摘要：根据前期在芥蓝中克隆的BaANS基因序列设计PCR引物,从紫菜薹(Brassica ***)子叶中克隆到基因组DNA和cDNA序列,基因定名为BcANS;序列已提交NCBI数据库,登录号为GQ120562;BcANS的基因组DNA全长为1 637 bp,具1个560 bp的内含子,编码区全长为1 077 bp,编码358个氨基酸.RT-PCR检测结果表明:BcANS在光照条件下表达,在暗培养植株的子叶和胚轴中未见表达;缺磷植株的子叶和胚轴在暗培养和光照培养下BcANS基因均有表达,但光照条件下的表达量较大.序列比对结果表明:BcANS与同科的甘蓝、芥菜和拟南芥的同源性最高,而与禾本科植物的同源性最低,在进化树上相距最远.对紫菜薹花青素合成酶基因的克隆和表达分析,为进一步开展基因功能和花青素生物合成机制研究奠定了基础.

摘要：根据NCBI数据库中的已知序列设计简并引物,分别从芥蓝(Brassica albograbra)叶片基因组DNA和cDNA中克隆到了花青素合成酶基因。基因命名为BaANS,该基因全长1369bp,具一个长度为292bp的内含子,编码区长度为1077bp,编码358个氨基酸,序列已提交到NCBI,登录号为GU170203。序列比对结果表明,BaANS与甘蓝、拟南芥、紫罗兰、白菜和芥菜等的ANS有较高的相似性。

摘要：花青素合成酶(anthocyanidin synthase,ANS)是植物花青素生物合成途径的关键酶,可催化无色花色素向有色花色素转变。根据已报道的花青素合成酶基因序列设计引物,分别以不同皮色洋葱苗期总DNA和cDNA为模板进行克隆和序列比对,结果显示,从紫皮和黄皮洋葱中克隆到相同的目的条带,基因序列完全一致,且与已报道的ANS等位基因序列高度相似,确认克隆到AcANS基因片段序列。以Actin基因为内参,对AcANS在两种皮色洋葱苗期不同组织中的表达进行半定量分析,结果表明,AcANS在洋葱幼苗叶鞘中表达量最高,叶片中次之,根中不表达;紫皮洋葱中AcANS基因的表达量明显高于黄皮洋葱,这有利于紫皮洋葱积累更多的花色苷,从而使鳞茎产生颜色上的差异。本研究结果可为后续获得洋葱ANS基因全长序列、深入研究其功能奠定基础。

摘要：根据NCBI数据库中已知的蔷薇科植物花青素合成酶基因序列设计特异引物,从本实验室已经构建好的木奈成熟果实均一化全长cDNA文库中筛选分离得到了一个编码花青素合成酶的cDNA:基因命名为PsANS,登录号:JN560957。该cDNA长1 478 bp,包含137 bp 5'非编码区,267 bp 3'非编码区,开放阅读框长度为1 074 bp。PsANS编码358个氨基酸,分子量为40.41 ku,理论等电点为5.35。经BLAST分析对比发现,PsANS氨基酸序列与甜樱桃、苹果和草莓的ANS氨基酸同源性都很高,分别为98%、93%和89%。将PsANS亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1和pET-32a上,在大肠杆菌BL21中经1mmol/L ITPG诱导表达获得了木奈PsANS融合表达蛋白,其分子量大小与预期的一致,进一步确认本试验克隆得到的PsANS为木奈花青素合成酶基因。

摘要：桑属植物细胞中含大量蛋白酶及多糖等生物功能性分子。以新鲜的桑叶、桑果为试验材料,应用Trizol法提取总RNA。试验表明,使用Trizol法配合氯仿—苯酚试剂提取RNA操作简单,且能够有效去除桑叶中多糖和多酚类等次生物质,从而得到高质量的RNA,以获得的RNA为模板,设计简并引物,成功从桑叶中鉴定出花青素合成的关键酶基因MCHS基因。该试验为分子水平研究桑科类黄酮代谢机制、以及桑葚功能性食品的开发等提供了一定的理论依据。