摘要：过敏是人和养殖动物常见的疾病,而且发生的频率呈现逐渐增加的趋势。为了深入了解过敏反应的机制,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建钙调磷酸酶A beta(calcineurin A beta,CnAβ)基因敲除的大鼠RBL-2H3细胞株,并探讨CnAβ基因对RBL-2H3细胞生长及脱颗粒的影响。选取大鼠CnAβ基因第一外显子为敲除靶点,设计并合成3个单导向RNA(single guide RNA,sgRNA),构建pX459-CnAβ-sgRNA质粒,并用脂质体3000将构建好的质粒转染到RBL-2H3细胞内;利用嘌呤霉素对转染细胞进行筛选,通过DNA测序验证获得CnAβ基因敲除的RBL-2H3细胞株;并检测CnAβ基因缺失对细胞增殖和脱颗粒的影响。结果表明,成功构建了CnAβ单基因敲除的大鼠RBL-2H3细胞株;CnAβ基因缺失对RBL-2H3细胞增殖、细胞的颗粒形成以及颗粒含量无显著影响,但显著抑制由细胞表面受体介导的RBL-2H3细胞脱颗粒作用。该研究结果有助于深入了解动物过敏性疾病的发生机制,为动物过敏性疾病的预防提供了理论基础。

摘要：根据Lipocalin蛋白家族的基因序列设计引物,通过PCR重叠延伸得到含随机突变蛋白的基因序列,重组到噬菌粒载体构建随机突变Lipocalin文库。以NSF60细胞对Lipocalin文库进行差减筛选,再用肥大细胞进行亲和筛选,得到结合肥大细胞的Lipocalin次级文库。以FcεRI-α受体蛋白为靶分子对Lipocalin次级文库进行富集筛选,洗脱特异性结合的噬菌体。经过3轮筛选,从第3轮的洗脱克隆中随机挑取8个重组噬菌体克隆。ELISA法检测出3个Anticalins分子能与肥大细胞FcεRI-α受体特异性结合。这为研发肥大细胞FcεRI-α受体阻断药物提供了生物类候选分子,也为Ig E相关的变态反应疾病的生物类小分子药物研发奠定了基础。

摘要：背景:临床上儿童干骺端、骺板周围骨折比较常见,跨骺板钢板内固定对稳定骨折有较为重要的作用。但内固定一定周期后取出内固定物,继续观察一定时间骺板的发育恢复情况鲜有报道。目的:设计骺板周围骨折动物模型,分析跨骺板置入锁定钢板一定周期取出钢板,继续观察一段时间后骺板的生长抑制情况。方法:建立32只幼兔右股骨远端骺板上方5 mm骨折模型,随机分4组,每组8只。应用相同型号钢板和螺钉,跨骺板周围骨折线行钢板置入内固定。术后2,4,8,12周取出内固定物,继续观察2周处死幼兔。取出股骨标本,测量股骨长度;作病理切片,测量骺板厚度及肥大细胞计数;观察形态学中肥大细胞及骺板厚度变化情况。将骨折模型作为实验组,以左股骨远端骺板作为对照。结果与结论:①实验组在内固定2周后,取出钢板继续观察2周,股骨长度、骺板厚度、肥大细胞计数等与对照组对比,差异无显著性意义;②实验组内固定4,8,12周,取出钢板继续观察2周,与对照组相比,实验组股骨长度、骺板厚度、肥大细胞计数等指标未能完全恢复至正常,差异有显著性意义(P<0.05);③结果表明,在内固定物不伤及骺板的前提下,跨骺板钢板内固定初期(≤2周)取出钢板继续观察2周,适当压力作用对骺板生长发育未产生显著影响;④但持续过久压力限制时(≥4周),内固定对骺板压力限制时间过长,虽然也及时取出内固定,但肢体长度、骺板厚度、肥大细胞计数等指标均未能完全恢复正常,可导致骺板生长部分或者完全阻滞,引起肢体畸形及骺板发育停滞。

摘要：本维莫德,又称苯烯莫德,英文名称为benvitimod,由冠昊生物科技股份有限公司研制,其乳膏剂为我国拥有完整自主知识产权的国家Ⅰ类新药,主要用于治疗炎症反应及自身免疫反应,还可以抑制与过敏反应相关的肥大细胞和嗜碱性细胞的脱粒作用,同时对银屑病也有较好的治疗效果^([1-5])。