摘要：硬件免疫系统的研究尚处在起步阶段,有大量的问题需要解决,包括如何避免自身免疫问题等。针对硬件免疫系统设计中无法避免的自身免疫问题提出的一种新算法能够借助协同刺激信号自动删除与自身匹配的检测器,使硬件免疫系统具有自身耐受能力,提高了检测正确率并降低了误报率。模拟实验结果证明了算法的有效性。

摘要：目的探讨环磷酰胺在制备豚鼠自身免疫性耳聋动物模型中的作用。方法白色红目豚鼠30只,配对设计分成3组各10只。实验组豚鼠腹腔注射环磷酰胺(150mg/kg)进行预处理,2 d后,每只豚鼠将粗制内耳抗原(crude in-ner ear antigens,CIEAgs)400μg·(0.2ml)-1加等量完全弗氏佐剂进行后足垫、背部皮内多点注射免疫;对照1组用CIEAgs 400μg·(0.2ml)-1加等量完全弗氏佐剂免疫动物;对照2组仅行环磷酰胺预处理。所有动物免疫前、免疫后7、14、21d,接受听性脑干诱发电位(auditory brain-stem response,ABR)检测。结果免疫前所有豚鼠ABR反应阈均值为29.50±5.56dBSPL,免疫后7天实验组、对照1及对照2组ABR反应阈分别为52.50±12.72、36.50±11.25、31.50±3.37;免疫后14天时三组反应域分别为58.50±14.79、33.25±8.93、30.50±3.69 dBSPL;免疫后21天分别为46.25±12.45、30.00±4.29、30.00±3.33 dBSPL。免疫后,实验组动物各时间段反应阈高于对照1,2组(P<0.01)。免疫前后组内比较,实验组免疫后7天、14天、21天反应域高于实验前(P<0.01);对照1组仅免疫后7天高于免疫前(P<0.05),14天、21天与免疫前相比差异无显著性,对照2组各时间段与免疫前相比差异均无显著性。结论将豚鼠用环磷酰胺进行预处理,可以显著提高粗制内耳抗原建立自身免疫性耳聋动物模型的成功率,并显著提高其ABR阈值,而环磷酰胺本身对豚鼠内耳听力没有显著影响。

摘要：目的:研制一种基于自身免疫检测设备的全自动自身免疫检测流水线。方法:对现有自身免疫标本检测流程进行改进与优化,将现有的依靠人为搬运标本的现状改为依靠抓手抓取和履带传送的机械设计封闭轨道完成。结果:全自动自身免疫检测流水线利用现有检测设备,只需要根据科室设备摆放设计轨道走向,硬件制备便利,整条流水线密封在封闭轨道里,满足更好的实验室生物安全性,整合无线射频装置将标本信息录入进实验室信息系统,具有较强的可追溯性流水线的设计使得操作时间较原有手工搬运方法更短,可以提高工作效率。结论:基于自身免疫检测设备的全自动自身免疫检测流水线填补了现有自身免疫实验室依靠人力完成实验标本搬运的不足,具有较好的临床应用价值。

摘要：锌转运蛋白8(zinc transporter 8,ZnT8)是Ⅰ型糖尿病的重要候选抗原,基于ZnT8所开发的自身抗体检测试剂盒可用于帮助诊断Ⅰ型糖尿病,相关产品已在欧美国家上市。目前,国内正在积极开发Ⅰ型糖尿病检测试剂盒,由于国内尚未建立活性ZnT8的重组生产体系,因此这一关键原料严重依赖进口。本研究主要利用酿酒酵母系统开展了ZnT8的重组表达研究。首先,设计了ZnT8的多种抗原形式,分别为C端单倍体蛋白(C)、C端二倍体(C-C)以及N端和C端串联体蛋白(N-C),并使用酿酒酵母系统对上述蛋白进行了重组表达与纯化。随后,通过桥连法ELISA对纯化蛋白进行了抗原性测试,检测13位Ⅰ型糖尿病病人血清及16位健康志愿者血清后发现:C、N-C、C-C蛋白具有相似的检出率,分别为53.8%(7/13)、61.5%(8/13)及53.8%(7/13);3组的特异性均为100%(16/16);N-C蛋白相对其他2个蛋白而言,其在P3、P4、P8阳性样本上的检测值提高90%以上,表明具有更好的血清抗体识别能力。最后,选取N-C蛋白做进一步的血清样本测试,并将测试结果用ROC曲线进行敏感性及特异性表征,结果表明,与进口金标抗原相比,本方法敏感性无明显差异,特异性有待提高。综上可见,本研究基于酿酒酵母表达生产的ZnT8 N-C串联体蛋白有潜力作为Ⅰ型糖尿病体外诊断试剂开发中的国产替代原料。

