摘要：为验证金属蛋白酶在修护肺损伤方面的作用,文章特设计如下实验:实验共设置四组,每组9只60日龄雄性小鼠,分别标记为:空白对照组、LPS阳性对照组、MMP给药组(按0.2 mg/20 g体重给药)、地塞米松磷酸钠给药组(按0.8 mg/kg体重给药)。每组再分成两个亚组进行不同指标检测,一组用于检测细胞因子和细胞计数,另一组做病理切片。实验证明MMP对LPS所致的肺部炎症浸润有一定的保护作用;减轻了肺组织的病理反应和炎症损伤。因此,可以认为MMP能够明显减轻由LPS所致的急性肺损伤。

摘要：一氧化碳(carbon monoxide, CO)是机体内一种重要的化学气体信使分子,具有明确的抗炎活性,但作为一种气态的活性物质,如何安全、有效地递送至病灶发挥疗效有待研究。基于一氧化碳与红细胞(red blood cell,RBC)主要成分血红蛋白的天然亲和性,本文拟构建一种一氧化碳-红细胞(CO-RBC)复合体系,以脓毒症肺损伤为模型,一氧化碳释放分子(carbon monoxide releasing molecule-2, CORM-2)为对照,研究其对模型小鼠肺损伤的治疗作用。以CO-RBC中CO的释放、稳定性、安全性及体内肺靶向性对CO-RBC复合体系进行表征;以细胞间黏附分子(ICAM-1)、肺表面活性蛋白-A (SP-A)的表达评价动物模型;以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6 (IL-6)炎症因子的分泌、小鼠存活时间及肺组织病理变化评价CO-RBC复合体系对脓毒症肺损伤的治疗作用。实验设计获得西南大学实验动物伦理审查委员会批准,符合动物实验福利伦理准则。结果表明:CO-RBC复合体系在氮气保护下储存,稳定性强, 48 h内基本无释放,而在近生理条件下时, 12 h内释放约70%,解决了CORM-2中CO突释的问题,同时对小鼠无毒性;体内荧光成像显示CO-RBC复合体系能在肺部有效聚集,具有一定的肺靶向作用;给药治疗后, CO-RBC组相较于其他组, TNF-α和IL-6的分泌明显降低,肺间质水肿程度减轻,白细胞浸润减少,存活率显著提高。因此,本研究制备的CO-RBC复合体系相比CORM-2对脓毒症小鼠肺部炎症反应有显著的抑制作用,有望为脓毒症的治疗提供新思路。

摘要：目的探讨沉默非肌肉肌球蛋白ⅡA（NMⅡA）的骨髓间充质干细胞（BMSC）对烟雾吸入性损伤大鼠早期肺损伤的影响。方法将40只SD大鼠按照完全随机法分为对照组10只、单纯损伤组10只、BMSC组10只和NMⅡA－BMSC组10只。对照组大鼠正常吸入空气，其余3组大鼠吸入烟雾制备烟雾吸入性损伤模型。伤后30 min，单纯损伤组大鼠尾静脉注射1 mL生理盐水，BMSC组大鼠注射1 mL 1×107个/mL的第5代BMSC，NMⅡA－BMSC组大鼠注射1 mL 1×107个/mL沉默NMⅡA的BMSC。伤后24 h，取各组大鼠腹主动脉血和右肺，血气分析仪检测PaO2、PaCO2和pH值，干湿质量法测定肺湿干质量比，HE染色观察肺病理变化；收集肺泡灌洗液（BALF），ELISA法检测TNF－α、IL－10含量。对数据行单因素方差分析、Kruskal－Wallis H检验、LSD检验。结果（1）伤后24 h，与对照组比较，单纯损伤组、BMSC组、NMⅡA－BMSC组大鼠PaO2明显降低（P值均小于0.05），PaCO2明显升高（P值均小于0.05）。与单纯损伤组比较，BMSC组、NMⅡA－BMSC组大鼠PaO2明显升高（P值均小于0.05），PaCO2明显降低（P值均小于0.05）。与BMSC组比较，NMⅡA－BMSC组大鼠PaO2明显升高（P〈0.05）。单纯损伤组大鼠动脉血pH值较对照组明显降低（P〈0.05）。（2）伤后24 h，对照组、单纯损伤组、BMSC组和NMⅡA－BMSC组大鼠肺湿干质量比分别为4.36±0.15、7.79±0.42、5.77±0.18、5.11±0.20。与对照组比较，其余3组大鼠肺湿干质量比明显升高（P值均小于0.05）。与单纯损伤组比较，BMSC组、NMⅡA－BMSC组大鼠肺湿干质量比明显降低（P值均小于0.05）。与BMSC组比较，NMⅡA－BMSC组大鼠肺湿干质量比明显降低（P〈0.05）。（3）伤后24 h，对照组大鼠肺泡结构完整，无异常。与单纯损伤组比较，BMSC组及NMⅡA－BMSC组大鼠肺损伤明显减轻，肺泡结构相对完整，肺泡壁未增厚，炎性细胞浸润明显减轻。（4）伤后24 h，与对照组比较，单纯损伤组、BMSC组大鼠BALF中TNF－α含量明显升高（P值均小于0.05）。与单纯损伤组比较，BMSC组和NMⅡA－BMSC组大鼠BALF中TNF－α含量明显降低（P值均小于0.05）。与对照组比较，单纯损伤组、BMSC组、NMⅡA－BMSC组大鼠BALF中IL－10含量明显升高（P值均小于0.05）。与单纯损伤组比较，BMSC组和NMⅡA－BMSC组大鼠BALF中IL－10含量明显升高（P值均小于0.05）。与BMSC组比较，NMⅡA－BMSC组大鼠BALF中IL－10含量明显升高（P〈0.05）。结论沉默NMⅡA的BMSC能够减轻烟雾吸入性损伤大鼠早期肺损伤，比单纯使用BMSC更为有效。

