摘要：目的 观察丙氨酸-乙醛酸转氨酶2类似物1(AGXT2L1)对肝癌细胞增殖、凋亡和周期的调控作用。方法 实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝癌细胞株97H、HCCLM3和正常肝细胞株LO2中AGXT2L1的表达水平;设计并构建AGXT2L1的靶向siRNA,将AGXT2L1-siRNA转染97H和HCCLM3细胞株构建AGXT2L1靶向敲低组和阴性对照组,通过RT-qPCR验证敲低效果;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测各组细胞在0、12、24、48、72、96 h的增殖能力;采用流式细胞周期实验检测各组细胞在G1、S、G2期的分布情况;采用原位缺口末端标记法(TUNEL)实验检测各组细胞的凋亡率。结果 AGXT2L1在肝癌97H和HCCLM3细胞中相对表达高于正常肝细胞LO2(1 350.04±91.36、1 710.64±92.34,t97H=25.574,P<0.01;tHCCLM3=32.068,P<0.01)。转染AGXT2L1-siRNA后,对比对照组及空白组,肝癌97H和HCCLM3细胞内AGXT2L1相对表达量明显降低(0.19±0.04比1.10±0.04,t97H=-28.722,P<0.01;0.20±0.01比0.93±0.09,tHCCLM3=-13.887,P<0.01)。CCK-8实验结果显示,敲低AGXT2L1后,97H和HCCLM3细胞的增殖率明显下降(0.71±0.01比0.95±0.12,t97H=-31.243,P<0.01;0.67±0.13比0.87±0.17,tHCCLM3=-17.083,P<0.01),差异有统计学意义。细胞周期实验结果显示,干扰AGXT2L1表达后,S期细胞比例低于对照组[(13.45±1.20)%比(18.73±0.28)%,t97H=-7.451,P<0.01;(15.26±0.52)%比(20.45±1.08)%,tHCCLM3=-7.483,P<0.01];G2期细胞比例低于对照组[(16.90±0.54)%比(19.99±0.54)%,t97H=-6.992,P<0.01;(16.23±0.28)%比(23.36±0.39)%,tHCCLM3=-25.720,P<0.01],抑制细胞从G1期向S期转变,抑制肝癌细胞增殖。细胞凋亡实验显示:干扰AGXT2L1表达后,97H和HCCLM3细胞凋亡率明显升高[(13.06±1.86)%比(1.06±0.75)%,t97H=14.673,P<0.01;(14.41±2.21)%比(0.80±0.32)%,tHCCLM3=14.947,P<0.01],差异有统计学意义。结论 敲低AGXT2L1的表达抑制肝癌97H和HCCLM3细胞株增殖,促进细胞凋亡。

摘要：目的　利用流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM)探讨反义IGF IR基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡的作用。方法　根据IGF IRcDNA序列设计其正义、反义基因片段 ,并对部分碱基进行硫代磷酸修饰。实验分为空白对照组、正义核酸组和反义核酸组 ,应用流式细胞技术检测DNA含量 ,根据DNA直方图分析凋亡细胞情况。应用透射电镜观察了凋亡细胞的形态学变化。结果　经反义寡核苷酸 5、10、15、2 0μmol·L-1处理的胶质瘤细胞其凋亡率分别为 16 0 6 %±3 86 %、2 4 5 2 %± 4 84%、36 6 9%± 5 5 3%和 43 85 %±5 72 % ,而用正义寡核苷酸 5、10、15、2 0 μmol·L-1处理的胶质瘤细胞其凋亡率分别为 3 76 %± 1 2 2 %、3 14%±1 15 %、2 5 1%± 0 93%和 3 2 6 %± 1 15 % ,空白对照组(野生型 )自然凋亡率为 1 0 1%± 0 89%。反义核酸组与对照组相比有显著性差异 (P 0 0 5 )。凋亡细胞形态上表现为细胞体积缩小 ,染色质凝聚 ,并聚集于核膜下成新月状或块状 ,胞膜内馅形成膜包裹的核碎片或细胞器 ,最后出泡形成凋亡小体。结论　反义IGF IR基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡是其抑制细胞增殖机制之一。

