摘要：近年来,噬菌体肽库的构建及筛选技术得到迅速发展和推广,现已广泛应用于基因定位、分子识别、疫苗设计等相关领域,尤其在非常规疫苗设计方面具有巨大的潜力。该疫苗设计策略是在分子免疫学抗原呈递的机制研究基础上提出的,具有安全、分子小、周期短、特异性高、易于大规模制备等特点,可以代替传统疫苗。本文就噬菌体展示技术用于肽疫苗设计的原理及前景作一综述。

摘要：目的:利用穿膜肽人免疫缺陷病毒(HIV)-Tat49-57的穿膜能力,设计穿膜肽人乳头瘤病毒(HPV)16E7限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位(第49～57位氨基酸)的融合肽疫苗,并在体外研究其诱导特异性CTL的应答能力。方法:应用多肽固相合成技术,分别合成含HIVTat49-57和人类白细胞抗原(HLA)-A2.1限制性CTL优势表位HPV16E749-57的18肽,和该CTL表位的9肽,并用一无关肽作对照,在体外用乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性试验分别检测了上述18肽和9肽在HLA-A2阳性健康者外周血单个核细胞(PBMC)中诱导的表位E749-57的特异性CTL活性。结果:经质谱分析,上述多肽成功合成,纯度均在95%以上。与9肽相比,18肽能在体外诱导出明显增强的特异性CTL活性(P<0.05)。结论:在HPV16E7HLA-A2.1限制性CTL表位(49～57)的N-末端加上HIV-Tat49-57序列,不会影响表位的提呈效率,而且在体外能有效激发针对E749-57特异性的CTL应答,为新型抗肿瘤及细胞内感染的多肽疫苗设计提供了新思路。

摘要：目的　设计新型抗肿瘤治疗性疫苗。方法　以多聚赖氨酸为桥梁 ,将抗原肽与其编码基因并置于同一疫苗颗粒 ,进而设计出颗粒性肽 DNA复合疫苗。结果　该疫苗可激发体内肿瘤特异性CTL反应 ,并对P815肿瘤具有特异性杀伤活性。结论　该颗粒性肽

摘要：诱导有效的抗肿瘤免疫应答是肿瘤免疫治疗的主要目标 ,由于肽疫苗和DNA疫苗具备较高的安全性和实用性 ,因而成为肿瘤疫苗学领域中发展最为迅速的肿瘤免疫治疗方案之一。但是这两种疫苗形式仍然具有各自的缺点 ,其抗原呈递动力学存在显著差异 ,提示这两种疫苗可能存在互补性。本研究对多肽疫苗和DNA疫苗进行综合 ,设计出新型肽 DNA复合疫苗 ,并以P815A为模式抗原 。

摘要：中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)是沙特阿拉伯、韩国等发展中国家肺、肾感染的主要原因。这种感染性的单股正链RNA病毒通过与二肽基肽受体结合而进入宿主。由于目前还没有针对MERS-CoV的疫苗,因此必须采取快速的病例鉴定、隔离和感染预防策略来阻止MERS-CoV感染的传播。

摘要：目的对人乳头瘤病毒(HPV)16型E7抗原的人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞表位HPV16E749-57进行氨基酸置换修饰,并鉴定修饰表位。方法运用量化模体方案对置换后的多肽与人白细胞抗原A2分子的结合系数进行比较,以分子模拟方法确定合成序列,采用标准Fmoc方案进行合成与纯化多肽以及乳酸脱氢酶释放法检测特异性细胞毒性T细胞诱导活性。结果修饰多肽符合人白细胞抗原A2分子限制性细胞毒性T细胞的表位要求,9肽RLHYNIVTF具有特异性细胞毒性T细胞诱导活性。结论修饰表位(氨基酸序列RLHYNIVTF)具有更好的结合力和较强的抗原性,可以代替原有序列E749-57(氨基酸序列RAHYNIVTF)作为人乳头瘤病毒感染治疗性肽疫苗分子设计的候选表位。

摘要：目的 :开发可供两性使用的多价合成嵌合肽疫苗。方法 :选择小鼠精子 /睾丸特异性抗原 SP1 7、Cyritestin中特异性氨基酸序列与牛核糖核酸酶非限制性 T细胞表位作为骨架 ,按一定连接方式设计、合成新抗原 3 5肽 ,并与等量弗氏佐剂混悬后免疫雌性 BALB/c小鼠。结果 :在 43 0 A固相自动肽合成仪上成功地合成了 3 5肽 ,并经 HPLC纯化、质谱鉴定证实其纯度达 95 %以上 ;新抗原免疫小鼠后获得的特异性抗血清可识别小鼠、大鼠及人睾丸组织蛋白提取物中相应分子量的蛋白质 ,且血清中特异性 Ig G抗体滴度最高达 1∶ 6 0 0 0 ,阴道粘膜冲洗液中特异性 Ig A抗体滴度最高达 1∶ 3 0 0。结论 :由含有两种特异性精子抗原、具有特异性氨基酸序列的新抗原所制备的抗血清可识别两种天然抗原 ,并在小鼠体内激发出较理想的特异性体液免疫 。

摘要：目的　开发可供两性使用的多价合成嵌合肽疫苗。方法　选择小鼠精子 /睾丸特异性抗原SP1 7、Cyritestin中特异性氨基酸序列与牛核糖核酸酶非限制性T细胞表位作为骨架 ,按一定连接方式设计、合成新抗原 35肽 ,并与弗氏佐剂混悬后免疫雌性BALB/C小鼠。结果　在 430A固相自动肽合成仪上成功地合成 35肽 ,并经HPLC纯化、质谱鉴定证实其纯度达 95 %以上 ;免疫后小鼠血清特异性IgG抗体滴度最高达 1∶6 0 0 0 ,阴道粘膜冲洗液中特异性IgA抗体滴度最高达 1∶30 0 ;小鼠脾脏淋巴细胞增殖率达 50 %左右 ,淋巴细胞分泌的INF γ和IL 4分别为 60、1 0 8μg/ml;实验组BALB/C雌鼠妊娠率平均降至 60 % ,每胎产仔数平均降低 58%～71 %。结论　含有两种特异性精子抗原中特异性氨基酸序列的新抗原可激发小鼠产生较理想的特异性体液免疫和粘膜免疫 ,并使小鼠受孕率下降 。

摘要：目的尝试利用质谱技术对肝癌细胞表面自然呈递的MAGE3表位进行检测和分析。方法肝癌细胞和肝细胞取自同1名男性肝癌患者,弱酸洗涤法分离肝癌细胞和癌旁无瘤肝细胞表面所有肽段;利用表位预测法挑选出HLAA2限制的MAGE3理论侯选肽;检测MAGE3mRNA的表达;肽混合物进行高压液相纯化分离和差异比较;筛选出含有肿瘤特异肽的组分进行串联质谱检定和定量分析;最后检测患者体内是否有针对该表位的T细胞反应。结果MAGE3在肝癌细胞样品中表达阳性,在肝细胞中阴性;随后从肝癌细胞样品中检测出自然呈递的MAGE3271279表位抗原肽FLWGPRALV(3839拷贝/细胞),并从患者外周血中检测出针对该表位的特异性T细胞反应。结论本实验从肿瘤组织中检测出自然呈递的MAGE3271279表位,并揭示了该表位的潜在应用价值,同时也初步展示了质谱在肿瘤相关表位检测中快捷、准确的特点,而这些特点对于肿瘤相关表位的鉴定和肽疫苗的设计是非常重要的。