摘要：目的探究养阴通脑颗粒主要有效成分葛根素、川芎嗪、黄芪甲苷、梓醇的正交配伍组合对SD大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用机制,并选出较优组合。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、9个不同比例正交配伍组和阳性对照组。建立大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型,以L_9(3~4)正交表设计安排成分配伍给药,动物清醒后观察大鼠神经功能缺损症状;3d后观察海马区脑组织的病理变化;TTC染色检测脑梗死体积;免疫组织化学法来评估缺血侧脑组织NLRP3蛋白表达,RT-PCR法检测海马区脑组织ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18、MMP-9 mRNA表达。采用极差分析法分析正交试验结果。结果正交配伍各组能有效改善脑缺血再灌注损伤的神经功能缺失,降低脑梗死体积,抑制NLRP3炎性体的表达,降低ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18、MMP-9基因的表达。正交试验结果分析显示,其较优组合为川芎嗪100 mg·kg^(-1)、葛根素20 mg·kg^(-1)、黄芪甲苷80 mg·kg^(-1)、梓醇20 mg·kg^(-1)。结论养阴通脑颗粒主要有效成分配伍对脑缺血再灌注损伤大鼠有明显的保护作用,其作用机制可能与抑制NLRP3炎性体,下调ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18、MMP-9的表达有关。

摘要：背景:扶芳藤和银杏叶都有扩张血管等多种药理活性作用,对脑缺血急性损伤期脑组织中自由基是否有抑制作用?而这种作用将为神经保护药的研究提供依据。目的:研究扶芳藤和银杏叶对大鼠脑缺血再灌注损伤的抗氧化作用。设计:完全随机设计,对照实验研究。地点和材料:广西中医学院实验动物中心提供Wistar雄性大鼠,体质量200～250g,广西中医学院制药厂提供干燥扶芳藤茎叶和银杏叶,2001-01/08在广西中医学院进行实验。干预:实验设计者为第四、二作者。大鼠随机分为4组,第1、2组均不给药。第3组按扶芳藤40g/(kg·d),第4组按扶芳藤40g/(kg·d)和银杏叶30g/(kg·d),分别将药材水煎2次、合并药液浓缩至2×103g/L,拌入颗粒饲料喂食10d。各组大鼠均自由饮水进食。麻醉大鼠,定位后切口暴露动脉,电凝阻断椎动脉;结扎颈总动脉,15min后松开颈总动脉,造成脑完全缺血再灌注损伤模型;3h后断头取脑备用。假手术组只切开暴露,不阻断,不结扎。主要观察指标:制备脑组织匀浆,用邻苯三酚法测定超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)的活性,用硫代巴比妥酸(2-Thiobarbituricacid)法测定丙二醛的含量。结果:与对照组比较,喂食扶芳藤的大鼠SOD活力提高22.4%,丙二醛含量降低47.9%,喂食扶芳藤和银杏叶的大鼠SOD活力提高26.4%,丙二醛含?

摘要：目的探讨补体活化在大鼠急性脑缺血再灌注中的作用及人补体受体1型SCR1-3蛋白(CR1-SCR1-3)的保护作用。方法健康雄性SD大鼠75只,采用完全随机设计分组法分为假手术组(n=15)、CI/R组(n=30)及CI/R+CR1-SCR1-3组(n=30)。线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血1 h,再灌注24 h,对大鼠进行行为学检测,记录神经功能缺陷评分;TTC染色法测定脑梗死体积;制作脑匀浆测定大脑皮层髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醇(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;制备切片观察大脑皮质区补体C4b沉积及病理改变。结果缺血再灌注24 h后,CR1-SCR1-3蛋白可明显改善CI/R+CR1-SCR1-3组大鼠神经功能(P<0.05);脑梗死体积亦明显减少(P<0.01);与CI/R组比较,CI/R+CR1-SCR1-3组MPO活力、MDA含量显著降低(P<0.01),而SOD活性显著增高(P<0.01);缺血脑组织皮质区原位补体C4b沉积显著减少(P<0.01),病理损伤亦明显减轻。结论补体活化参与了脑缺血再灌注损伤过程,CR1-SCR1-3蛋白对大鼠急性CI/R损伤具有保护作用。

