摘要：Senhwa生物科学公司宣布FDA授予CX-4945治疗晚期肝小胆管癌的罕见病药设计认可。该药是新一代小分子药物，抑制蛋白激酶CK2，在癌细胞DNA损害的修复机制中具有重要作用。

摘要：目的 :应用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默胆管癌RBE细胞中人髓细胞白血病因子1相互作用蛋白(MLF1IP)基因的表达,探讨其对胆管癌细胞体外增殖的影响。方法 :设计合成针对MLF1IP靶基因序列的siRNA序列,进行重组慢病毒包装。与不含有MLF1IP基因si RNA序列的慢病毒分别转染胆管癌RBE细胞株。Real-time PCR检测MLF1IP基因的mRNA表达,MTT法检测细胞的增殖能力。结果 :成功构建了MLF1IP-sh RNA慢病毒质粒并进行慢病毒包装,Real-time PCR显示实验组MLF1IP基因的mRNA相对表达量为0.15±0.02明显高于对照组为1.01±0.12。MTT法检测实验组细胞的OD值对比对照组显著降低。结论 :慢病毒介导的RNA干扰技术能有效沉默RBE细胞中MLF1IP基因的表达,并能明显抑制胆管癌细胞RBE的体外增殖能力。

摘要：目的确定二肽基肽酶-4 (DPP-4)抑制剂和胰高血糖素样肽-KGLP-1)受体激动剂的使用是否与成人2型糖尿病患者胆管癌风险的增加有关。设计基于人群的队列研究。背景向英国临床实践研究数据链提供数据的全科医学机构。参与者在2007年1月1日至2017年3月31日期间接受过抗糖尿病药物治疗的154162名成年患者,并随访至2018年3月31日。主要结局测量将DPP-4抑制剂和GLP-1受体激动剂的使用设立为时间相关变量.并与使用其他二、三线抗糖尿病药物进行比较。所有的暴露都推后一年,以校正癌症的潜伏期并最大限度地减少逆向因果关系。Cox比例风险模型用于估计DPP-4抑制剂和GLP-1受体激动剂相关性胆管癌事件的风险比(HR)和95%可信区间(C/)。采用世界卫生组织的全球个案安全报告数据库VigiBase开展了一项事后药物警戒分析,以评估胆管癌的报告比值比。结果在对614 274人年的随访期间,发生105例胆管癌事件(发生率17.1/10万人年)。使用DPP-4抑制剂胆管癌风险增加77%(HR1.77,95%CI 1.04-3.01),GLP-1 受体激动剂的使用与风险增加相关,具有较宽的可信区间(HR1.97,95%C/0.83-4.66).在药物警戒分析中,与磺脉类或噬醴烷二酮类药物相比,使用DPP-4抑制剂和GLP-1受体激动剂均与胆管癌的报告比值比增加相关(分别为1.63, 95%CI 1.00-2.66;4.73,95%CI 2.95-7.58)。结论与其他二、三线抗糖尿病药物相比,使用DPP-4抑制剂和GLP-1受体激动剂可能与成人2型糖尿病患者患胆管癌的风险增加有关。

摘要：目的:探讨黏蛋白5AC特异性siRNA对人肝内胆管癌细胞珠HCCC-9810体外增殖及凋亡能力的影响.方法:设计合成三对特异性siRNA,构建了三个可在哺乳动物细胞中表达siRNA的表达质粒,pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3,应用脂质体转染技术分别将三个稳定表达的质粒和对照质粒(空质粒对照)转染HCCC-9810,应用有荧光标记的非特异性小分子的siRNA检测转染效率,RT-PCR检测黏蛋白5AC基因mRNA水平;SABC免疫组化染色技术检测黏蛋白5AC的表达;MTT检测细胞生长增殖情况;流式细胞仪分析细胞凋亡.结果:基因测序表明成功构建质粒;转染后荧光蛋白表达率28.57%;RT-PCR结果表明在mRNA水平,三个质粒都可抑制黏蛋白5AC基因的表达,并可使黏蛋白5AC的表达下降,MTT结果对细胞的生长有一定的抑制作用,流式细胞仪分析结果使肿瘤细胞凋亡增加.结论:构建pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3质粒明显抑制了黏蛋白5AC基因在mRNA水平及蛋白的表达,并可抑制肿瘤细胞的生长增殖和诱导其凋亡.

