摘要：目的探讨低氧预处理人牙髓干细胞移植(H-hDPSCs)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑白质损伤及内源性神经干细胞的影响。方法将健康7 d龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分为假手术组、HIBD组、常氧培养hDPSC移植组(N-hDPSCs组)及低氧预处理hDPSC移植组(H-hDPSCs组),每组11只。采用经典的Rice-Vannucci法复制HIBD模型。模型复制后7 d采用增殖细胞核抗原(PCNA)/巢蛋白(Nestin)免疫荧光双标法检测大鼠侧脑室室管膜下区内源性神经干细胞(NSCs)的增殖;模型复制后3周,滑竿实验、Y迷宫实验及模型复制后4周Morris水迷宫实验检测大鼠的运动及空间记忆能力;行为学实验后采用神经元特异性核蛋白(NeuN)免疫荧光法检测大鼠脑组织皮层和海马CA1区神经元的表达;采用髓鞘碱性蛋白(MBP)及神经纤维丝蛋白重链(NF200)免疫荧光双标法检测纹状体及胼胝体区髓鞘及神经纤维的表达。结果HIBD组模型复制后7 d的侧脑室室管膜下区增殖NSCs数较假手术组少(P<0.05),N-hDPSCs组、H-hDPSCs组较HIBD组多,但较假手术组少(P<0.05),N-hDPSCs组较H-hDPSCs组少(P<0.05)。N-hDPSCs组、H-hDPSCs组模型复制后3周爬杆时间较假手术组长(P<0.05),但较HIBD组短(P<0.05),H-hDPSCs组较N-hDPSCs组短(P<0.05)。HIBD组新异臂停留时间较假手术组短(P<0.05),N-hDPSCs组、H-hDPSCs组较HIBD组长(P<0.05),但较假手术组短(P<0.05),而N-hDPSCs组较H-hDPSCs组短(P<0.05)。各组大鼠第1天、第2天、第3天、第4天逃避潜伏期比较,经重复测量设计的方差分析,结果:(1)不同时间点逃避潜伏期有差异(F=662.825,P=0.000);(2)各组逃避潜伏期有差异(F=109.286,P=0.000),N-hDPSCs组、H-hDPSCs组大鼠较假手术组长(P<0.05),但均较HIBD组短(P<0.05),H-hDPSCs组较N-hDPSCs组短(P<0.05);(3)各组逃避潜伏期变化趋势有差异(F=20.543,P=0.000)。N-hDPSCs组、H-hDPSCs组大鼠在第5天的空间探索实验中穿台次数较假手术组少(P<0.05),但较HIBD组多(P<0.05),H-hDPSCs组较N-hDPSCs组多(P<0.05)。N-hDPSCs组、H-hDPSCs组大鼠在目标象逗留时间百分比较假手术组小(P<0.05),但较HIBD组多(P<0.05),H-hDPSCs组较N-hDPSCs组多(P<0.05)。NhDPSCs组、H-hDPSCs组NeuN阳性细胞数较HIBD组多(P<0.05),但较假手术组少(P<0.05),N-hDPSCs组较H-hDPSCs组少(P<0.05)。N-hDPSCs组、H-hDPSCs组纹状体、胼胝体区MBP、NF200蛋白平均荧光强度高于HIBD组(P<0.05),但低于假手术组(P<0.05),H-hDPSCs组高于N-hDPSCs组(P<0.05)。结论HhDPSCs与N-hDPSCs移植可有效改善HIBD新生大鼠远期行为学,并促进HIBD新生大鼠内源性NSCs的增殖,减轻脑白质损伤进而促进HIBD神经修复,且H-hDPSCs移植的疗效优于N-hDPSCs。

摘要：【目的】探讨早产儿脑白质损伤(WMD)的围产期高危因素及血细胞参数的相关性,为早期发现并规避早产儿WMD的发生提供科学依据。【方法】采用回顾性病例对照研究设计,收集南方医科大学附属深圳市妇幼保健院新生儿科2018年1月1日至2020年12月31日经核磁共振检查诊断为WMD的早产儿85例为病例组,并以胎龄为匹配条件选取同期115例经核磁共振检查未诊断WMD患者作为对照组。采用SPSS22.0统计学软件进行围产期相关因素的单因素分析、血细胞参数单因素分析、构建多因素Logistic回归模型分析WMD的相关因素,并对其中有意义的连续性变量进行接受者操作特性曲线分析,以获得WMD危险因素截断值,最后进行有序Logistic回归分析WMD严重程度的影响因素。【结果】①围产期相关因素单因素分析显示,两组在孕期贫血率、产前足疗程激素使用率、早发败血症发生率、机械通气(≥7 d)比例、低血压发生率、早产儿脑室周围-脑室内出血(PIVH)Ⅲ-Ⅳ级及有血流动力学意义的动脉导管未闭(hsPDA)发生率之间的差异均有统计学意义(均P<0.05)。②生后第1周的两组血细胞参数单因素分析显示,两组在生后第1周的白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEUT)、单核细胞(MONO)、平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、血小板(PLT)、血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)之间的差异均有统计学意义(均P<0.05)。③Logistic回归模型显示,机械通气(≥7 d)是WMD发生的独立危险因素,而生后1周内较高的MCH和PLT以及产前足疗程激素治疗是WMD发生的保护因素。④MCH诊断WMD的AUC为0.708,95%CI为(0.595,0.820),截断值为37.10 pg。PLT诊断WMD的AUC为0.669,95%CI为(0.551,0.787),截断值为227.50×10^(9)/L。⑤有序Logistic回归分析,结果显示:早发型败血症是WMD严重程度的危险因素,而胎龄和血小板分布宽度则是其保护因素及血细胞学指标。【结论】早产儿机械通气(≥7 d)、生后1周血细胞MCH和PLT减低可能是预测早产儿WMD发生的独立危险因素及相关血细胞学指标,而产前应用足疗程的糖皮质激素则是其保护因素;早发型败血症及越小的胎龄及PDW可能是WMD严重程度的危险因素。