摘要：目的探讨脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)参与肝癌发生发展的驱动作用及机制。方法通过使用Oncomine数据库进行数据挖掘分析PELP1在肝癌细胞株或组织中的表达状态,Western blot予以验证。设计并合成3对siRNA沉默肝癌中PELP1的表达,采用Western blot检测转染成功与否。使用成功转染PELP1-siRNA后的细胞株HepG2进行细胞活力实验、平板克隆形成实验、细胞划痕实验、Transwell小室侵袭和迁移实验。Western blot实验检测敲除PELP1后STAT3信号通路表达水平的变化。结果PELP1在肝癌中呈现高表达,通过siRNA沉默PELP1后显著抑制了肝癌细胞的生长活力、侵袭和迁移能力,降低了其恶性程度。Western blot显示将肝癌中PELP1沉默后,降低了磷酸化STAT3的表达。结论PELP1可能参与肝癌的发生发展,具有作为肝癌治疗靶点的潜在价值,参与调控STAT3的激活,从而促进肝癌细胞的生长。

摘要：目的建立针对PELP1基因启动子区CpG岛的甲基化特异性PCR(Methylation specific PCR,MSP)检测方法,分析乳腺癌细胞中PELP1基因表达与启动区CpG岛甲基化的相关性。方法设计针对PELP1基因启动子区的MSP引物组,以甲基化和非甲基化DNA为模板验证MSP引物的特异性,建立针对PELP1基因启动子区的MSP检测方法。以DNA甲基转移酶抑制剂5'-氮杂-脱氧胞苷磷酸(5'-Aza-d C)分别处理MCF-7乳腺癌细胞、MCF-10正常乳腺导管上皮细胞,采用MSP检测PELP1基因启动子区甲基化状态变化,采用Western blot检测蛋白表达。结果针对PELP1基因启动子区设计的MSP引物组特异性良好,甲基化特异性引物仅在甲基化DNA模板获得阳性扩增条带,非甲基化引物仅在非甲基化DNA模板获得阳性条带。MCF-7乳腺癌细胞中PELP1基因启动子区呈非甲基化状态,MCF-10正常乳腺导管上皮细胞中PELP1基因启动子区呈甲基化状态,MCF-10细胞中PELP1蛋白表达水平为MCF-7细胞的1/16(P<0.05)。采用5'-Aza-dC去除MCF-10细胞PELP1基因启动子区甲基化后,PELP1蛋白表达水平上升了9.7倍(P<0.05)。结论所建立的PELP1基因启动子区MSP检测方法特异性良好,去甲基化可能是导致乳腺癌细胞中PELP1基因过表达的重要机制。