摘要：背景:炎性细胞因子的释放、粘附分子上调导致的白细胞浸润与脑梗死灶的形成有密切关系,哪些因素对其能产生影响已得到人们的广泛关注。目的:探讨雌激素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后炎症反应的影响。设计:随机对照实验。单位:解放军南京军区南京总医院。材料:实验在解放军南京军区南京总医院神经内科和病理科完成。成年雌性SD大鼠,制作脑缺血模型时体质量控制在280～350g。方法:大鼠分3组:对照组、卵巢切除组、雌激素治疗组(雌二醇,200μg/kg,皮下注射,每周1次,共4周)。4周后线栓法建立右侧大脑中动脉闭塞1h、2h再灌注0、1、3、6、22、70h模型。在苏木精-伊红染色缺血半球选取10个高倍视野计算脑组织内浸润的中性粒细胞均数,免疫组化检测核因子κB表达。主要观察指标:脑实质内中性粒细胞浸润程度和核因子κB表达水平。结果:①核因子-κB表达:卵巢切除组缺血1h即有表达,对照组及雌激素治疗组在缺血2h才有阳性细胞,3组均在缺血2h再灌注3h时相表达最强,后逐渐降低,卵巢切除组在再灌注70h仍有少量表达,对照组及雌激素治疗组再灌注22h后未见核因子κB阳性细胞。②在缺血2h再灌注22h时,卵巢切除组动物脑缺血区中性粒细胞浸润数量明显增多,与雌激素治疗组相比,差异有显著性差异(P=0.045)熏在缺血2h再灌注70h时,卵巢切除组仍多于对照组和雌激素治疗组,但仅和对照组的差异有显著性意义。结论:雌激素能抑制脑缺血再灌注损伤后炎症反应。

摘要：背景:目前,有很多关于预处理诱导脑缺血耐受及其可能机制的报道,如脑缺血预处理、吸氧、针灸、异氟醚预处理等,国外一些研究也已证实肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)能诱导脑缺血,但机制尚未阐明。迄今,大鼠脑缺血再灌注损伤中TNF-α预处理的影响作用及其机制尚不十分清楚。目的:探讨TNF-α预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及可能机制。设计:完全随机设计,对照实验研究。地点和材料:实验地点为哈尔滨医科大学附属二院动物实验中心。材料:健康雄性Wistar大鼠60只,体质量200～300g,完全随机分为TNF-α0.05μg组、0.5μg组、1.0μg组及对照组,每组15只大鼠。实验动物由哈尔滨医科大学附属二院动物实验中心提供,显微器械、25μL微量进样器及微动脉夹均购自上海仪欣医疗器械公司,日本产钓鱼线(直径0.17mm),恒温箱,数码相机,北航图像分析系统,PBS液,重组大鼠肿瘤坏死因子-α(购自美国Sigma公司),CD54,GFAP试剂盒、相应二抗及DAB染色试剂盒皆购自武汉博士德生物工程有限公司,10g/L四氮唑红(TTC)及实验室常规使用材料等。干预:采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型(阻断大鼠大脑中动脉血流),并予以改良。在脑缺血前48h,给大鼠小脑延髓池内注射不同剂量的TNF-α(0.05μg,0.5μg,1.0μg)

摘要：目的:筛选黄芪注射液联合灯盏细辛注射液抗大鼠脑缺血再灌注损伤的最佳配比。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和给药组[采用基线等比增减设计法设置黄芪注射液-灯盏细辛注射液不同剂量配比组,分别为A(0∶10)、B(2∶8)、C(4∶6)、D(6∶4)、E(8∶2)、F(10∶0)组],每组8只。除假手术组外,其余各组大鼠均采用改良线栓法复制大脑中动脉闭塞再灌注损伤模型。各给药组大鼠于模型复制后即时腹腔注射相应药物1次,24h后再同法给药1次(两种注射剂的给药间隔为30min);假手术组和模型组大鼠均腹腔注射等体积生理盐水。再灌注48h后,采用Longa评分法评价各组大鼠的神经功能缺损情况,记录神经功能损伤评分;采用比色法检测其血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用TTC法检测其脑梗死情况,计算脑梗死率。采用金氏公式计算各给药组大鼠的增效指数(q)。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分和血清MDA含量均显著升高,血清SOD活性显著降低(P<0.01);脑梗死区域明显增大,其脑梗死率显著升高(P<0.01)。与模型组比较,A、B、C、D、E组大鼠神经功能缺损评分和血清MDA含量均显著降低,且C组神经功能缺损评分显著低于A、F组,B、C、D、E组血清MDA含量均显著低于F组(P<0.05或P<0.01);A、B、C、D、E组大鼠血清SOD活性均显著增强,且C组显著高于F组(P<0.05或P<0.01);各给药组大鼠脑梗死区域均有不同程度的缩小,B、C、D、E组大鼠脑梗死率均显著降低,且C、D组显著低于F组,C组显著低于A组(P<0.05或P<0.01)。B、C、D、E组大鼠的q值分别为0.90、1.30、1.00、0.70(神经功能缺损评分)和0.79、1.27、0.98、0.82(脑梗死率)。结论:以不同比例配伍的黄芪注射液和灯盏细辛注射液均对脑缺血再灌注损伤模型大鼠具有一定的保护作用,可缓解其神经功能缺损,减轻其氧化应激,并缩小其脑梗死区域;两药联用的效果优于单用,且其最佳配比为4∶6。

