摘要：目的探讨RT-PCR以CK19mRNA作为标记物在检测喉癌、喉咽癌患者外周血播散肿瘤细胞(disseminatedtumorcell,DTC)的意义。方法采用套式RT-PCR,以CK19mRNA为指标,检测32例喉癌、喉咽癌患者外周血中的DTC。结果CK19mRNA总阳性率为46.9%(15/32);其中喉癌阳性率为40%(10/25);喉咽癌阳性率为71.4%(5/7)。20例正常对照组全部阴性。淋巴结转移组阳性率75%(9/12),非淋巴结转移组阳性率30%(6/20),两者之间有显著性差异(P<0.05)。阳性组患者的无瘤生存期(20.29±5.16月)比阴性组(37.13±3.23月)明显缩短,经Log-rank检验有统计学差异(P=0.046,<0.05),阳性组的复发率(66.7%)比阴性组(18.8%)增高(P<0.05)。并且做了生存分析,有统计学差异(P=0.015,<0.05)。结论以CK19mRNA肿瘤标记物,用精确设计的RT-PCR技术对外周血DTC的检测有助于喉癌、喉咽癌转移的早期发现;随访初步发现用DTC的检测有望作为肿瘤复发和远处转移的早期预示手段。

摘要：目的探讨EB病毒（epstein-barr virus,EBV）潜伏膜蛋白1（Iatent membrane protein1，LMP-1）对鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）细胞体外转移能力的影响。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性发夹状RNA（small hairpin RNA，shRNA）干扰序列，构建2种重组腺相关病毒（recombinant adeno—associated virus，rAAV）载体：rAAV-增强型绿色荧光蛋白（enhance green fluorescent protein，EGFP）和rAAV-shRNA—LMP-1，以不同滴度rAAV-EGFP转染鼻咽癌C666—1细胞确定最佳转染效率（multiplicity of infection，MOI），rAAV-shRNA-LMP-1按MOI转染C666-1，RT-PCR鉴定抑制效率，划痕试验和基底膜穿透试验检验细胞转移能力的变化。结果以rAAV-EGFP5×10^4v．g（virus genome，病毒基因组数），细胞转染C666—1细胞，转染效率大于95％，RT-PCR鉴定rAAV-shRNA—LMP-1以5×10^4v．g／细胞转染C666-1后目的基因抑制效率大于90％，划痕试验显示在相同的时间内，越过划痕边缘移动到空白处的细胞数明显减少（P〈0．01），基底膜穿透试验提示细胞穿透能力显著下降（P〈0．001）。结论通过rAAV介导RNA干扰能有效抑制LMP-1基因表达，并显著抑制了肿瘤细胞的运动及穿透转移能力。

摘要：目的研究miR-93对神经母细胞瘤细胞侵袭和迁移能力的影响及可能的分子机制。方法收集13例确诊的神经母细胞瘤患儿原发部位和转移部位组织样本，利用实时定量PCR的方法检测样本中miR-93的表达水平。在神经母细胞瘤细胞SH—SY5Y和SH—N-SH细胞中转染miR-93mimic，转染24h后利用实时定量PCR技术检测SH—SY5Y和SH—N-SH中miR-93的表达水平。利用Transwell侵袭实验检测过表达miR-93后对细胞侵袭能力的影响。利用体外划痕实验检测过表达miR-93对细胞迁移能力的影响。利用Western blot方法检测过表达miR-93mimic后SH—SY5Y和SH-N-SH细胞中MYCN蛋白表达水平。在Targetscan中找出可能与miR-93作用的MYCN的3’UTR序列，设计合成野生型与突变型MYCN的3’UTR的PCR引物，构建野生型与突变型荧光素酶报告载体，用X-tremeGENE将荧光素酶报告载体分别与miR-93mimic共转染到SH—SY5Y细胞中，用双荧光素酶检测试剂盒检测荧光素酶活性，验证miR-93对MYCN的靶向调控作用。结果与原发性神经母细胞瘤相比，miR-93在转移瘤中表达显著降低。过表达miR-93后SH—SY5Y和SH—N-SH细胞侵袭和迁移能力显著降低。过表达miR-93后，SH-SYSY和SH-N-SH细胞内MYCN蛋白表达下调。荧光素酶活性检测表明miR-93能够抑制MYCN的荧光素酶活性。结论MiR-93能够通过负调控MYCN而抑制神经母细胞瘤细胞侵袭和迁移能力。

