摘要：[目的]开发一种安全、无毒且高效的枸杞叶黄酮类化合物提取方法。[方法]采用超声波辅助双水相法实现高得率、绿色的枸杞叶黄酮类化合物提取,并评价产物活性。通过单因素和Plackett-Burman(PB)试验考察各因素对黄酮提取效果的影响,选取聚乙二醇(PEG400)使用量、硫酸铵使用量、料液比3个因素通过响应面中心组合试验设计优化提取条件;通过胰脂肪酶活性抑制试验评价提取物活性。[结果]超声波辅助双水相法提取枸杞叶黄酮最佳工艺条件为:聚乙二醇PEG相对分子质量400,PEG质量分数28%、硫酸铵质量分数16%、超声功率250 W,超声处理时间40 min、超声处理温度40℃、料液比1∶30 (g/g),该条件下所提取的枸杞叶黄酮提取物的总黄酮含量为(486.30±3.29) mg/g,其对胰脂肪酶活性具有显著抑制作用,半数抑制质量浓度(IC50)为1.06 mg/mL。[结论]最优提取条件下,超声波辅助双水相法所提取的枸杞叶黄酮得率高、溶剂残留低,该方法所得枸杞叶黄酮对胰脂肪酶具有良好的抑制作用。

摘要：本文首先以天然胰脂肪酶抑制剂齐墩果酸作为原料,设计合成新型齐墩果酸衍生物,并对其结构进行1H NMR、13C NMR及MS表征,然后采用对硝基苯酚法对其抑制胰脂肪酶作用进行研究,最后通过分子对接分析其相互作用机制。结果表明,2个全新合成的衍生物,齐墩果烷-28-β-内酯和齐墩果烷-28-α,β-不饱和酯,其抑制胰脂肪酶活性(IC_(50):16.4和18.5μmol/L)均显著高于齐墩果酸(IC50:87.7μmol/L),分别为齐墩果酸的5.35倍和4.74倍。齐墩果酸和齐墩果烷-28-α,β-不饱和酯属于混合型抑制,特别地,齐墩果烷-28-β-内酯转变为竞争型抑制。抑酶活性提高主要与胰脂肪酶形成的氢键数目及衍生物的疏水性有关。

摘要：目的探讨严重烫伤大鼠早期胰腺外分泌功能变化的机制。方法采用实验研究方法。取80只7~8周龄雄性SD大鼠,按随机数字表法分为单纯假伤组(8只)、假伤+胆囊收缩素八肽(CCK8)组(8只)、严重烫伤+CCK8组(32只)和特重烫伤+CCK8组(32只),分别作相应处理。2组假伤大鼠伤后即刻及2组烫伤大鼠伤后1、2、3、7 d,采用改进的胰管穿刺置管法动态收集大鼠胆胰混合液(PBJ),记录1 h内分泌PBJ的体积,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测并计算PBJ中胰脂肪酶、α-淀粉酶和胰蛋白酶的含量(样本数为8);收集股静脉血,采用标准比色法检测血清中胰脂肪酶和α-淀粉酶的浓度,反映其活力(样本数为8);提取胰腺组织,采用ELISA法检测胰腺组织中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6水平(样本数为8),采用免疫荧光法检测胰腺组织中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达,采用苏木精-伊红染色观察胰腺组织病理学变化,采用改良Schmidt法评估(仅2组烫伤大鼠)胰腺组织损伤的严重程度(样本数为6),采用透射电子显微镜观察胰腺组织腺泡细胞超微结构。对数据行析因设计方差分析、Tukey检验、独立样本t检验和LSD检验。结果与单纯假伤组大鼠伤后即刻胰腺组织1 h内的PBJ分泌体积(0.740±0.030)mL相比,假伤+CCK8组的(0.823±0.033)mL显著升高(t=4.92,P0.05)。与假伤+CCK8组大鼠伤后即刻相比,严重烫伤+CCK8组大鼠伤后1、2、3 d和特重烫伤+CCK8组大鼠伤后1、2、3、7 d胰腺组织中的IL-1β水平均显著升高(P<0.05),严重烫伤+CCK8组和特重烫伤+CCK8组大鼠伤后1、2、3、7 d胰腺组织中的IL-6水平均显著升高(P<0.05)。与严重烫伤+CCK8组相比,特重烫伤+CCK8组大鼠伤后2、3 d胰腺组织中的IL-1β水平均显著升高(P<0.05),伤后2 d胰腺组织中的IL-6水平均显著升高(P<0.05)。单纯假伤组和假伤+CCK8组大鼠伤后即刻胰腺组织中HIF-1α表达水平均较低;相较于假伤+CCK8组伤后即刻,2组烫伤大鼠胰腺组织中HIF-1α表达水平于伤后不同时间点均呈一定程度的升高,其表达位置由胰腺组织边缘向全胰腺过渡,2组烫伤大鼠胰腺组织中HIF-1α表达水平于伤后7 d趋于正常。相较于单纯假伤组伤后即刻,假伤+CCK8组大鼠胰腺组织中腺泡细胞胞质占比增大;2组烫伤大鼠随伤后时间的延长,胰腺组织出现不同程度的水肿、出血、坏死及炎症浸润。与严重烫伤+CCK8组相比较,特重烫伤+CCK8组大鼠伤后各时间点胰腺组织水肿、炎症细胞浸润、出血和坏死得分表现出不同程度的升高,且2组烫伤大鼠胰腺组织各项目评分均于伤后7 d基本恢复正常。相较于单纯假伤组伤后即刻,假伤+CCK8组大鼠胰腺组织腺泡细胞内酶原颗粒数量增加;2组烫伤大鼠随伤后时间的延长,腺泡细胞内酶原颗粒基本呈逐渐减少趋势。结论严重烫伤大鼠早期胰酶合成和分泌等胰腺外分泌功能下降;且烫伤面积越大,外分泌功能下降程度越显著。这一变化可能与严重烫伤后胰腺组织发生缺氧损伤和炎症反应有关。

摘要：试验以山楂叶为原料,采用超声辅助提取,研究液料比、乙醇浓度、超声时间、超声温度对山楂叶多酚得率的影响。通过Box-Behnken试验,对山楂叶多酚的提取工艺进行优化,探讨山楂叶多酚对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶和胰脂肪酶的抑制作用。结果显示:山楂叶多酚提取条件为液料比40 m L/g、乙醇浓度70%、超声时间25 min、超声温度55℃时,多酚得率最高为0.66%。山楂叶多酚浓度为3.5 g/L时,对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用最强,抑制率分别为88.7%和83.3%。研究表明,山楂叶多酚对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶有较好的抑制作用,山楂叶多酚浓度为2.5 g/L时对胰脂肪酶有一定的抑制作用,抑制率最高为46.8%。研究结果对降糖降脂饲料的研发具有一定的指导意义。