摘要：为探究甜瓜果实在采后贮藏过程中脂氧合酶对果实后熟软化生理及相关基因表达的影响,以西州蜜17号为试验材料,通过对甜瓜果实贮藏期间脂氧合酶活性、乙烯释放量、果实硬度、呼吸强度、果胶酶活性、淀粉酶活性以及相关基因表达量进行测定,研究甜瓜果实采后脂氧合酶代谢、乙烯产生、后熟软化生理及相关基因表达的作用关系。分别将甜瓜果实在20℃贮藏(对照组)、经1-MCP处理后20℃贮藏、2℃贮藏,分析甜瓜果实中LOX活性与乙烯释放量的变化趋势。结果表明,在甜瓜果实后熟软化过程中,LOX活性上升先于乙烯释放量的增加,而在乙烯释放量与呼吸强度跃变后,LOX活性逐渐下降。同时,果实中果胶酶与淀粉酶活性及其基因表达量在跃变现象发生后显著增加,果实硬度随之迅速下降,说明果胶酶与淀粉酶基因表达增强和酶活性升高是甜瓜果实发生软化的关键因素。此外,LOX活性升高能够启动乙烯释放量的增加,促使果实发生呼吸跃变并进入后熟阶段,但乙烯对LOX却没有调控作用。由此可知,LOX活性对果胶和淀粉的变化没有直接影响,而是通过启动乙烯的释放来调节果胶和淀粉的代谢反应,使果实发生软化。

摘要：以唐菖蒲(Gladiolus hybridus)品种'Rose Supreme'的球茎为试材,应用Real time RT-PCR技术,分析唐菖蒲球茎在不同浓度的茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MJ)0.1、0.2、0.5mmol·L-1和水杨酸异羟肟酸(salicylhydroxamic acid,SHAM)0.5、0.75、1.0mmol·L-1处理后脂氧合酶(LOX)基因的的表达水平,并且对LOX活性、内源MJ含量以及球茎鲜样质量与体积进行测定。分析结果表明,GhLOX1表达水平、脂氧合酶活性、内源MJ含量以及球茎的鲜样质量与体积均随着MJ浓度的增加而逐渐提高。与此相反,经过不同浓度的LOX抑制剂SHAM处理后,以上各项指标随着SHAM浓度的增加而逐渐降低。同时,构建35S-GhLOX1过表达载体,利用根癌农杆菌介导法将GhLOX1导入马铃薯栽培品种'中薯3号'的试管薯薄片中,转基因马铃薯植株块茎的数量、体积和鲜样质量分别得到了不同程度的提高。

摘要：以砂梨‘若光’的成熟果实为材料,根据脂氧合酶氨基酸保守区设计1对简并引物,采用RT-PCR克隆到1段长827 bp的序列,经Blast比对和DNAstar软件聚类分析,结果表明由该序列推导出的氨基酸序列含有脂氧合酶氨基酸保守结构域,与马铃薯脂氧合酶基因的氨基酸序列相似性达到77.5%,判断其为砂梨脂氧合酶基因片段,命名为LOX1,并将序列登录到GenBank,登录号为EF215448。根据RNAi载体的构建原则,选择LOX1一开放阅读框设计携带酶切位点的特异引物,通过PCR扩增正、反向基因片段,再与YYT间隔区串连,插入植物表达载体pYF7713中的相应位置,成功地构建了干扰LOX基因表达的RNAi的植物双元表达载体pYL028,为深入研究该基因在砂梨果实成熟过程中的功能及耐贮藏基因工程育种奠定了基础。

摘要：[目的]克隆小白杏(Prunus armeniaca)PaLOX基因全长并对其进行序列分析。[方法]根据已有的ESTs序列,设计3'和5'端RACE引物,利用RT-PCR和RACE技术克隆小白杏PaLOX基因c DNA全长。[结果]PaLOX c DNA全长序列为2 723 bp,含有一个1 002 bp的ORF开放阅读框,编码334个氨基酸,含有PLAT高度保守的特异结构域,预测蛋白质的相对分子质量为26.558 1 k Da,推测理化等电点为8.77,分子式为C1689H2635N459O490S13;该蛋白主要表现为亲水性,α-螺旋和延伸链则散布于整个蛋白质中,空间结构不稳定,无信号肽和跨膜结构,可能存在于线粒体中。进化分析表明,PaLOX氨基酸序列与梅、碧桃、苹果、梨、草莓等蔷薇科聚为一类,相似性依次为98%、99%、78%、77%、63%。[结论]获得了编码小白杏脂氧合酶的基因PaLOX全长序列,登录号为KM067451。

摘要：依据丹参转录组数据库得到的脂氧合酶基因序列设计特异性引物,采用RT-PCR方法从丹参分离得到一个新的LOX基因,命名为SmLOX(GenBank注册号为JX297420)。该基因cDNA全长2607bp,包含一个长为2571bp的开放阅读框,编码856个氨基酸。序列分析表明,SmLOX编码的多肽具有LOX的序列保守元件,与猕猴桃LOX2编码蛋白高度同源,同源性达到71%。系统进化树分析表明,SmLOX与双子叶植物的LOX亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果表明,SmLOX基因在丹参不同组织器官中差异表达,其中叶中的表达量最高,并且其表达受茉莉酸甲酯和损伤处理的诱导,显示SmLOX基因可能在植物防御反应中发挥作用。

