摘要：背景:灯盏花素作为蛋白激酶C的抑制剂,具有降低脑缺血再灌注引起的神经细胞死亡作用。目的:探讨灯盏花素对缺血再灌注沙土鼠脑海马中三磷酸腺苷的含量, 以及对三磷酸腺苷酶活性的影响。设计:随机对照区组设计。单位:苏州大学附属四院麻醉科,无锡市第四人民医院麻醉科,徐州医学院附属医院麻醉科。材料:实验于2002-03／2003-05在江苏省麻醉学重点实验室完成。选取蒙古沙土鼠90只,随机分为9组:假手术组、脑缺血组、脑缺血再灌注1 h组、脑缺血再灌注12 h组、脑缺血再灌注24 h组、灯盏花素+脑缺血组、灯盏花素+脑缺血再灌注1 h组、灯盏花素+脑缺血再灌注12 h 组、灯盏花素+脑缺血再灌注24 h组,10只／组。灯盏花素注射液(云南省生物制药厂生产,批号990103,每毫升含黄酮4．5 mg)。方法:除假手术组外,其余各组均建立缺血再灌注模型。灯盏花素各组在缺血前30 min腹腔注射灯盏花素10 mL／kg,其余组同期注射等量生理盐水。每组抽取6只行三磷酸腺苷含量及三磷酸腺苷酶活性测定,其余4只进行海马CA1区神经细胞病理学检查。在缺血期间监测鼓膜温度(反映脑温),并维持鼓膜温度于(37+0．2)℃,以避免温度变化对实验结果的影响。组间比较采用单因素方差分析。主要观察指标:①各组实验鼠脑海马三磷酸腺苷含量和三磷酸腺苷酶活性的变化。②各组实验鼠脑海马CA1区神经细胞病理学变化。结果:实验纳入蒙古沙土鼠90只,全部进入结果分析。①各组海马三磷酸腺苷含量和三磷酸腺苷酶活性的变化:与脑缺血再灌注24 h组比较,灯盏花素1,12,24 h组三磷酸腺苷含量均明显提高[(0．25±0．08),(0．81 ±0．12),(0．58±0．07),(0．43±0．09)mmol／kg,P<0．01],Na+-K+ATP酶活性均明显上升[(1．23±0．43),(5．09±0.36),(3．67±0．37),(2．71±0．42)mmoL／(g·h), P<0.01],Ca2+-ATP酶活性亦明显上升[(0.58±0.35),(2.14±0.41),(1．64 ±0．39),(1．39±0．40)mmol／(g·h),P<0．01]。②各组海马CA1区神经细胞病理学变化:脑缺血后7 d,低倍镜下见:脑缺血再灌注1,12,24 h组锥体细胞带变薄、稀疏,甚至消失;而灯盏花素各组锥体细胞带明显比脑缺血再灌注各组宽厚。高倍镜下见:脑缺血再灌注1,12,24 h组锥体细胞大部凝固性坏死,核膜完整、核仁清楚的存活锥体细胞数较少;而灯盏花素各组存活锥体细胞明显多于脑缺血再灌注1,12,24 h组。结论:灯盏花素能够明显增加脑缺血再灌注后三磷酸腺苷含量,且再灌注初期升高尤为显著,同时三磷酸腺苷酶的活性亦呈相应提高趋势,具有减轻脑缺血再灌注损伤、保护神经细胞的作用。