摘要：目的运用siRNA抑制肝门部胆管癌QBC939细胞系中人DNA甲基转移酶1(Human DNA methylation trans-ferase 1,hDNMT1)基因的表达,探讨hDNMT1基因沉默后对QBC939细胞抑癌基因p16和RASSF1A去甲基化的影响,初步阐明其机制。方法根据GenBank中登录的hDNMT1 mRNA的核苷酸序列设计并合成发夹式siRNA序列,并以此为模板构建siRNA质粒,经脂质体转染QBC939细胞,通过RT-PCR检测hDNMT1、p16、RASSF1A基因mRNA转录水平;甲基特异性PCR(MSP)检测p16、RASSF1A基因的甲基化情况;MTT法检测QBC939细胞增殖活力。结果 sihDNMT1可有效抑制QBC939细胞中hDNMT1基因mRNA转录水平,同时上调p16、RASSF1A抑癌基因mRNA转录水平;sihDNMT1可促进p16、RASSF1A抑癌基因的去甲基化,并抑制QBC939细胞增殖,增殖抑制率在转染后72 h达到峰值。结论 hDNMT基因引起的抑癌基因启动子区异常甲基化是促进肝门部胆管癌发生发展的一个重要因素,抑制hDNMT1基因的表达可促进抑癌基因的去甲基化,为肝门部胆管癌的基因治疗提供了新的思路。

摘要：目的构建miR-21慢病毒干扰载体,并观察其对胆管癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法针对目标序列,设计2条合适的PCR引物进行退火得到插入片段序列。将慢病毒干扰载体双酶切,纯化后与退火产物进行定向连接,产生慢病毒干扰质粒和阴性对照质粒,将其与慢病毒包装质粒混合物共转染293T,包装产生慢病毒。使用收获的慢病毒感染胆管癌细胞HUCCT1,荧光显微镜观察感染效率,细胞增殖和划痕实验分别检测HUCCT1下调miR-21后细胞增殖能力和迁移能力的改变。结果成功构建了miR-21慢病毒干扰载体。感染胆管癌细胞HUCCT1后,miR-21表达降低;下调miR-21(LV-anti-miR21)组和感染空白慢病毒载体(LV-GFP)组相比,LV-anti-miR21组增殖能力和迁移能力均明显下降(P<0.05)。结论成功构建miR-21慢病毒干扰载体;下调miR-21能够抑制胆管癌细胞的增殖,降低胆管癌细胞的迁移能力。

摘要：目的 :体外实验观察乳酸脱氢酶-A(lactate dehydrogenase-A,LDHA)短发夹RNA对胆管癌细胞系Hucct1 LDHA表达的抑制效果,筛选出针对LDHA基因有效的干扰靶点,并检测LDHA表达下调后,细胞增殖活力的改变情况。方法:设计合成干扰LDHA表达的寡核苷酸片段,经退火、连接等步骤克隆到线性化pGPU6/GFP/Neo真核表达载体,转化入DH-5α大肠杆菌中扩增,经质粒抽提纯化后测序鉴定。重组质粒用脂质体法转染胆管癌细胞系,荧光显微镜观察转染效率;并分别利用RT-PCR及Western blot技术检测LDHA mRNA及蛋白表达,验证短发夹RNA的干扰效果。将干扰效率最高的质粒转染Hucct-1,MTT法检测干扰组较对照组细胞增殖的变化。结果:成功构建了靶向LDHA基因的3个shRNA质粒表达载体,脂质体法平均转染效率为(80±5)%。荧光定量RT-PCR和Western blot显示瞬时转染si-LDHA-1、si-LDHA-3的Hucct1细胞LDHA mRNA和蛋白表达均较阴性对照组有不同程度的下降,其中si-LDHA-3干扰效果尤为明显。MTT法检测显示转染组Hucct1细胞较阴性对照组增殖减慢,转染后96 h两组差异具有统计学差异(P<0.05)。结论:重组质粒能有效干扰胆管癌细胞Hucct1中LDHA基因的表达,经瞬时转染筛选出了有效干扰靶位,下调LDHA的表达,明显抑制胆管癌细胞系Hucct-1的增殖活力。