摘要：磷酸酯酶(phosphatases)如紫色酸性磷酸酯酶(purpleacidphosphatase,PAP)、碱性磷酸酯酶(alkalinephosphatase,AP)和各种磷脂酶(phospholipases,PL),氧合酶和氧化酶(oxygenasesandoxidases)如脂氧合酶(lipoxygenase)、多酚氧化酶(polyphenoloxidases),及抗氧化酶,如:超氧化歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、过氧化物酶(peroxidase,POD)等是植物防卫系统涉及的重要金属酶(metalloenzymes)和金属激活酶.根据金属酶活性部位结构设计、创制的拟酶化合物含植物必需的微量元素和富咪唑氮的配体,具有抗逆境胁迫(如干旱、寒冷、水渍、盐渍、高温等)和抗病原微生物(如真菌、细菌、病毒等)侵染,及抗早衰能力,提高作物产量5.1%～49.41%.这种仿生配合物性质稳定,抗性广谱,防、治作用兼备;安全、低毒(半数致死量LD50≥600～5000mg/kg);分子量小,膜透性好;高效(使用浓度4～20mg·L-1,用量小,每公顷全生长期仅用3～15g);因系化学仿生化合物,可进行规模化生产.最近,首次证明一种含铜模型化合物[Cu(EDTB)](NO3)2·EtOH和水稻稻瘟病、纹枯病病原体诱导产生的植物抗毒素(Phytoalexin,PA)一样,诱导磷脂水解产生不饱和脂肪酸及其氧化次级产物,这或许是含铜模型化合物能抗病的原因.植物免疫反应涉?

摘要：为了研究薄皮甜瓜在不同温度贮藏条件下风味品质的变化,以薄皮甜瓜红到边为试验材料,分别设置15℃和10℃两个低温处理,以25℃为对照,测定果实果肉颜色、果实硬度、可溶性固形物(SSC)、维生素C(Vc)含量、可溶性糖含量及蔗糖代谢相关酶活性、香气物质含量及香气合成途径主要酶活性。结果表明:15℃和10℃两个低温条件下均有利于维持果肉颜色,减缓果实硬度下降,可增加果实Vc含量和可溶性总糖含量,且两个低温处理条件下甜瓜果实香气物质含量高于对照,其中15℃下香气物质含量在低温贮藏前期含量较高,在货架期第2天时10℃低温较高,低温贮藏后提高蔗糖合成酶(SS)和蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性,是影响甜瓜果实蔗糖含量变化的主要因素,与挥发性物质合成有关的脂氧合酶(LOX)和乙醇脱氢酶(ADH)活性低温处理后低于对照,而醇酰基转移酶活性(AAT)高于对照。与常温对照相比,15℃和10℃两个低温贮藏条件均有利于甜瓜果实贮藏,其中10℃条件下果实品质综合指标贮藏效果较好,根据果实首次出现冷害时间建议贮藏时间不宜超过5 d,15℃条件下可贮藏至7 d。

摘要：采用本校设计的电热式温湿度自控烤烟箱，研究了烟叶在烘烤过程中脂氧合酶活性变化及其对C12～C20脂肪酸、叶绿素和类胡萝卜素、醚提物等降解的影响。结果表明，随着烘烤进程发展，脂氧合酶活性逐渐升高，在48h出现一个活性高峰，而后逐渐降低，直到完全消失。不饱和高级脂肪酸、叶绿素、类胡萝卜素等的降解与脂氧合酶活性变化呈显著相关，饱和脂肪酸的降解与脂氧合酶有一定相关性。在调制过程中，48～72h仍为一关键时期，时间跨度过大，难以说明48h活性达最高峰。

摘要：目的 5-脂肪氧合酶(5-LO)是炎性介质白三烯合成过程中的限速酶,本研究克隆大鼠5-LO cDNA编码区,旨在为利用大鼠5-LO分析白三烯在血管壁炎症中的作用做准备。方法从SD大鼠胚肝中提取mRNA并逆转录成cDNA,找出5-LO cDNA中独特的内切酶位点,再设计2对引物,扩出都含此酶切位点的5-LO cDNA片段。用高保真酶分段扩增出2个5-LO cDNA片段,再正确拼接,克隆成功后酶切鉴定并测序。将获取的cDNA序列与NCBI和Ensembl数据库比较序列的差异。结果用Oligo(dT)和随机引物从SD大鼠胚肝总mRNA中逆转录cDNA。以5-LO cDNA独特的PmlⅠ内切酶位点为分界点,扩增出5′端1339bp和3′端790bp的5-LO cDNA片段,将2个片段正确地拼接在pBluescriptⅡSK(+)中。经EcoRⅠ和XhoⅠ酶切和测序显示,重组质粒中包含有5-LO cDNA编码区全长2025bp,它与Ensembl数据库中的序列完全一致,但与NCBI数据库中的序列有较大的差异。结论用分段扩增法从SD大鼠胚肝中成功克隆出全长5-LO cDNA编码区,并证实了其序列的正确性。