摘要：以中国被毛孢为发酵菌种,采用Box-Benhnken组合设计、响应面分析法对中国被毛孢胞外多糖(Ophiocordyceps sinensis extracellular polysaccharides,OPS)发酵的影响因素进行了优化研究,得出了最适液体发酵工艺:pH6.17、葡萄糖33.36 g/L、蚕蛹粉21.43 g/L,该条件下OPS含量可达355.79 mg/L,与理论值基本吻合。在此基础上,通过细胞增殖检测试剂盒测定OPS分别在100、200、400、600μg/mL浓度下对HT-29细胞的抑制率,发现其对HT-29细胞有较好的抑制作用。流式细胞仪检测表明,OPS对HT-29细胞生长的抑制作用与OPS诱导的细胞凋亡有关,细胞早期凋亡率从2.34%增加到24.0%。OPS处理后S期细胞增加到37.64%,G0/G1期细胞相应减少,OPS导致细胞周期在S期停滞。该研究结果可为OPS的开发利用提供新思路,为其在食品和药品中的开发与应用提供理论依据。

摘要：为优化桑树桑黄胞外多糖液态发酵培养基配方并探究其体外抗氧化活性,利用组织分离法纯化并鉴定1株桑树桑黄菌株JM-1,通过Box-Behnken响应面法优化菌株胞外多糖液态培养基配方,并考察其体外抗氧化活性。结果表明,优化后的液体培养基配方为玉米粉5.4 g·L^(-1)、葡萄糖17.0 g·L^(-1)、蛋白胨5.8 g·L^(-1)、维生素B1(V_(B1)),10.0 mg·L^(-1)、KH2PO43.0 g·L^(-1)、MgSO_(4)·7H_(2)O 5.0 g·L^(-1),该条件下菌株JM-1产胞外多糖含量为5.918 g·L^(-1),比基础培养基提高了13.63%。抗氧化活性试验结果表明,在质量浓度为5 mg·mL^(-1)时,JM-1菌株产胞外多糖的还原能力为3.187 mmol·L^(-1),对DPPH自由基和羟自由基的清除率分别为63.9%、54.3%。研究结果可为桑黄资源的开发利用提供科学参考。

摘要：细菌自身能够合成各种多糖分子,并分泌于细菌表面形成多糖保护层。当细菌处于恶劣环境时,多糖保护层能够调节细菌适应周围环境,从而使其存活。革兰氏阴性细菌分泌的主要多糖成分包括脂多糖、荚膜多糖、胞外多糖,它们通常是引起人体中产生强烈免疫反应的有效抗原,对细菌的致病性至关重要。因此研究它们的结构和合成转运机制等具有十分重要的作用,可以为细菌多糖运输途径的靶点药物设计等提供创新性的指导与思路。本文对细菌多糖的结构、合成转运机制、影响和作用等方面进行重点介绍。

摘要：基于科教融合和成果导向(OBE)教育理念,将生化领域的前沿科技成果转化为教学实验,培养学生的科研创新素质。引入科研项目“多糖的制备工艺对其黏弹性能的影响”并贯穿教学全过程,引导学生查阅文献并讨论“耐温耐盐、环境友好新型驱油剂开发”的热点问题,拓宽学生的学术视野,培养学生文献查阅能力;鼓励学生根据自己的知识体系设计个性化实验方案,培养学生分析问题、解决问题的能力;指导学生探究利用盐醇析法和Sevage法制备多糖的工艺并计算其得率,采用红外和紫外光谱对样品进行表征,探究不同制备工艺对黏弹性及驱替效果的影响,帮助学生搭建“生物—化工—能源”多学科知识体系,提升实践创新能力;开展数据分析、方案评价和成果路演,锻炼学生的科研探究能力。

摘要：在相同条件下分别液态发酵培养赤芝(Ganoderma lucidum)G0119、G0154及其杂交菌株GZ36,比较不同发酵时间(24、48、72、96 h)所得胞外多糖的含量、重均分子量分布特征、单糖组成特征和免疫活性差异。结果表明:3个菌株的胞外液在21~26、34~44 min时间段均出现2个峰(P1、P3),而GZ36在26~33 min时出现峰P 2。在实验范围内,随着发酵时间延长,3个菌株的不同组分含量均呈现增加趋势。发酵终点72 h的胞外多糖P1、P2、P3的重均分子量分别为5.193×10^(6)~8.957×10^(6)、4.437×10^(6)、6.033×10^(4)~8.148×10^(4)g·mol^(-1)。与60%乙醇沉淀组分(60 E)相比,3个菌株胞外多糖的20%乙醇沉淀(20 E)组分的产量较高。与亲本菌株G0119、G0154的20E组分相比,杂交菌株GZ36的20E组分产量(0.46 g·L^(-1))较高,其多糖含量(82.96%)也较高;3个菌株的60E组分相比,菌株GZ36、G0154的产量(0.13、0.14 g·L^(-1))较高,菌株GZ36的多糖含量(78.76%)较高。杂交菌株GZ 36胞外多糖20 E组分(主要由葡萄糖组成)和60 E组分(主要由木糖组成)在单糖组成和比例上更接近亲本菌株G0154。与阴性对照相比,3个菌株的胞外多糖20E组分均表现出刺激Dectin-1受体的活性;60E组分均具有诱导巨噬细胞释放NO的活性。与亲本菌株相比,在200μg·mL^(-1)时,杂交菌株GZ36的60 E组分活性较强。研究结果为了解灵芝亲本与杂交菌株胞外多糖的异同提供参考。