摘要：背景:神经元异常放电的基础是细胞膜离子通道的激活与离子的跨膜运动。三磷酸腺苷敏感钾通道是将细胞电活动与代谢联系在一起的重要通道。三磷酸腺苷敏感钾通道是否参与癫痫的发病过程,马桑内酯是否具有调节三磷酸腺苷敏感钾通道的作用尚不清楚。目的:了解致痫剂马桑内酯对大鼠海马锥体神经细胞膜三磷酸腺苷敏感钾通道的影响及三磷酸腺苷敏感钾通道在癫痫发病中的作用。设计:随机对照实验。单位:四川大学华西医院神经内科和四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室。材料:实验于2000-05/12在泸州医学院完成。将Wistar乳鼠的培养的海马锥体神经元,随机分为正常对照组,四乙基胺组,二磷酸核苷组,马桑内酯组,电导与动力学组。方法:Wistar乳鼠在麻醉和无菌条件下分离出海马组织,接种、培养24h后加入10μmol/L的阿糖胞苷,选择培养7～10d、生长良好、形态典型的锥体神经元进行膜片钳试验。正常对照组加入生理盐水;四乙基胺组加入5mmol/L氯化四乙基胺;二磷酸核苷组先加入30μmoL/L的二磷酸核苷,后加入0.5mol/L的三磷酸腺苷;致痫组先加入1.0mL/L的马桑内酯,后加入1μmol/L的优降糖;对电导与动力学组,先调节钳制电压的大小,了解通道开放及通道形态,后加入马桑内酯。主要观察指标押①观察神经元三磷酸腺苷敏感钾通道的活动及形态。②观察不同钳制电压对通道活动的影响;了解二磷酸核苷、三磷酸腺苷和氯化四乙铵对通道的影响。③观察致痫剂马桑内酯对神经元细胞膜三磷酸腺苷敏感钾通道的激活作用及优降糖的影响。结果:①对称性高钾溶液条件下,通道的翻转电位接近0mV。三磷酸腺苷敏感钾通道开放随着钳制电压绝对值的增大而增多,具有电压依赖性,该通道可被氯化四乙铵阻断。②其电流-电压(I-V)曲线可被直线拟合,电导值为(78.23±12.04)pS。③30μmol/L的二磷酸核苷可使通道开放增多,0.5mol/L的三磷酸腺苷可抑制通道活动。④1.0mL/L的马桑内酯诱导通道开放数量明显增多,1μmol/L的优降糖可抑制通道活动。⑤通道开放时间,致痫神经元τ01为(1.754±0.060)ms,正常神经元为(1.733±0.046)ms,无显著性差异穴n=25,t=0.147,P>0.05雪鸦而τ02正常组为(2.441±0.265)ms,致痫组延长,为(10.446±0.579)ms穴n=25,t=0.000,P<0.01雪。结论:在马桑内酯诱导的癫痫发作中,三磷酸腺苷敏感钾通道开放的作用是降低动作电位频率、保护神经元,可能起一种负反馈调节作用。

摘要：背景:脑缺血-再灌注后能量代谢障碍和脑水肿是脑缺血-再灌注损伤重要因素之一。中药灯盏花素注射液(其有效成分为黄芩素甙)可以防止脑缺血-再灌注诱发的蛋白激酶C的激活、减轻钙超载,且可减小缺血梗死灶的体积,从而减轻脑缺血-再灌注损伤。可灯盏花素注射液对脑缺血-再灌注后能量代谢和脑水肿有何影响?目的:观察灯盏花素注射液对沙土鼠脑缺血-再灌注后能量代谢和脑水肿的影响。设计:随机对照实验。单位:济宁医学院附属医院及徐州医学院附属医院江苏省麻醉学重点实验室。材料:实验于1999-02/08在江苏省麻醉学重点实验室完成。选用雄性沙土鼠72只。方法:将实验动物随机分成3组,即假手术组、常温对照组和灯盏花素组,假手术组8只,常温对照组和灯盏花素组每组各32只。根据再灌注时间将常温对照组和灯盏花素组分4个亚组,即缺血末组、再灌注10min组、再灌注30min组和再灌注60min组。每亚组8只动物。常温对照组和灯盏花素组制备前脑缺血-再灌注损伤模型,脑缺血时间为10min。假手术组仅游离双侧颈总动脉但不予阻断。灯盏花素组于缺血前15min给予灯盏花素注射液90mg/kg腹腔注射,假手术组和常温对照组则给予等量的生理盐水。脑水的测定采用干湿重法,应用高效液相及紫外检测仪测定海马三磷酸腺苷,二磷酸腺苷,磷酸腺苷的含量。主要观察指标:①实验动物海马三磷酸腺苷、二磷酸腺苷、磷酸腺苷的含量。②实验动物脑皮质水含量。结果:纳入实验的动物为72只,均进入结果分析,无实验动物脱失。①实验动物海马三磷酸腺苷、二磷酸腺苷、磷酸腺苷的含量:常温对照组在缺血末、再灌注10min、再灌注30min、再灌注60min时,海马组织三磷酸腺苷和腺苷酸池含量明显降低,三磷酸腺苷含量分别为假手术组的68%,56%,49%和50%(P均<0.01),腺苷酸池含量为假手术组的62%,50%,51%和52%(P均<0.01)。而灯盏花素组各时间点三磷酸腺苷含量分别为假手术组的84%,69%,64%和63%,腺苷酸池含量为假手术组的86%,72%,68%和69%,均明显高于常温对照组(P均<0.05)。②实验动物脑皮质水含量:脑缺血-再灌注后常温对照组脑皮质水含量明显高于假手术组(P<0.05),并且随再灌注时间的延长逐渐加重。灯盏花素组脑皮质水含量虽明显高于假手术组,但明显低于常温对照组(P<0.05)。结论:灯盏花素可能通过抑制能量代谢障碍、减轻脑水肿而发挥脑保护作用。

