摘要：目的①探讨红松松塔水溶性物质提取的最佳工艺;②探讨红松松塔水溶性物质对小鼠自然杀伤细胞(natural killing cells)活性的影响。方法①采用L9(34)正交实验设计法,以质量提取率为指标,优选红松松塔水溶性成分提取的最佳工艺;②用体外和体内给药的方式,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法考察红松松塔水溶性成分对小鼠自然杀伤细胞活性的影响。结果①提取的最佳工艺为:红松松塔的粉碎粒度为20目,提取时间为1h,提取次数为1次,料液比为1∶8;②红松松塔提取物经大孔吸附树脂分离后,经体内外实验研究发现:在体外实验中红松松塔水提物(包括总提物、水洗脱物和乙醇洗脱物)能提高小鼠自然杀伤细胞的活性;在体内实验中,红松松塔总提物和乙醇洗脱物均能明显提高小鼠自然杀伤细胞的活性,而水洗脱物没有此效果。结论红松松塔水溶性物质能够增强机体的自然杀伤细胞活性,即是能够增强机体的固有免疫力。

摘要：目的观察补肾方治疗肝肾阴虚兼湿热未尽型慢性乙型肝炎的免疫调控作用机制。方法收集HBV DNA阳性、ALT异常的肝肾阴虚兼湿热未尽型慢性乙型肝炎患者35例,其中治疗组22例给予补肾方治疗,对照组13例给予α-2b干扰素,疗程6个月,分别于用药前后检测患者谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)和HBV DNA水平,用流式细胞法检测外周血自然杀伤细胞(NK)的免疫效应分子穿孔素(PF)、颗粒酶B(GrB)、颗粒溶素(GNLY)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达情况。结果两组治疗后ALT及AST均低于治疗前(P<0.05,P<0.01),治疗后组间比较差异无统计学意义。两组治疗后中医证候总积分都明显下降(P<0.01);治疗后治疗组总积分明显低于对照组(P<0.05)。治疗组治疗后的中医证候疗效总有效率明显高于对照组(P<0.05)。治疗组治疗后PF(%)34.86±31.60和GNLY(%)25.72±24.98均低于治疗前69.62±27.58,64.54±25.96(P<0.05),与对照组治疗后比较差异无统计学意义。结论补肾方治疗肝肾阴虚兼湿热未尽型慢性乙型肝炎的免疫调控作用机制在于降低NK细胞的相关免疫效应分子的表达,促进受损肝脏的痊愈。

摘要：自然杀伤细胞（NK）是细胞免疫的非特异成分，不需抗原刺激、致敏，不需抗体、补体介导即能杀伤某些肿瘤细胞，不受组织相容性复合物（MHC）限制，发挥作用早于T淋巴细胞，处于机体抗肿瘤的第一道防线。经白细胞介素-2激活的NK细胞抗瘤谱扩大，细胞毒性增强，对大部分肿瘤细胞有杀伤作用，可以用来净化自体骨髓、清除微小残留病变。激活的NK细胞还可以促进骨髓的植入而不增加移植物抗宿主病（GVHD）的发生。为了解癌症患者在造血干细胞动员过程中，NK细胞数量和活性有什么样的变化规律，我们设计进行了该项研究，以期为开发利用NK细胞打下基础。

摘要：目的:探讨过表达B7同源物6(B7-H6)在自然杀伤(NK)细胞介导的肝细胞凋亡中的作用。方法:设计针对B7-H6全长的寡核苷酸引物,经PCR扩增调取B7-H6全长,并将其亚克隆入线性化的真核表达载体p IRES2-EGFP,构建重组B7-H6过表达载体p IRES2-EGFP-B7-H6,通过双酶切、PCR及测序进行鉴定。利用脂质体将p IRES2-EGFP-B7-H6重组质粒转染正常肝细胞系L02,采用荧光显微镜观察EGFP的表达,流式细胞技术检测转染效率,qRT-PCR和Western blot检测B7-H6 mRNA和蛋白的表达水平。将转染p IRES2-EGFP-B7-H6重组质粒的L02细胞与NK-92细胞以不同的效靶比共培养,利用CCK-8实验分析检测NK-92细胞对L02细胞的杀伤效应。结果:经PCR、酶切及测序等方法证实成功构建p IRES2-EGFP-B7-H6过表达载体;经脂质体转染L02细胞48 h后,在荧光显微镜下观察到较强绿色荧光表达,流式检测显示转染效率达到92.6%;qRT-PCR和Western blot结果显示L02细胞B7-H6的mRNA和蛋白高表达;CCK-8实验证实相对于转染空载体p IRES2-EGFP,NK-92细胞对转染了p IRES2-EGFP-B7-H6的L02细胞的杀伤活性显著增强(P<0.05)。结论:成功构建过表达B7-H6的真核表达载体p IRES2-EGFP-B7-H6,并进一步证实NK-92细胞对过表达B7-H6的L02细胞具有显著的杀伤效应。