摘要：用大肠杆菌内毒素成功地复制了家兔急性肺损伤动物模型,通过观察模型动物的肺组织病理与血生化指标等改变,探讨内毒素的发病机理及前列腺素E(PGE)的早期治疗作用。实验方法:大耳白兔30只,按随机区组设计分为三个组。A组为对照组;B组:内毒素发病组;C组:

摘要：目的观察气管滴注硫酸镍对大鼠的急性毒性作用及其机制。方法将28只体重为280～310g的雄性Wistar大鼠随机分为对照组、硫酸镍低、中、高剂量组,根据镍在细颗粒物中的含量,设计镍的染毒剂量分别为7.5、75和750μg/kg。采用一次性气管滴注染毒,24h后处死动物,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数,总蛋白(TP)、乳酸脱氢酶(LDH)和炎性因子(IL-6、TNF-α)的测定;收集血液测定血清中炎性因子(IL-6、TNF-α)、C-反应蛋白(CRP)和镍的水平。结果不同剂量硫酸镍均可引起大鼠BALF中白细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞显著升高(P<0.01),较高剂量Ni(75和750μg/kg)可引起BALF中TP水平、LDH活力和炎性因子IL-6、TNF-α水平显著增高(P<0.05或P<0.01);硫酸镍染毒24h后,大鼠血清TNF-α水平明显增高,与对照组相比差异有显著性(P<0.05);血清CRP水平随硫酸镍剂量升高而增高,但仅高剂量组差异有显著性(P<0.05)。此外,随着硫酸镍染毒剂量的增加,血清中镍水平也呈现明显的上升趋势。结论硫酸镍气管滴注可引起Wistar大鼠急性肺损伤和全身炎症反应,与含相同剂量镍的PM2.5相比,硫酸镍的作用较弱,提示镍在PM2.5的毒性作用中可能发挥重要作用,但PM2.5中其他成分的作用也不容忽视。

摘要：【摘要】目的探讨百草枯（paraquat，PQ）中毒的小鼠肺组织中血红素加氧酶1（heineoxygenase1，HO-1）、醌氧化还原酶1（NAD（P）H：quinineoxidoreductase1，NQ01）和核因子E2相关因子2转录因子（nuclearfactorerythroid2-relatedfactor2，Nrf2）的变化及生长激素释放肽（ghrelin）对PQ中毒小鼠急性肺损伤的保护效应。方法50只清洁级ICR小鼠按随机数字表法分为正常对照组（10只）、PQ染毒组（10只）、16．58、33．15、49．73μg／kg生长激素释放肽干预组（30只），PQ（20mg／kg）染毒方式及生长激素释放肽干预均通过腹腔内注射实现；取各组小鼠肺组织，HE染色，光学显微镜下观察小鼠肺组织病理学变化，蛋白免疫印迹法westernblot）检测核内Nrf2蛋白水平的改变，双抗夹心酶联免疫吸附法（ELISA）法测定肺组织HO．1、NQ01活力变化，化学比色法检测丙二醛（malondiadehyde，MDA）蛋白含量、髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活力。另将40只小鼠分为PQ染毒组（10只）、16．58、33．15、49．73μg／kg干预组（各10只），处理同上，记录72h内各小鼠死亡时间和临床表现。结果与正常对照组比较，PQ染毒组核内Nrf2蛋白增加，HO-1、NQ01及MPO活力明显升高，MDA含量升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。与P0染毒组比较，干预组核内Nrf2蛋白明显增高，HO-1、NQ01活力明显升高，MDA含量和MPO活力降低，差异均有统计学意义（P〈0．01）。PQ组在染毒后肺组织损害明显，干预组肺损害较之有所减轻。干预组小鼠死亡率明显低于PQ染毒组，其中高剂量干预组与PQ染毒组的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论生长激素释放肽能上调PQ染毒小鼠核内Nrf2的蛋白表达，增加140-1、NQ01活力，降低MPO活力，减少MDA含量，对PQ中毒小鼠急性肺损伤有保护作用。