摘要：目的 探讨cT1N0M0肺腺癌肺内叶段淋巴结（lobar and segmental lymph nodes,LSNs）转移规律,为更加精确的判定N分期及制定肺段切除适应证提供依据.方法 设计前瞻性研究,入组自2014年3月至2015年12月就诊于中日友好医院胸外科,接受肺叶切除＋纵隔淋巴结清扫的cT1 N0M0肺腺癌病例103例.对肺叶切除标本进行LSNs分检,与对应的肺叶标本、其他各站淋巴结共同送病理检查.结合病变大小、影像学特征、血清CEA水平、病理亚型等进行统计分析.结果 103例肺腺癌患者经病理学检查确认pN0 82例,pN1 15例,pN1＋ N2 5例,跳跃性pN2 1例.pN1病例中14例（93.3％）检出12-14组淋巴结转移,5例（33.3％）仅有12-14组LSNs转移;pN2病例中4例（66.7％）检出12-14组淋巴结转移,1例（16.7％）仅检出13组和7组淋巴结转移.如未对LSNs进行分检,N分期假阴性率达6.1％ （5/82）;N1站淋巴结转移漏诊率高达33.3％ （6/20）.检出段区域内叶段淋巴结（aLSNs）,即病变所在段内或段周LSNs转移的病例,41.2％（7/17）检出段区域外叶段淋巴结（iLSNs）,即肺段切除无法清扫或不易解剖到的LSNs转移.按影像学特征分组,单纯GGN组与部分实性/实性结节组相比,iL-SNs转移率低,P=0.049.病理亚型为浸润性腺癌的病例组较浸润前或微浸润病变组iLSNs转移率高,P =0.055,差异无统计学意义.不同血清学CEA水平和不同肿瘤大小组间iLSNs转移率差异无统计学意义,P值分别为0.251和0.197.结论 分检肺内叶段淋巴结有助于精确化肿瘤N分期,减少淋巴结转移假阴性比率,为更准确评估预后、制定术后辅助治疗方案提供依据.肺段切除术中淋巴结采样范围应包括病变所在段内或段周LSNs.以纯GGN为影像学特征的cT1N0M0肺腺癌病例iLSNs转移率低,在满足其他条件的前提下,可能更适用肺段切除.

摘要：对77例全身骨显像诊断癌的骨转移灶分析。采用自行设计的病灶相对灵敏度说明全身骨显像较X线摄影检测癌的骨转移灶灵敏4.87倍,而病例相对灵敏度则表明前者较后者灵敏1.83倍。并对其设计及计算方法等作了探讨。

摘要：乏氧普遍存在于多种实体肿瘤中,极易导致抗肿瘤治疗(如:化疗、放疗、光动力治疗、声动力治疗等)的失败,并最终引起肿瘤的恶化和转移。近年来,许多新兴的纳米技术不断涌现,并被用于改善肿瘤乏氧,从而降低治疗耐受的发生。现有的纳米氧载体主要通过向肿瘤直接递送氧气或与肿瘤微环境反应产生氧气来实现供氧。从纳米氧气载体的设计及其在肿瘤诊疗中的应用2个方面,综述近5年纳米技术在肿瘤供氧方面的研究进展,以期为相关研究提供参考。

摘要：趋化因子CCL21与其受体CCR7在肿瘤细胞选择性和特异性转移过程中发挥重要作用,可能成为抗肿瘤转移药物治疗的新靶点。就其结构和生物学功能、抗肿瘤作用机制、在恶性肿瘤转移中作用的研究进展作一综述,为抗肿瘤新药研发提供思路。

摘要：循环肿瘤细胞（CTC）对于监测肿瘤复发及判断预后具有重要意义.纳米技术为检测CTC提供了良好的平台,使CTC的应用具有广阔的发展前景.同时,利用纳米技术设计杀灭CTC的纳米装置在清除CTC方面有广阔的应用前景,为肿瘤治疗提供了新的研究方向.

摘要：核仁素的异常表达存在于多种疾病进展中,特别会影响炎症反应、病毒感染、肿瘤等疾病的发生和进展.核仁素在多种肿瘤中表达量升高,分布位置发生变化,影响肿瘤细胞增殖、凋亡、肿瘤转移等多个过程.

摘要：为了解决microRNA模拟物半衰期较短,无法达到长时间研究的问题,实验构建了miR-22真核表达质粒并转染人卵巢癌细胞系SKOV-3,建立稳定表达miR-22的细胞模型,为研究miR-22在肿瘤发生发展过程中的作用提供有效的工具。首先设计并构建过表达miR-22的Psilencer 4.1-miR-22重组质粒,经宿主菌扩增、酶切、测序鉴定后,重组质粒和阴性对照质粒分别转染卵巢癌细胞系SKOV-3,G418筛选建立稳定表达miR-22(实验组)和control-RNA(阴性对照组)的SKOV-3细胞系,用qRT-PCR验证所构建的细胞系中miR-22表达量的差异。最后通过细胞划痕-修复实验和侵袭小室实验观察过表达miR-22对卵巢癌细胞迁移能力的影响。经宿主菌扩增、酶切、测序证实,成功构建miR-22真核表达质粒,插入的DNA片段与设计序列完全一致。与对照组相比,在建立的稳定表达miR-22的SKOV-3细胞中,miR-22 mRNA水平明显上调(P<0.05),细胞的迁移能力也显著下降(P<0.05)。综上所述,成功构建了过表达Pre-miR-22的重组质粒,并获得了稳定表达miR-22的SKOV-3细胞系。