摘要：乳酸菌胞外多糖具有良好的功能特性。从泡菜中分离乳酸菌,初筛到11株产胞外多糖的乳酸菌。经黏度及EPS产量测定,复筛出1株高产EPS的乳酸菌,其产量为771.97μg/m L。采用CTAB法提取该菌株基因组,测定其16S r RNA序列,在NCBI上进行同源序列比对,建立系统发育树。结果初步确定该菌株为干酪乳杆菌ZJ-4(Lactobacillus casei ZJ-4)。以该菌株基因组为模板,参照干酪乳杆菌BL23(HM162415)的gal U序列设计引物。采用Touch-down PCR扩增得到大约900 bp的gal U序列,经TA克隆、测序,与干酪乳杆菌BL23(HM162415)的gal U序列同源率为98%,表明克隆正确。

摘要：目的:为获得更多的羊肚菌胞外多糖,探索有利于羊肚菌产生胞外多糖的最佳发酵条件。方法:以羊肚菌GIM5.69为研究对象,首先对影响羊肚菌发酵产生胞外多糖的诸多外界因素进行Plackett-Burman设计试验,筛选出主要影响因素;然后采取响应面法,用Box-Behnken设计试验探寻各影响因素的最佳水平。结果:羊肚菌胞外多糖的最佳液体发酵培养条件为:蔗糖3.98%,培养时间5.98 d,转速217.44 r/min。此条件下的验证试验表明,此时胞外多糖的得率为53.04%,与理论值基本吻合,误差仅为1.64%。结论:该方法对羊肚菌多糖的开发与应用有重要意义。

摘要：微生物胞外多糖(exopolysaccharidess,EPS)因其生产周期短等优点具有潜在的应用价值。该文从纳豆中筛选出1株高产EPS的菌株并鉴定该菌株为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensi)。为提高其EPS产量,通过对发酵培养基的组分和发酵培养条件进行单因素试验,然后采用Plackett-Burman(PB)设计对9个因素的重要性进行评判,从中选出3个重要影响因素进行Box-Benhnken实验设计优化得到最终的最佳培养方案:葡萄糖22.6 g/L,黄豆饼粉9.3 g/L,玉米浆2.0 g/L,K_(2)HPO_(4)0.5 g/L,NaH_(2)PO_(4)1.5 g/L,MgSO_(4)1.5 g/L,MnCl_(2)0.05 g/L,初始pH 7.5,装液量70 mL,温度为34℃,接种量为6%。与初始发酵工艺相比,EPS产量提高了133.3%。经7 L发酵罐放大验证后,EPS产量增加至6.56 g/L,与摇瓶水平相比,EPS产量提高了123.1%,并且已初步探索该EPS具有纳豆激酶活性。有望成为合成药物的潜在来源。

摘要：对乳酸乳杆菌发酵生产胞外多糖的发酵条件进行了优化。在确定Elliker培养基为最适培养基的基础上,利用Plackett-Burman试验设计,筛选出对胞外多糖产量有显著影响的因素,即酵母粉、发酵时间、初始pH值,然后针对这3个关键因子,用单因子试验及中心组合试验优化得到最佳发酵条件。结果表明:当酵母粉为17.35 g/L,初始pH 5.85,发酵时间23.18 h时,乳酸乳杆菌胞外多糖实际产量可达3.910 g/L。

摘要：目的:提高透明颤菌胞外多糖(extracellular polysaccharides of Vitreoscilla,VEPS)的产量,初步研究VEPS的抗肿瘤活性。方法:采用了单因素实验、Plackett-Burman实验、最陡爬坡路径实验、Box-Behnken实验设计以及噻唑蓝MTT法。结果:确定影响透明颤菌产胞外多糖的培养基的成分及最佳配比,并初步研究VEPS的抗肿瘤活性。优化得到的最佳培养基配方为蛋白胨5 g·L-1、乳糖39 g·L-1、KH2PO40.17 g·L-1、K2HPO40.46 g·L-1、(NH4)2SO40.2 g·L-1、复合盐溶液1 mL·L-1(MgSO419.5 g·L-1,MnSO45 g·L-1,FeSO41.4 g·L-1,CaCl20.05 g·L-1),此时透明颤菌胞外多糖产量为(583.6±6.3)mg·L-1,与初始培养基培养条件下的产量相比提高了364.3%,与预测值误差为1.3%。结论:体外抗肿瘤实验表明VEPS有良好的抗肿瘤活性。