摘要：背景：肺脏含有多种内源性干细胞，分别为来源于内胚层或中胚层的前体细胞，阐明肺组织间充质干细胞的特性有助于了解其在肺损伤中的生物学作用。目的：观察体外分离培养的小鼠肺组织间充质干细胞生长状态、表面标志、分化功能等生物学特性，探讨其对肺损伤鼠的干预效果。设计、时间及地点：细胞学体外观察与随机对照动物体内实验，于2005-10／2007-08在解放军军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学实验室完成。材料：清洁级三四周龄C57BL/6雄鼠，用于分离培养肺组织间充质干细胞：清洁级6-8周龄C57BL/6雌鼠20只，分为细胞移植组、模型对照组，10只／组。方法：分离雄鼠肺组织，II型胶原酶消化后，Ficoll法离心，收集界面层细胞，贴壁法分离培养肺组织间充质干细胞，当细胞接近70％～80％汇合时消化传代。细胞移植组、模型对照组小鼠按20mg／kg腔注射马利兰抑制骨髓干细胞的迁移后，均建立博莱霉素诱导的肺纤维化模型，造模后细胞移植组尾静脉注入5×10^5个肺间充质干细胞，模型对照组气管内注射100μL PBS。14d后取材，制备肺组织石蜡切片。主要观察指标：体外培养的肺组织间充质干细胞的生长状态、免疫表型、基因表达、分化潜能、集落形成能力以及静脉移植减轻肺损伤效果。结果：小鼠肺组织来源的间充质干细胞为成纤维样细胞，在体外能够长期培养和快速扩增：其细胞免疫表型为Sca-1^＋，CD44^＋，CD29^＋，CD105^＋，CD54^＋，CD34^-，CD45^-，CD11b^-，c-kit^-，CD31^-；不表达肺泡上皮细胞标志表面活性蛋白C、水通道蛋白5、clara细胞分泌蛋白，胚胎干细胞标志Oct-4和Nanog基因在培养扩增的细胞中持续表达；能够破诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞和表达表面活性蛋白C的肺泡2型上皮样细胞：集落形成率约3％；经静脉输注后，细胞移植组肺损伤和纤维化程度较模型对照组减轻，Masson染色显示只有少量血管周围呈阳性，且经骨髓抑制处理后已接近正常肺组织。结论：体外培养的小鼠肺间充质干细胞能够快速扩增，可向脂肪细胞、成骨细胞和肺泡上皮细胞方向分化：静脉移植后有助于肺组织修复、减轻肺损伤和纤维化程度，且骨髓抑制不影响肺间充质干细胞的保护作用。