摘要：目的 使用Immuknow法监测肾移植术后受者CD＋T淋巴细胞内腺苷三磷酸（ATP）水平,探讨该方法在肾移植术后感染中的诊断价值及与药物谷浓度的相关性. 方法 选取2010年5月至2011年10月收治的肾移植受者45例,男33例,女12例.年龄21～58岁,平均（39±11）岁.根据术后是否发生感染将受者分为非感染组34例和感染组11例,感染组中肺部感染5例、上呼吸道感染4例、尿路感染1例、会阴部脓肿1例.选择健康志愿者23例作为对照组,男16例,女7例.使用Immuknow法检测各组的外周血中CD：T淋巴细胞内ATP水平.采用微粒酶联免疫法和荧光偏振免疫法检测他克莫司和环孢素的药物谷浓度.采用免疫比浊法检测受者血清中超敏C-反应蛋白浓度. 结果 对照组外周血中CD＋T淋巴细胞内ATP值为（295±74）μg/L,非感染组为（335±189）μg/L,感染组为（212±155）μg/L,感染组的ATP值明显低于对照组和非感染组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.动态随访24例受者中5例发生感染,4例ATP值低于其术后随访的平均值.感染组血清C-反应蛋白浓度为（12.4±4.8） mg/L,明显高于非感染组的（3.3±4.7） mg/L和对照组的（0.5±0.5）mg/L,差异均有统计学意义（P＜0.05）.Immuknow法测得的ATP值与环孢素（r=0.07）和他克莫司（r=-0.02）的血药物谷浓度均无相关性（P＞0.05）. 结论 低ATP水平是肾移植术后感染的危险因素,使用Immuknow法监测受者的细胞免疫状态能弥补药物浓度监测的不足,指导临床调整免疫抑制剂用量.

摘要：以发展学生的生物学学科核心素养为目标对"细胞的能量‘货币’ATP"一节进行教学设计,以萤火虫尾部发光现象的探讨为主线,引导学生思考、分析、归纳和总结,让学生在学习过程中进一步形成结构与功能观、稳态与平衡观,初步形成物质和能量观;同时,在了解ATP是植物、动物、真菌和细菌等生物都有的能量"货币"后,进一步加深对生物界具有统一性的认识;在教学实践中,呼吁学生保护萤火虫生物多样性,渗透生态环保意识的教育.

摘要：本法是以载体将酵母细胞固定,利用细胞中的多种酶催化生产ATP的一项较新的技术。其反应效能高、消耗低、工艺简单。试验探索了工艺条件,正设计制造容积300L的反应器,准备进行2.5t ATP/a的中试生产。