摘要：目的 研究B细胞抑制性受体FcγRIIB与CD45分子之间的相互关系。方法 设计FcγRIIB-shRNA连接到反转录病毒载体上,通过反转录病毒将其导入A20细胞检测FcγRIIB-shRNA的敲低效率。然后将FcγRIIB-shRNA通过反转录病毒导入CD45.1小鼠脾脏B细胞,利用流式细胞术检测B细胞表面CD45.1分子的表达。通过流式细胞术检测FcγRIIB敲除小鼠的脾脏B细胞表面CD45.2分子的表达,研究B细胞表面抑制性受体FcγRIIB与CD45分子之间的关系。结果 与对照组相比,通过shRNA敲低FcγRIIB的表达会导致小鼠B细胞表面CD45.1分子的表达水平显著降低,并且FcγRIIB敲除小鼠B细胞表面CD45.2分子的表达也显著低于野生小鼠。结论 B细胞的抑制性Fc受体FcγRIIB影响其表面CD45分子的表达,表明FcγRIIB与CD45分子之间存在免疫调节网络,对于深入研究自身免疫性疾病的发生发展有着重要的意义。

摘要：经典的理论认为1型糖尿病（Type 1 Diabetes，TID）是一种由于自身免疫所导致的胰岛β细胞大量破坏，从而使胰岛素分泌数量绝对减少所致的糖代谢紊乱疾病。明显的“三多一少”症状以及糖尿病酮症或酮症酸中毒起病常被认为是其典型的首发临床表现，

摘要：目的:研究白塞病及常见免疫风湿性疾病血清维生素A(sVit A)水平。方法:化学发光法测得白塞病(BD,包括眼BD、肠BD、血管BD等3种罕见亚型)、类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、强直性脊柱炎(AS)、原发干燥综合征(p SS)和成年发病Still病(AOSD)等6种疾病sVit A水平,并与50例健康对照组(HC)进行比较,其中针对RA、SLE、AS和pSS对HC进行配对设计后比较。结果:纳入的各种风湿性疾病符合相应的流行病学特点;眼BD、肠BD、血管BD及皮肤黏膜型BD sVit A水平均低于健康人群(P<0.05),组间无差异;RA、SLE、AS、pSS和AOSD sVit A水平均低于健康人群(P<0.05)。结论:sVit A浓度下降可能是多种免疫风湿性疾病的共同机制。

摘要：目的:探讨凋亡抑制因子(BIRC5)抗体在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆中的表达及其与预后的关系。方法:选取首次确诊未经治疗的NSCLC患者211例及健康对照者200例,收集血浆样本。基于BIRC5蛋白结构,运用抗原表位预测工具设计、合成2条线性抗原肽,即BIRC5a、BIRC5b,通过自行建立的ELISA法检测血浆BIRC5抗体水平,分析BIRC5抗体表达与NSCLC患者临床病理特征的关系。结合NSCLC患者随访资料,采用Kaplan-Meier生存曲线及COX回归分析法分析BIRC5抗体表达与NSCLC患者预后的关系。结果:NSCLC患者血浆BIRC5a抗体表达水平显著高于正常对照组(1.33±0.53 vs 1.14±0.51,P0.05)。NSCLC患者血浆BIRC5a抗体表达与肿瘤分化程度、组织学类型有关(P0.05)。NSCLC患者血浆BIRC5b抗体的表达与性别、年龄、吸烟史、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期均无关(P>0.05)。血浆BIRC5b抗体高表达组患者术后生存期(OS)较BIRC5b抗体低表达组患者显著延长(Log Rank检验,χ2=6.7,P=0.01)。多因素分析结果显示BIRC5b抗体表达为NSCLC患者预后的独立保护因素(HR=0.49,P=0.012)。结论:BIRC5b抗体可能抑制NSCLC发生发展,有望成预测NSCLC预后的生物标志物。

摘要：免疫系统与中枢神经系统（CNS）之间的精细调节，使得CNS既能够抵抗病原体的入侵，也能够免于自身免疫的损伤。由于血脑屏障的存在，CNS属于免疫豁免部位，免疫反应在CNS中受到严格的限制。然而，CNS的免疫豁免是相对的，这对于监视病原体的入侵起着至关重要的作用。

摘要：目的探讨光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)的R16多肽片段的致葡萄膜视网膜炎活性。设计实验研究。研究对象36只Lewis大鼠。方法应用Fmoc法合成并纯化牛IRBP R16多肽片段,以诱导实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎(EAU)模型,并对该模型进行临床观察和组织学检查。培养EAU大鼠的引流淋巴结细胞,测定淋巴细胞增殖反应。各实验同时建立单纯弗式完全佐剂(CFA)免疫组和空白对照组。主要指标多肽分析,视网膜形态学,淋巴细胞增殖反应。结果合成的IRBP R16多肽片段纯度为95.6%。应用IRBP R16多肽片段作为抗原免疫Lewis大鼠,可成功诱导出EAU模型。EAU的临床分级为(3.33±0.52)级,病理分级为(3.67±0.92)级;CFA组和空白对照组大鼠眼部均无异常改变。EAU组大鼠引流淋巴结中抗原特异性淋巴细胞增殖反应增强,为(33.27±7.24)×103cpm,显著高于CFA组[(1.91±1.16)×103cpm]和空白对照组[(1.23±0.51)×103cpm](P<0.05)。结论 IRBP R16多肽片段具有较强的致葡萄膜视网膜炎活性,引流淋巴结抗原特异性淋巴细胞增殖反应增强。IRBP R16多肽诱导的EAU为研究人类葡萄膜视网膜炎提供了一个重要的动物模型。(眼科,2010,19:267-270)