摘要：目的设计新型一体化可携带125I粒子的胆道内外引流管,用于治疗胆管恶性梗阻病变,以达到胆汁引流和腔道内近距离放疗的双重效果。方法 2016年9月至2018年1月郑州大学第一附属医院15例恶性梗阻性黄疸患者行胆管支架植入术,后引入新型一体化可携带125I粒子的胆道内外引流管。评价技术成功率,临床有效率,并发症,支架通畅时间和患者生存期。结果引流管置入简单顺利,技术均获成功。术后1个月胆红素水平较术前明显下降(P0.05)。术后2例(13.3%)患者发生胆管炎,2例(13.3%)胆道少量出血,对症治疗后恢复正常。未出现胆管穿孔、严重出血、放射性肠炎和放射源泄漏等严重并发症。随访55～402 d,6例(40.0%)发生胆管再梗阻,支架中位通畅时间255 d,6个月通畅率64.5%。5例死亡,10例存活,9个月存活率64.3%,中位生存时间368 d。结论新型一体化可携带125I粒子的胆道内外引流管可同期实现胆汁引流和近距离放疗,初步临床使用可行、安全、有效,长期疗效需进一步随访观察和对照研究。

摘要：嵌合抗原受体基因修饰T细胞(chimeric antigen receptor gene modified T lymphocyte,CAR-T cell)治疗血液肿瘤显示了良好的效果,也为治疗食管癌、胃癌、肝细胞癌、胆管癌、胰腺癌和结直肠癌等消化系统肿瘤提供了新选择。消化系统不同部位肿瘤的细胞特征和肿瘤微环境存在差异,故靶向抗原的选择和CAR-T细胞的设计也相应地有所不同。CAR-T细胞治疗与其他免疫治疗联合使用也取得了一定的进展,但主要体现在细胞实验和小鼠体内实验。目前存在的脱靶效应、细胞因子释放综合征等副作用严重阻碍了CAR-T细胞的研究进展,限制了其在实体瘤中的应用。本文就近年来CAR-T细胞治疗消化系统肿瘤的研究进展作一阐述。

摘要：目的设计及制作放射性塑料胆管支架,评价其可行性和安全性。方法设计及制作携带^(125)Ⅰ粒子的塑料支架。选用健康家养猪16只,胆总管植入放射性塑料胆管支架,放射计划系统(TPS)计算距粒子轴心5 mm处的参考点剂量,根据剂量不同分为3个照射组:50 Gy照射组(n=4)、100Gy照射组(n=4)、150Gy照射组(n=4)。另选同级别猪4只,分为2组:空白对照组(n=2),仅作胆管造影,不植入支架;支架对照组(n=2),植入无放射活性碘粒子的塑料支架。术前及支架植入后第1、7、14、30和60天分别检测血常规、血清淀粉酶、肝功能和肾功能。在支架植入后第14、30和60天分别处死动物,观察腹腔有无出血、积液和腹膜炎性反应,胆管有无穿孔、狭窄或者扩张,支架周围脏器有无损伤。胆管组织经H-E染色,光学显微镜分析并摄像。结果成功制作并植入放射性塑料胆管支架,各剂量照射组支架周围脏器无渗出、出血和坏死,未发现胆管穿孔。胆总管病理检查:对照组黏膜和黏膜腺体明显增生;各剂量照射组支架周围黏膜层明显坏死,50 Gy照射组黏膜上皮层缺损,黏膜腺体轻度增生;100 Gy照射组黏膜上皮层消失,黏膜腺体无明显增生;150Gy照射组黏膜上皮层消失,黏膜腺体明显减少。各组外周血实验室检查未见明显变化。结论放射性塑料胆管支架的设计安全、可行,除对胆总管黏膜有机械作用外,照射作用明显。