摘要：目的 :探讨加温联合钙剂对诱导SK H SN细胞凋亡的作用及其意义。方法 :采用 3种温度和4种浓度的外源性氯化钙 (CaCl2 )诱导SK H SN细胞凋亡。采用形态学观察、原位缺口末端标记(TUNEL)的方法检测细胞凋亡的结果 ,并用火焰原子吸收分光光度法测定细胞内钙含量 ( [Ca]i)。结果 :加温和 /或加钙均可诱导SK H SN细胞凋亡。在有外源性钙剂存在时 ,加温可明显升高 [Ca]i。同一温度下 ,各组的凋亡率 (APO % )和 [Ca]i均随外源性CaCl2 浓度的升高而升高 ;同一CaCl2 浓度下 ,APO %和 [Ca]i均随温度的升高而升高。析因设计的方差分析结果显示 ,加温和加钙在诱导细胞凋亡时有很强的协同作用 ,P <0 0 1。APO %和 [Ca]i之间呈正相关 ,r =0 983,P <0 0 1。结论 :加温和加钙在诱导SK H SN细胞凋亡方面有很强的协同作用 ,APO %和 [Ca]i呈正相关 ,通过增加 [Ca2

摘要：目的探讨反义胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)基因片段诱导胶质瘤细胞凋亡的作用及其形态学的变化。方法根据IGF-ⅠRcDNA序列设计其正义、反义基因片段,并对部分碱基进行硫代磷酸修饰。实验分为空白对照组、正义寡核苷酸组和反义寡核苷酸组,应用流式细胞仪检测DNA含量,根据DNA直方图分析凋亡细胞发生率。应用透射电镜观察凋亡细胞的形态学变化。结果经反义寡核苷酸5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L等4种浓度处理的胶质瘤细胞的凋亡率分别为(16.06±3.86)%、(24.52±4.84)%、(36.69±5.53)%和(43.85±5.72)%;而经同样浓度正义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞的凋亡率分别为(3.76±1.22)%、(3.14±1.15)%、(2.51±0.93)%和(3.26±1.15)%;空白对照组(野生型)的自然凋亡率为(1.01±0.89)%。反义寡核苷酸组与空白对照组相比差异有显著性意义(P0.05)。透射电镜观察显示,凋亡细胞表现为细胞体积缩小,染色质凝聚,并聚集于核膜下呈新月状或块状,胞膜内陷形成膜包裹的核碎片或细胞器,最后出泡形成凋亡小体。结论反义IGF-ⅠR基因片段可诱导胶质瘤细胞发生凋亡。

摘要：目的探讨动脉化疗栓塞术(TACE)对肾母细胞瘤(WT)细胞凋亡指数(AI)和细胞增殖指数(PI)的影响,并评价其在临床治疗中的地位。方法将24例肾母细胞瘤患儿按临床分期、病理分型进行配对设计研究,设动脉化疗栓塞组12例,全身化疗组12例,采用TUNEL法和免疫组织化学超敏二步法测定标本的细胞凋亡指数和细胞增殖指数。结果动脉化疗栓塞组AI高于全身化疗组(P<0.05),PI低于全身化疗组(P<0.05),AI与PI成负相关(P<0.05),动脉化疗栓塞组术后瘤体缩小,坏死程度高于全身化疗组(P<0.05),而骨髓抑制少(P<0.05)。结论与全身化疗组相对比,术前采用动脉化疗栓塞法能更有效地诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖,促使肿瘤缩小、坏死,有利于手术根治,取得更好的疗效,提高生存率。

摘要：目的观察核因子（NF）-κB／p65反义寡核苷酸（ASODN）对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法设计合成NF-κB／p65 ASODN，按照0．05、0．1、0，2、0．3、0，4、0．5μmol／L不同浓度转染胃癌SGC-7901细胞株，设正义寡核苷酸（SODN）、错义寡核苷酸（MSODN）和空白对照组进行比较。利用荧光染色观察转染效果，噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞生长抑制率（IR），流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡情况。结果与SODN、MSODN及对照组比较，ASODN组细胞增殖明显受到抑制（P〈0．05），72h IR为58.3％，且这种抑制作用呈浓度依赖性。FCM结果显示ASODN可诱导细胞的凋亡。结论NF-κB ASODN能抑制胃癌细胞生长，其机制与ASODN诱导的细胞凋亡有关，NF-κB可作为胃癌治疗的新靶点。