摘要：在生物医学和临床医学领域,许多疾病的诊断和治疗依赖于细胞形态的识别。不同细胞具有不同的形态,这些形态的不同将导致生物组织中光传播特征的变化,更重要的是这将影响细胞的光散射特性。目前,动态光散射理论是动态识别细胞尺寸和形状的最佳方式。细胞主要由细胞质、细胞核和线粒体组成,因此,分析它们的光散射特性对于光学诊断和治疗具有非常重要的意义。设计实验获取了癌细胞和聚苯乙烯球的光散射特性,并利用时域有限差分法建立细胞质模型进行细胞光散射特性仿真。从肺癌细胞的光散射结果可以看出,线粒体对前向散射(0°~20°)和后向散射(160°~180°)贡献最大,细胞核对侧向散射(80°~100°)贡献最大,细胞质对各个角度贡献均等。仿真结果和实验结果基本一致。

摘要：背景:冷冻免疫是近年来倍受关注的课题,但冷冻对细胞免疫功能的影响一直缺乏深入的研究,特别是在细胞凋亡和树突状细胞方面。目的:观察体外培养的肺癌NCI-H446细胞经氩氦刀冻融处理后细胞形态和细胞表面免疫表型的变化,及其能否有效激发骨髓树突状细胞产生特异性抗瘤效应。设计、时间及地点:细胞免疫水平的对照实验,于2002-08/2003-04在解放军海军总医院血液实验室及解放军军事医学科学院细胞与基因治疗中心完成。材料:小细胞肺癌细胞系NCI-H446细胞购自上海科学院细胞库。方法:取体外培养的肺癌NCI-H446细胞经氩氦刀处理后,在体外树突状细胞培养过程中,加入冻融的肺癌细胞,分别观察肺癌细胞的形态结构、混合淋巴细胞反应及细胞毒T淋巴细胞杀癌细胞效应。主要观察指标:培养树突状细胞的细胞形态和细胞表面免疫表型变化,培养细胞的混合淋巴细胞反应结果,培养细胞的凋亡情况。结果:骨髓树突状细胞体外培养后,符合树突状细胞特征。在培养过程中加入冻融的肺癌细胞,不影响树突状细胞细胞表面抗原的表达,混合淋巴细胞反应增强,细胞毒T淋巴细胞可引起肺癌细胞凋亡。结论:经氩氦刀处理的肺癌细胞溶解,胞膜不完整,体外能有效激发骨髓树突状细胞产生特异性抗瘤效应。

摘要：目的构建Skp2基因的RNAi真核表达质粒,观察其对SPC-A-1肺癌细胞内Skp2基因表达及细胞生长的影响。方法根据GenBank中Skp2cDNA序列设计针对Skp2基因的shRNA序列,合成序列并克隆入pGenSil-1质粒中,构建Skp2 pshRNA重组质粒。脂质体介导重组质粒转染SPC-A-1肺癌细胞。RT-PCR检测肺癌细胞Skp2 mRNA的表达,Western blot检测Skp2蛋白表达。MTT检测各组细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞周期改变。结果重组质粒经酶切鉴定和测序,证实表达干扰质粒构建成功。转染重组质粒的肺癌细胞Skp2 mRNA和蛋白的表达明显下降(P<0.05),细胞生长增殖受到抑制,阻滞在G0/G1期的细胞比例增加,而进入S期的细胞比例明显下降(P<0.05)。结论构建的Skp2 shRNA表达质粒能有效下调Skp2基因的mRNA及蛋白的表达、抑制细胞的生长增殖。

摘要：树突状细胞(DC)被确定为最有效的抗原递呈细胞(APC),操纵和刺激免疫系统的关键组成部分。DC通过促进肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CLT)和辅助性T细胞(Th细胞)的产生和增殖,在诱导保护性和治疗性抗肿瘤免疫中发挥着关键作用[1]。研究者已经报道过许多肿瘤抗原(Ag)负载DC诱导高效抗肿瘤免疫反应,在小鼠肿瘤模型和肿瘤患者试验中均有[2]。最佳治疗参数包括DC来源、DC成熟、抗原选择(Ags)、Ag载体方法、注射部位、剂量和适当的抗肿瘤免疫监测,这些方法的疗效需进一步提高。治疗参数包括DC来源、DC成熟、抗原选择(Ags)、Ag载体方法、注射部位、剂量和适当的抗肿瘤免疫监测,这些方法的疗效需进一步提高,因此以其为基础设计的肿瘤疫苗日益受到重视[3,4]。然而,目前树突状细胞/肿瘤细胞杂交疫苗在肺癌中的功能及其免疫机制少见报道,因此本项研究探索其特异性抗肺癌免疫作用,可以为恶性肿瘤的治疗和判断预后提供新的参考依据。

摘要：基于微机电系统(MEMS)微纳加工工艺和聚二甲基硅氧烷(PDMS)软刻蚀技术设计制作了一种包含细胞培养腔体与化学改性气体富集区域的多层微流控肺泡芯片,来进行片上三维细胞培养和细胞代谢的羰基气体捕获,并利用质谱技术对捕获羰基气体进行分析。实验结果表明:该芯片实现了肺癌细胞的片上培养,以及痕量代谢气体捕获。芯片结构简单,样品消耗小,为细胞气体代谢分子体外分析提供了一种有效的手段。

摘要：目的探讨A549细胞株NS基因的表达干扰后,A549细胞株的mRNA表达水平及细胞增殖变化。方法构建NS shRNA真核表达载体,转染A549细胞,G418筛选稳定表达细胞克隆,RT-PCR检测NS基因沉默,MTT检测细胞增殖情况。结果构建的NS shRNA真核表达载体经菌落PCR和测序证实重组表达载体中插入序列与设计一致。RT-PCR检测显示构建的shRNA表达载体转染A549细胞后可显著降低NS mRNA的表达;MTT结果显示干扰后细胞增殖速率明显减低。结论成功构建了一组针对NS基因的shRNA真核表达载体,转染A549细胞后NS基因表达被特异性沉默,且细胞增殖受到明显抑制,通过RNAi技术实现NS基因沉默可能是一种较有前景的肿瘤治疗方法。