摘要：目的建立基于SYBR的快速检测Ureaplasma urealyticum（UU）和Ureaplasmaparvum（UP）的荧光定量检测方法。方法根据UU、UP的基因序列,设计分别针对UU、UP的特异性引物,建立了它们的荧光定量检测体系。通过Tm值和对其他病原菌的分析验证其特异性,应用于临床样品验证其实用性。结果在1×10^1～1×10^8拷贝/2μL DNA范围内拷贝数与CT值呈现良好的线性关系,检测灵敏度1×10^1～1×10^9拷贝/2μL DNA,重复3次的相关系数为0.65%～1.75%,重复性好。结论建立的荧光定量检测体系能够快速、简便地进行UU、UP的分型鉴定,具有实际应用价值。

摘要：目的建立2个快速、同步检测脲原体***和***的分子信标PCR反应体系。方法依据脲原体尿素酶B基因序列,设计分别针对***和***的特异性分子信标探针及引物,建立2个分子信标PCR反应体系。通过对脲原体标准株扩增后荧光强度的检测、分子信标S/B值测定以及进行特异性和敏感性实验,对2个体系进行评价并设定2个分子信标PCR反应体系的cutoff值。结果***和***的分子信标S/B值均>20。2个分子信标PCR体系能够检测***、***标准株DNA,与其他14株细菌(包括5株有尿素酶细菌)无交叉反应,检测限度均为10拷贝/μl的重组质粒DNA。***分子信标PCR反应体系的cutoff值为3.89,***分子信标PCR反应体系的cutoff为5.32。结论2个分子信标PCR反应体系能够快速、同步进行脲原体的分种鉴别,具有高度特异性和灵敏性。