摘要：目的了解腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)基因、C型凝集素(C-lectin)基因和丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibitor,serpin)基因在白纹伊蚊唾液腺中的表达情况。方法分别制备未吸血雌蚊唾液腺(SG组)和吸血雌蚊唾液腺(BSG组)、雌蚊躯体(无头无唾液腺,C组)和雄蚊组织(无头含唾液腺,M组)的总RNA,采用实时荧光定量RT-PCR技术,以β肌动蛋白(β-actin)基因作为内参,根据GenBank公布的ADA、C-lectin和Serpin基因序列设计特异性引物进行RT-PCR,分析以上基因在不同组织中的表达情况。结果与雌蚊躯体和雄蚊组织中相对表达量相比,ADA基因在雌蚊唾液腺中的表达分别提高了545倍和123倍(P0.05)。结论 ADA在蚊虫组织中均有表达,在雌蚊唾液腺中高表达;C-lectin和serpin基因在雌蚊唾液腺中特异高表达。

摘要：目的克隆和表达日本血吸虫(Sj)腺苷脱氨酶(ADA)编码基因,分析该基因的系统发育及预测其编码蛋白的空间结构。方法根据表达序列标签(EST)测序的结果设计引物,PCR法从含有SjADA基因的cDNA克隆中扩增得到该编码基因片段,亚克隆入原核表达载体pET32中表达,表达的融合蛋白用螯合琼脂糖凝胶FF亲和层析纯化。采用MrBayes算法构建系统发育进化树,用自动蛋白注释工具(DS GeneAtlas)软件模拟SjADA的蛋白空间结构。结果获得SjADA基因全长为1 059 bp的编码序列,并克隆、表达和纯化了重组蛋白(SjADA)。生物信息学分析显示,该基因与曼氏血吸虫的同源基因之间的序列一致性仅25%,属于不同的亚家族。其空间结构与PDB模板1A4M的一致性为41%,具有相似的二级结构和相应的活性位点残基。结论获得了SjADA重组蛋白。提示日本血吸虫嘌呤补救合成代谢途径与曼氏血吸虫有差异。

摘要：选择小鼠腺苷脱氨酶ｍＲＮＡ做为靶ＲＮＡ系统，采用计算机辅助设计，人工设计了能特异性定点切割小鼠腺苷脱氨酶ｍＲＮＡＲｉｂｏｚｙｍｅ，命名为ＲＤＡＲｂ２６２，ＡＤＡＲｂ４５５，ＡＤＡＲｂ５８３和ＡＤＡＲｂ８６２，它们分别切割靶ＲＮＡ上不同切点。通过计算机基因库检索，在已知上鼠基因中，无其它基因ｍＲＮＡ含有靶ＲＮＡ切点两翼碱基序列的同源序列。经人工合成和仁外转录得到了Ｒｉｂｏｚｙｍｅ分子和靶ＲＮＡ分子。

摘要：设计了一段羧基荧光素(FAM)标记的适配体,该适配体能与腺苷进行高亲和力和强特异性的结合,而不与肌苷发生作用。腺苷脱氨酶可以与腺苷发生脱氨反应,生成肌苷。基于上述原理,构建了碳纳米颗粒-适配体-腺苷荧光适配体传感器用于腺苷脱氨酶的检测。当体系中没有腺苷脱氨酶时,FAM标记的适配体与腺苷紧密结合,而不能被碳纳米颗粒吸附,体系荧光较强;当体系中存在腺苷脱氨酶时,腺苷变成肌苷,肌苷不与适配体结合,此时FAM标记的适配体被碳纳米颗粒吸附,FAM荧光淬灭,体系具有较低的荧光强度。该方法简单、灵敏,线性范围为0.25~3.125 U/mL,检出限为0.18 U/mL。与其它蛋白分子相比,方法对腺苷脱氨酶的检测具有高特异性。构建的传感器简单,再生性好,可用于标准加入法检测小鼠血清中的腺苷脱氨酶。