摘要：为探讨2种组胺受体拮抗剂在内毒素诱导肺损伤中的作用机理,作者设计了本试验。将120羽20日龄雏鸡随机分为5组,每组24羽。内毒素诱导肺损伤模型组每天早晚注射生理盐水0.5 mL.只-1,中午腹腔注射内毒素100μ***-1;扑尔敏组每天早晚肌注扑尔敏0.5 mL.只-1,中午腹腔注射内毒素100μ***-1;西咪替丁组每天早晚肌注西咪替丁0.5 mL.只-1,中午腹腔注射内毒素100μ***-1;扑西联合组每天早晚肌注西咪替丁、扑尔敏各0.3 mL.只-1,中午腹腔注射内毒素100μ***-1;空白组每天早中晚注射同等剂量生理盐水,连续15d。在第5、10、15天,各组随机抽7个样本,颈动脉放血处死,称取肺质量,采集肺脏以荧光法测组胺含量,制备病理切片观察病理变化并评分。结果发现:(1)第5天,扑西联合组肺组织中组胺含量显著低于扑尔敏组和西咪替丁组(P<0.05)。在第10天时,模型组肺组织中组胺含量显著高于扑西联合组和空白组(P<0.05);在第15天时,模型组肺组织中组胺含量显著(P<0.05)高于扑尔敏组和空白组,极显著(P<0.01)高于扑西联合组;(2)第10天时,扑尔敏组和空白组肺指数显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)低于模型组,第15天时,扑尔敏组、扑西联合组和空白组肺指数显著(P<0.05)低于模型组;(3)第5、10、15天时,模型组肺病理评分分值与其余各试验组差异极显著(P<0.01),在第5天时,扑西联合组极显著低于扑尔敏组和西咪替丁组(P<0.01),在第10、15天时,扑西联合组显著低于(P<0.05)扑尔敏组,极显著低于其它各组(P<0.01)。结果表明,组胺通过H1、H2受体参与介导内毒素诱导雏鸡肺的损伤,但H1受体起主导作用。

摘要：目的：探讨右美托咪定（dexmedetomidine，DEX）能否通过 CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）凋亡通路减轻小鼠缺血再灌注（I／R）性肺损伤。方法：选取雄性8～10周龄C57BL／6J小鼠40只，体重18～22 g，复制在体左肺I／R损伤模型。随机分为4组：假手术组（ sham组），I／R模型组（ I／R组），生理盐水对照组（ I／R＋NS组），右美托咪定干预组（ I／R＋DEX组）。 DEX组在小鼠左肺缺血前30 min腹腔注射DEX 25μg／kg，I／R＋NS组给予与DEX 等体积的生理盐水。实验毕，留取左肺组织。测定肺组织干湿比（ W／D ）及总肺含水量（TLW），行肺组织损伤评估（IQA），光、电镜观察肺组织形态学及超微结构改变。原位末端标记（TUNEL）法检测组织细胞凋亡指数（AI）。 Western blot 和逆转录PCR（RT－PCR）分别检测CHOP、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）蛋白和mRNA表达量。结果：与sham组比，I／R组和I／R＋NS组肺W／D、TLW、IQA、AI明显升高（P＜0．01），肺组织形态破坏显著，CHOP、GRP78蛋白和mRNA表达量增加（ P＜0．01）；I／R组与I／R＋NS组相比，上述指标无显著差异。与I／R组比，I／R＋DEX组肺组织W／D、TLW、IQA及AI明显下降（ P＜0．05），组织损伤明显减轻， CHOP蛋白和mRNA表达量下降（ P＜0．01）。结论：DEX可有效减轻小鼠缺血／再灌注性肺损伤，其机制可能与其抑制CHOP通路所致凋亡有关。

摘要：背景:高温环境对生物体造成明显损伤,深入研究热环境损伤的机制、提高机体耐热损伤的能力,可为抗热环境药物研究提供参考。目的:观察预先使用米帕林,对热环境中大鼠损伤的作用,探讨急性热环境致机体脑、肺损伤作用和可能的保护措施。设计:完全随机设计,对照实验研究。地点和材料:地点为军事医学科学院研究所。材料为二级Wistar大鼠,雄性,体质量160～200g,由军事医学科学院实验动物中心提供,饲喂专用,饮用自来水。方法:将大鼠随机分组,根据体质量灌胃给予不同剂量的米帕林,对照组给予相当体积的生理盐水,1h后进入41℃热环境。主要观察指标:检测大鼠体温变化和死亡时间,分析药物剂量与体温变化、存活时间的关系。对死亡大鼠进行主要脏器的病理分析,寻找热环境对机体损伤的主要靶器官。结果:41℃热环境明显影响大鼠的代谢和存活,进入热环境的大鼠体温经过短暂维持后迅速上升,大约在38min后死亡,死亡大鼠解剖发现肺明显出血和脑水肿,病理切片观察发现肺细胞和大脑神经元死亡明显;预先灌胃给予4.5～18.0mg/kg米帕林能够明显减缓大鼠在热环境下体温升高的速率,增加大鼠在热环境中的存活时间。9.0mg/kg剂量组体温上升速率减缓20%左右,存活时间延长超过50%。9.0mg/kg剂量组大鼠在进入热环境38min左右处死后。