摘要：背景:由于细胞因子诱导杀伤细胞、自然杀伤细胞上表达的CD16和CD11a均与其介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用和直接接触杀伤的抗肿瘤效应密切相关,因此了解两种细胞扩增过程中这两种分子表达的强弱,对根据免疫效应细胞的最终用途决定两种细胞的最佳收获时机具有重要意义。目的:了解细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞在培养过程中的CD16和CD11a表达的变化规律。设计、时间及地点:细胞移植免疫学动态观察,于2006-09/2008-03在中山大学附属第二医院完成。材料:脐血来自本院健康足月妊娠产妇。方法:采用Ficoll-Hypaque法分离脐血单个核细胞,接种于含体积分数为0.15胎牛血清的IMDM,双抗生素青、链霉素各1×105U/L24孔培养板中,在培养体系中加入白细胞介素2、白细胞介素7、白细胞介素15、干细胞因子及FLT3L制备细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞,每隔3天半量换液及全量补充上述细胞因子。主要观察指标:流式细胞仪检测CD3+CD56+细胞因子诱导杀伤细胞以及CD3-CD56+自然杀伤细胞在4周培养过程中CD16和CD11a表达的变化。结果:CD16在细胞因子诱导杀伤细胞、自然杀伤细胞上的表达随着培养时间的延长逐渐增加,在两类细胞上均在培养的第4周达到最高峰,分别为(55.99±3.90)%和(7.86±1.66)%,但CD16在自然杀伤细胞上表达比例较低,整个培养过程中自然杀伤细胞上CD16的均数表达没有超过8%。CD11a在细胞因子诱导杀伤细胞培养的第3周,自然杀伤细胞培养的第2周达到最高峰,分别为(49.32±6.32)%和(82.31±11.33)%,之后逐渐出现下降,到培养第4周几乎消失。结论:CD16和CD11a在细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞上的表达随培养时间呈动态变化,使用单克隆抗体联合细胞因子诱导杀伤细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用效应时,细胞的收获期可在细胞培养的第4周,利用细胞因子诱导杀伤细胞和自然杀伤细胞的直接杀伤效应进行细胞过继免疫,那么收获细胞的时间以细胞培养的第3周为宜。

摘要：自然杀伤(NK)细胞是天然细胞免疫系统的重要组成部分,是防御病毒感染的第一道防线。在与宿主的共进化过程中,病毒已进化出多种策略逃逸NK细胞攻击。深入理解病毒对NK细胞反应的逃逸作用有助于我们揭示病毒致病的分子机制和设计更加有效的方法来预防和治疗病毒引起的疾病。本文综述了病毒逃逸NK细胞免疫反应的研究进展。

摘要：自然杀伤细胞（natural killer cells，NK）不需要主要组织相容性复合体的抗原提呈，就可识别和杀死肿瘤细胞，是固有免疫的主要组成部份，在肿瘤免疫防御中发挥关键作用。NK细胞通过其表面受体的激活和抑制来调节其活性，然而，肿瘤细胞经常获得逃避NK细胞介导的免疫监视的能力。因此，了解肿瘤微环境中NK细胞表型调控的机制及功能有助于设计新的方案来改善目前基于细胞的免疫治疗。在此，详细阐述了NK细胞在抗肿瘤中的主要分子机制，突出NK细胞与肿瘤发生、发展过程中的相互作用。

摘要：目的分析不孕症患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)超促排卵周期中血清同型半胱氨酸(Hcy)、自然杀伤细胞(NK细胞)与卵巢反应性的相关性。方法选取2018年5月至2021年5月岳池县人民医院诊治的50例接受IVF-ET治疗且获卵数≥20个或获卵数≤3个的超促排卵周期患者作为异常组,选取同期49例接受IVF-ET治疗且获卵数为4~19个的超促排卵周期患者作为正常组。由研究人员设计基线资料调查问卷,查阅患者病历资料,并检测患者绒毛膜促性腺激素(HCG)注射当天的血清Hcy和NK细胞水平,重点分析不孕症患者IVF-ET超促排卵周期中的血清Hcy、NK细胞水平,分析两者与患者卵巢反应性的关系。结果异常组的血清Hcy、NK细胞水平均高于正常组,差异具有统计学意义(P0.05);多元Logistic回归分析结果显示,不孕症患者HCG注射当天的血清Hcy、NK细胞水平高是不孕症患者卵巢反应性异常的风险因子(OR>1,P0.70,评估价值较理想,且以联合评估的价值最好。结论不孕症患者IVF-ET超促排卵周期中血清Hcy、NK细胞水平与卵巢反应性存在一定的关系。

摘要：目的探究非小细胞肺癌的化疗联合免疫治疗中树突状细胞(Dendritic Cells,DC)与自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)间对话调控(Cross-talk)的调控机制。方法采用重复测量设计:非小细胞肺癌患者(性别不拘)需进行细胞治疗的患者60例。将60例病人随机分为两组(n=30):对照组,化疗前一周实施肿瘤DC疫苗联合CIK、NK细胞方案;试验组,化疗后一周实施肿瘤DC疫苗联合CIK、NK细胞方案。共设置4个测量时间点:治疗前24 h、治疗后48 h、治疗后1W、治疗后4W。使用ELISA法监测患者血清中可溶性细胞因子的表达,包括IL-12、IL-18、IL-15、分泌型TNF-α以及IFN-C。结果试验组和对照组血清中的IL-12、IL-18和IL-15在治疗前均无差异(P<0.05)。实施治疗后,试验组患者血清中DC细胞相关可溶性细胞因子的表达较时间点的对照组数据明显增高,IL-12(P<0.05),IL-18(P<0.05),IL-15(P<0.05);其表达在治疗后1W达到峰值,其峰值维持治疗后4 W(P<0.05)。结论在化疗治疗之后进行免疫细胞治疗,免疫细胞间Cross-talk的调控诱发的DC细胞和NK细胞间的正反馈作用显著增强。

摘要：背景：自然杀伤细胞（NK）是淋巴细胞的一个亚群和先天性免疫系统中的组成部分，在抗肿瘤和防治病毒感染中起重要作用。在此报道了用于治疗进展期癌症的NK细胞临床分级、GMPs生产的经验。研究设计与方法：用细胞采集系统（CliniMACS，Miltenyi）以未动员外周血单个核细胞单采术采集两种NK细胞浓缩物：去除CD3阳性细胞，以富集NK细胞；去CD3后再选择CD56阳性细胞，以获得高纯度NK细胞。