摘要：目的在全自动生化仪上建立双试剂测定腺苷脱氨酶(ADA)活性的方法。方法在全自动生化仪上编写测定程序,孵育时间240s,读空白时间60s,延迟时间30s,连续监测时间120s,主波长340nm,副波长410nm。结果本法试剂稳定,精密度良好,批内CV3.1%,批间CV3.9%,线性范围200U/L,参考范围4～25U/L。结论双试剂全自动分析腺苷脱氨酶,方法设计符合全自动分析条件,精密度高,结果准确。

摘要：目的 :设计一种用于检测腺苷脱氨酶微量 (ADA)的微量检测方法。方法 :通过对实验方法的改进 ,利用酶标仪进行比色。结果 :将微量法所得结果 (大于 5 0 U/L 的标本需稀释后重新测定 )与常规的比色法进行配对比较下 ,两方法无显著性差异 ,t=1.5 1,0 .10 <P<0 .2 0。结论 :在常规工作中可用微量法替代氨试剂比色法 ,若遇到大于 5 0 U/L的标本 。

摘要：目的 :在全自动生化仪上建立三试剂测定腺苷脱氨酶 (ADA)活性的方法。方法 :在全自动生化仪上 ,依次加入第 1和第 2试剂 ,预孵育 2 40 s,连续读取空白 6 0 s,在第 32 0秒加入样品 ,在第 6 2 0秒加入腺苷基质液 ,延迟 30 s后用 34 0 nm和 410 nm波长连续监测 12 0 s。结果 :本法试剂稳定 ,可消除氨离子的干扰 ,精密度良好 ,批内 CV2 .2 % ,批间 CV4.1% ,所测酶活性线性范围达 16 0 U/ L,参考值范围 (x± 2 s) :8～ 2 6 U/ L (37o C)。结论 :三试剂全自动分析 ADA,方法设计合理 ,符合自动化分析条件 ,精密度高 ,结果准确 ,可推广应用。

摘要：腺苷脱氨酶（adenosine deaminase,ADA）在体内主要催化腺苷和脱氧腺苷脱氨生成次黄嘌呤核苷和氨,参与体内腺苷酸的分解代谢。ADA广泛分布于全身各组织,外周血中以淋巴细胞和单核细胞活性最强。

摘要：目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者血清胆碱酯酶(CHE)、腺苷脱氨酶(ADA)和总胆汁酸(TBA)水平变化及意义。方法采用OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪检测28例ICP患者(试验组)和31例健康孕妇(正常组)血清标本中CHE和ADA活性以及TBA水平,检测肝功能相关的血清学指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT)和总胆红素(TBIL)的水平,对检测结果进行比较分析。所有统计分析由SPSS 19.0统计软件完成,组间比较采用完全随机设计的t检验或者完全随机设计的方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果试验组孕早期患者血清CHE水平为(2 789±621)U/L,低于正常组,ADA和TBA水平分别为(26.1±5.2)U/L和(12.3±3.8)μmol/L,均高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);孕中期患者血清CHE水平为(2 341±967)U/L,低于正常组,ADA、TBA、GGT和TBIL水平分别为(30.5±9.4)U/L、(15.6±8.7)μmol/L、(49.6±16.4)U/L和(30.2±8.6)μmol/L,均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);孕晚期患者血清CHE水平为(1 658±1480)U/L,低于正常组,TBA、GGT、ADA、ALT和TBIL分别为(38.5±14.8)U/L、(23.5±14.9)μmol/L、(65.3±32.5)U/L、(72.3±24.7)U/L和(42.1±15.9)μmol/L,均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清CHE、ADA和TBA联合检测可作为孕产妇筛查ICP的常规检测项目,是评估ICP孕妇、胎儿宫内情况以及胆汁淤积程度等方面较为敏感检测指标。

摘要：目的:改进了测定体液中腺苷脱氨酶活性的催化光度测定法.方法:利用Berthelot显色反应,通过测定单位时间内释放出来的NH3量来推算ADA的活性,并通过正交设计与单因素试验相结合优化测定条件,得到最佳测定方法.结果:批内和批间相对标准偏差范围分别为 1.16%～2.17%,2.49%～3.25%.与文献方法对比,试剂用量减少一半,反应时间缩短 40 min.结论:本试验操作快速简便,灵敏度高,重复性好,用于测定ADA活性较低的体液也能获得满意结果.可在临床推广应用.