摘要：背景:许旺细胞作为周围神经损伤修复的重要桥接材料,其活性对临床修复周围神经损伤成功与否具有重要影响。目的:观察不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对胎兔许旺细胞活性的影响。方法:设计胎兔许旺细胞冷冻维持温度为-30～-70℃,每间隔-5℃为一组,以10%二甲基亚砜为低温保护剂,对胎兔许旺细胞进行上述温度冷冻预处理,液氮中保存48h,快速复温后继续培养48h,透射电镜观察细胞超微结构改变,MTT法和3H-TdR掺入法检测细胞活性。结果与结论:透射电镜下见-45℃处理的细胞超微结构良好,其余各温度组细胞均出现细胞器肿胀、坏死等轻重不同的冷冻损伤表现。MTT法和3H-TdR检测结果均显示-45℃冷冻预处理对许旺细胞的生长抑制率最低,分别为(3.83±0.56)%、(4.41±0.71)%,和其余各温度组之间相比,差异有显著性意义(P<0.05)。提示-45℃是胎兔许旺细胞冷冻预处理的最佳维持温度值,对细胞活性影响最小,可较好保持其生物学活性。

摘要：目的：设计同种异体神经移植的实验模型，探讨其临床应用的可能性。方法：选妊娠２８天的青紫蓝兔为供体，４８只大耳白兔为受体。取供体胎兔的坐骨神经，经超低温冷冻与液氮处理，复温后桥接于受体１侧正中神经缺损段，为实验组。另１侧取自体神经移植，为对照组。术后２周、３个月进行免疫学与神经电生理检测；电镜观察和形态定量学分析。结果：术后两组均无急性排异反应。神经传导速度，再生神经单位面积髓鞘数，平均灰度值及单位面积髓鞘密度值等，两组差异均无显著意义（Ｐ＞０．０５）。结论：胎兔神经能够代替自体神经移植。

摘要：目的:许多哺乳动物的胎儿在妊娠期前2/3内皮肤创伤为无瘢痕愈合,其发生机制至今尚不完全清楚。应用抑制性消减杂交获得差异表达的片段并构建消减文库,为差异基因的筛选及可能出现的未知基因的功能研究提供前期铺垫。方法:选择孕20d的胎兔及孕兔分别在腰部做全层皮肤切口,12h后取材作为胎兔创伤(fetaltrauma,FT)、胎兔对照(fetalcontrol,FC)和成兔创伤(adulttrauma,AT)。提取总RNA,合成dscDNA,经RsaⅠ酶切、Adaptor连接,两次杂交及两次抑制性PCR可获得差异性表达的片段。将扩增产物插入T载体并转染工程菌,培养后挑选阳性克隆。结果:经逐步验证获得61个较为可靠的阳性克隆。结论:设计并应用改良的SSH(2Drivers)替代传统的SSH,经实验证实在理论及实际操作上均可行且合理。消减文库的构建对无瘢痕愈合相关基因及其功能的后续研究提供了可靠的材料。