摘要：目的:研究薯蓣皂苷与冰片配伍对小鼠脑缺血再灌注的保护作用。方法:将100只小鼠分为假手术组、模型对照组、阳性对照组及处方1、2、3、4、5、6组。各组在给药后进行造模,采用小鼠双侧颈总动脉夹闭缺血再灌注模型,按照基线等比增减设计方法,考察薯蓣皂苷与冰片配伍对缺血再灌注后对脑组织含水量,脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的影响。结果:薯蓣皂苷与冰片配伍能显著降低缺血再灌注后脑含水量,提高脑内SOD的活力,降低MDA的含量。结论:薯蓣皂苷与冰片配伍对小鼠脑缺血再灌注有一定的保护作用。

摘要：针刺通过干预丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路表达治疗脑缺血再灌注损伤机制的相关研究已逐渐开展并初见成效,但仍然存在一些亟待解决的问题,主要表现在:1各研究的造模方式不一,术后评价标准有待进一步考量;2治疗组一般为电针或头针,干预方法较为单调,且取穴、电针参数、观察时间参差不齐,没有统一的标准,具有一定的随意性;3各个研究中观察指标定性定量的检测方法不尽相同,横向可比性不大,而且采用的检测方法也比较传统,今后的实验可以适当创新性采纳先进的技术及设备;4现阶段实验研究对象较局限,绝大部分为各类大鼠,是否能与人体临床实际相一致也有待于将来大量的研究来印证;5现阶段的研究多是针对某单一的MAPK信号通路的家族成员进行观察,而众所周知MAPK家族相当庞大,并且仍然不断有新成员加入,加之生物体内的各种生化反应更是复杂繁琐,将来进一步的实验研究在设计时或许可以考虑同时观察两条、三条甚至更多,以便了解其之间的相互关系,也许针刺正是通过调整各通路之间的动态平衡而发挥对脑缺血再灌注损伤的治疗作用;6当前对于针刺通过干预MAPK信号通路表达治疗脑缺血再灌注损伤机制的相关研究仍然较多地停留在简单的验证及合理的推测上,尤其是对于研究相对较多的细胞外信号调节蛋白激酶信号通路(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路的作用至今仍然存在很大争议,这无疑给后续的研究埋下了路障。所以,在该研究领域一些根源性问题上达到共识的要求迫在眉睫,而怎样设计实验建立权威以及更深层次地阐明该机制是对我们提出的一项严峻而意义重大的挑战。

摘要：目的观察促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑红蛋白(Neuroglobin,Ngb)表达的影响。方法选用60只健康雄性SD大鼠为研究对象,制备缺血再灌注损伤模型。采用随机区组设计将大鼠分为非治疗组(N-T组30只)、EPO治疗组(T组30只)。其中治疗组再按EPO不同剂量分为三个亚组(EPO1组、EPO2组、EPO3组)。EPO治疗组缺血再灌注损伤2h后分别注射EPO1000u/Kg,3000u/Kg以及5000u/Kg,24h后所有受试对象均处死取脑。应用免疫组织化学技术检测脑缺血再灌注后Ngb的表达情况。结果EPO治疗组Ngb表达明显高于非治疗组,差异具有统计学意义(t=112.205,P=0.000);EPO治疗组不同亚组之间随着EPO剂量的增大,Ngb的表达呈递增趋势,三组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05),且与EPO治疗剂量呈正相关(rs=0.872,P=0.000)。结论大鼠脑缺血再灌注损伤后采用EPO治疗能促进Ngb的表达。

摘要：目的:探讨脑缺血再灌注损伤模型大鼠外周血清蛋白表达的变化及针刺百会、足三里穴的干预作用。方法:以大脑中动脉线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,采用随机区组设计将大鼠分为模型组、假手术组和针刺组3个大组,每大组再按照再灌注后时间分成12 h、24 h、48 h、72 h、96 h和144 h等6个亚组;每个亚组有大鼠7只;另设正常对照组7只。应用SELD I-TOF-MS检测各组大鼠外周血清蛋白表达的差异。结果:模型组与正常对照组比较,有150个差异蛋白峰(P<0.05);针刺组与模型组结果比较,有89个差异蛋白峰出现显著性变化,包括正向峰32个和负向峰57个;模型组血清蛋白峰值的分布呈双峰型,针刺干预使第一峰峰值降低,第二峰峰值时间前移。结论:针刺百会和足三里穴能够通过影响脑缺血再灌注损伤大鼠外周血清蛋白的表达,干预缺血再灌注模型大鼠的病理生理过程。