA基因测序为对照,对研制的集半自动生化鉴定条与在线分析软件于一体的生化试剂盒进行效果评价。【结果】共获得458株肠杆菌科细菌的生化谱,在属水平总体鉴定准确率达到98.5%,在种水平总体鉴定准确率达到96.5%;仅需两次加样即可获得鉴定结果,且价格仅为API 20E的4.46%;产品保质期为7 d,生化试验具有稳定可重复性。【结论】本研究研制出的半自动化肠杆菌科细菌数值鉴定生化试剂盒简便经济、准确率高,为肠杆菌科细菌的鉴定提供技术支撑,并为其他科属细菌的数值鉴定生化产品的开发提供技术指引。

摘要：目的监测2008年我国不同地区15所教学医院医院感染患者中分离的肠杆菌科细菌的耐药性。方法按设计方案收集非重复的1 357株医院感染患者中分离的肠杆菌科细菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定15种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),数据输入WHONET5.6软件进行统计分析。结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌敏感率较高的药物有美罗培南(97.6%～100%)、帕尼培南(79.8%～98.4%)、亚胺培南(64.9%～98.1%)、厄他培南(91.3%～97.4%)、哌拉西林-他唑巴坦(87.2%～97.4%)、头孢美唑(82.1%～97.0%)和阿米卡星(89.9%～93.8%)。肠杆菌属细菌敏感率较高的抗菌药物有美罗培南(98.7%)、帕尼培南(96.4%)、亚胺培南(95.4%)和阿米卡星(85.7%)。弗劳地枸橼酸杆菌和黏质沙雷菌敏感率较高的药物有碳青霉烯类抗生素(92.0%～100%)、哌拉西林-他唑巴坦(93.1%～99.1%)、阿米卡星(89.0%～94.3%)和头孢吡肟(86.2%～93.1%)。结论碳青霉烯类抗生素、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星对医院分离的肠杆菌科细菌保持了较高的抗菌活性,头孢美唑对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌表现出良好的抗菌活性。

摘要：针对中等卫校检验专业微生物检验教材中,肠杆菌科课程的难点问题,采用编写歌诀、设计图表、提出问题、归纳总结、联系对比的课堂教学法,激发学生学习兴趣、便于掌握各种细菌的生物学特性。

摘要：肠杆菌科的分类近年中发生了一定的变化,已从1974年的12个菌属增加到23个菌属。我们设计了一套肠杆菌科微量快速生化鉴定系统 E—18,该系统包括常规试验的三糖铁和半固体培养基、微量快速生化反应板(含底物)、编码记录表、微机处理系统软件、编码检索简表。鉴定范围包括肠杆菌科23个菌属中的21个菌属59个分类单元。18项生化试验包括常规试验5项和微量快速生化反应13项。该板为一次性使用。接种后置37℃6～8小时观察结果。为了尽快准确地得到被鉴定菌种的结果,本系统提供与 SHARP PC—1500微机配套使用的微机处理软件。该软件可分别处理动力(+)和动力(-)的菌种,即有两个000000～777777的排列组合,共524288个编码。编码输入微机后,可按序打印出四个优选菌菌名及其鉴定值。

摘要：目前在世界各地广泛采用大肠杆菌、粪大肠菌群和大肠菌群作为食品卫生指标菌,但在欧洲还大量使用肠杆菌科(Enterobacte-riaceae)作为指标菌,以其作为发现产品加工后再度污染的基础,证明加工过程中是否存在一个或多个缺陷,为设计和评价加工方法提供依据。近年来,随着对外贸易的迅猛发展,瑞士、西班牙。

摘要：目的 用常规细菌鉴定方法和API20系统两种方法对我们自行设计的革兰阴性细菌鉴定编码系统（GN－30）进行评价。方法 用三种方法对16株质控菌株（14株全国质控菌株，2株省质控菌株），42株临床菌株进行重新鉴定，分析鉴定结果。结果 GN－30细菌鉴定板与常规鉴定方法符合率为100％，API 20E系统与常规鉴定方法、CN－30系统完全符合者37株，符合率为85．7％，三种方法在统计学上无显著性差异（P＞0．05）。结论 GN－30系统在肠杆菌科细菌鉴定方面使用较为满意，可作为一种适用于各级医院临床常规细菌鉴定的较为可靠的方法。

