摘要：目的研究反义肽核酸（PNA）下调树突状细胞（DC）趋化因子受体CCR7基因表达在大鼠肝移植急性排斥反应中的作用。方法体外培养大鼠骨髓来源的DC，设计靶向CCR7mRNA翻译起始区的反义PNA组，以随机PNA组和空白组为对照。免疫细胞化学染色法检测反义PNA对CCR7蛋白表达的影响；趋化试验检测DC的趋化活性。建立大鼠肝移植排斥反应模型，在供肝冷保存和肝移植术后应用反义PNA，以随机PNA组和空白组为对照，观察术后受者存活时间。于术后第7、10天取移植物标本观察肝脏病理学改变；免疫组织化学染色法检测淋巴结DC数量变化以及T淋巴细胞的活化增殖情况。结果反义PNA显著下调体外培养的DC表达CCR7蛋白，DC体外趋化活性受到明显抑制，与随机PNA组和空白组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。肝移植术后，反义PNA组与随机PNA组和空白组相比，受者腹腔淋巴结中DC数量明显减少，T淋巴细胞活化增殖受到显著抑制，受者术后存活时间明显延长（P〈0．05）。结论通过反义PNA下调CCR7基因表达，阻断DC迁移和抗原提呈，能有效抑制急性排斥反应，延长受者存活时间。

摘要：目的构建粘蛋白1（MUCl）基因的反义肽核酸（PNA），观察对胃癌细胞MKN一45侵袭能力的影响，并探讨其机制。方法根据MUC1基因的序列设计反义PNA序列，经脂质体介导转染胃癌细胞MKN45，并设空载体组（随机对照）和空白对照组（阴性对照）运用荧光定量PCR检测MUC1的表达，并观察E-粘附素的表达变化；TransWell小室实验观察对胃癌细胞侵袭力的影响。结果构建的3个MUCl基因的反义PNA均能有效抑制该基因表达，其表达水平分别为0．62±0．18，0．49±0．12和0．60土0．21，显著低于阴性对照组（1．18±0．03，P〈0．01）。阴性对照组与随机对照组之间差异无统计学意义（1．00±0．04，P=0．657）。取抑制效率最高的PNA进行后续研究转染MUClPNA后的胃癌细胞侵袭能力显著下降（t=2．09，P=0．005），并伴有E-粘附素基因及蛋白的表达上调。结论胃癌细胞MKN-45中MUCl基因与E_粘附素的表达存在负相关，抑制MUCI基因的表达能显著抑制肿瘤细胞的侵袭能力。

摘要：目的探讨反义肽核酸（asPNA）对大鼠甲状腺细胞的细胞膜表面促甲状腺激素受体（TSHR）表达的影响。方法设计两种与TSHRmRNA不同片段互补的asPNA，分别为核定位信号-asPNA1（NLS—asPNA1）和***2，另外合成一段非相关的干扰肽核酸（NLS—scrPNA）序列，用荧光显微镜观察NLS—asPNA能否进入细胞，采用噻唑蓝法检测asPNA对细胞是否具有毒性作用，然后用实时定量RT—PCR检测NLS—asPNA对TSHRmRNA表达的影响。结果荧光显微镜观察发现，asPNA可以进入到细胞中去。噻唑蓝法检测发现asPNA对细胞没有毒性作用。实时定量RT—PCR结果显示，NLS—asPNA1和NLS—asPNA2可以抑制TSHRmRNA表达，表现为随着NLS—asPNA与细胞培养时间的延长，TSHRcDNA的拷贝数逐渐下降，且呈现时间依赖性，而***对TSHRtuRNA的表达没有明显的影响。结论NLS—asPNA可以进入到细胞中去，并且能够下调TSHRmRNA的表达。