摘要：本研究旨在建立对肠道主要共生菌的快速定量方法。根据细菌16S rRNA基因的保守序列并参考相关研究,设计针对总肠道菌群的通用引物和探针,以及针对双歧杆菌属、肠球菌属和肠杆菌科的特异性引物和探针,采用引物设计工具(Primer-BLAST)以及聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增以验证引物和探针的特异性。通过分子克隆技术,构建各目标菌属目的基因的重组质粒作为qPCR检测的标准模板,选择标准模板进行重复性实验,并计算组内和组间重复变异系数。用所建立的方法对不同年龄段的临床粪便标本进行3类细菌的检测,并初步分析这些菌群与增龄的关系。结果显示,引物和探针具有较高的特异性;各目的细菌标准曲线在一定范围内线性关系良好,总菌群或各目标菌属的线性范围分别为:总菌群2.9×103~2.9×10^(12)copies/μL、双歧杆菌3.1×10^(2)~3.1×10^(9)copies/μL、肠球菌5.9×10^(2)~5.9×10^(9)copies/μL、肠杆菌6.3×10^(2)~6.3×10^(9)copies/μL,决定系数R2≥0.995;检测的最低拷贝数为总菌群7.5×10^(2)copies/μL、双歧杆菌46 copies/μL、肠球菌37 copies/μL、肠杆菌51 copies/μL;重复性实验变异系数在1.32%以下,具有良好的可重复性。对不同年龄段临床粪便标本检测的结果显示,肠球菌和肠杆菌含量随增龄呈增长趋势,且老年组含量显著高于青年组,但在高龄老年人中未发现肠球菌数量增加。双歧杆菌含量随增龄减少,且各组间差异显著,在高龄老年人中也未观察到双歧杆菌显著减少。结果提示,本研究建立了一种可供临床推广的菌群绝对定量方法,能够同时检测3类细菌和菌群总量,对于菌群定量研究具有实际意义。

摘要：目的监测2005年我国不同地区15家教学医院分离的医院获得革兰阴性病原菌的耐药性。方法按设计方案收集非重复的1927株院内获得革兰阴性病原菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定6类18种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),数据输入 WHONET 5.4软件进行耐药性分析。结果不产超广谱β内酰胺酶(ESBEs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌对被测β内酰胺类药物的敏感性均较高,而对于产 ESBLs 的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌,敏感率大于80%的药物只有美罗培南、亚胺培南和哌拉西林-三唑巴坦。不产 ESBLs 大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物的敏感性很低(34.8%～36.1%),产 ESBLs 大肠埃希菌的敏感性则更低(13.4%～17.1%)。对于易产头孢菌素酶(AmpC)的菌株(包括阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、枸橼酸杆菌属、沙雷菌属、普通变形杆菌),敏感率均大于80%的抗生素有美罗培南、亚胺培南、哌拉西林-三唑巴坦,另外,敏感性较高的抗菌药物还包括头孢吡肟(67.3%～100%)、阿米卡星(67.3%～95.2%)、头孢他啶(52.9%～100%)和头孢哌酮-舒巴坦(51.9%～100%),氟喹诺酮类药物的敏感率为52.5%～86.2%。铜绿假单胞菌对多黏菌素 B 的敏感性最高(95.6%),敏感率在70%～80%之间的药物有美罗培南、亚胺培南、阿米卡星和哌拉西林-三唑巴坦。鲍曼不动杆菌对多黏菌素 B 的敏感率达98.3%,继之为亚胺培南(80.8%)、美罗培南(76.2%)和米诺环素(67.4%),其他药物的敏感率低于60%。对嗜麦芽窄食单胞菌,敏感性较高的抗菌药物有米诺环素(85.0%)、左氧氟沙星(82.5%)和甲氧苄啶-磺胺甲噁唑(77.5%)。对洋葱伯克霍尔德菌,敏感性相对较高的抗菌药物有米诺环素(77.2%)和美罗培南(61.4%)。结论碳青酶烯类、哌拉西林-三唑巴坦、阿米卡星和头孢吡肟对医院分离的肠杆菌科菌保持了较高的抗菌活性,而非发酵革兰阴性杆菌对临床常用药物的敏感性较以往监测有所降低。

摘要：目的研究"每益添活性乳酸菌饮料"对人体免疫系统的作用,探讨其对促进肠道消化和改善轻度便秘的效果。方法试验设计为二中心随机双盲对照试验,研究对象男女比例1∶1。采用自身对照和组间对照设计方法,并结合体征观察、调查问卷,对224例受试者进行"每益添活性乳酸菌饮料"人体试食试验。结果 "每益添活性乳酸菌饮料"可以降低志愿者上呼吸道感染发病率及累计天数,有效改善人体肠道消化系统及排便情况。结论 "每益添活性乳酸菌饮料"具有提高免疫机能、降低上呼吸道感染发病率、减轻症状的效果,并有改善胃肠道消化吸收及通便的功效。

摘要：目的:建立食品中多种细菌同时检测的方法。方法:以肠杆菌科细菌16S RNA、金黄色葡萄球菌FemB基因以及和沙门氏菌的invA基因为目标,设计相应的引物和Taqman探针;分别构建重组质粒作为模板,并建立3种菌属各自荧光定量PCR检测方法和多重荧光PCR体系,考察各方法的灵敏性,并比较多重荧光PCR与单重体系下检测结果的一致性。结果:多重荧光PCR体系与单重体系具有很好的一致性。结论:多重荧光定量PCR能够实现在同一反应体系下同时对食品中多种污染菌进行准确快速的检测。