摘要：目的对阿霉素可能的作用靶点进行分析,筛选阿霉素耐药相关蛋白。方法质粒转染HEK239细胞以构建蛋白高表达模型;IC_(50)检测细胞的药敏性;RT-PCR检测细胞内基因的表达;Western blot检测CMPK1蛋白的表达;CMPK1siRNA构建CMPK1蛋白低表达模型。结果 IC_(50)检测结果表明高表达CMPK1蛋白的细胞对阿霉素的敏感性增加程度最大(IC_(50)^(HEK293-CMPK1)/IC_(50)^(HEK293-Control)=0.15,P<0.01),且阿霉素耐药细胞(MCF7/ADM)中CMPK1蛋白的表达低于乳腺癌亲本细胞MCF7(P<0.05)。MCF7细胞中,CMPK1蛋白表达水平经CMPK1 siRNA下调之后,对阿霉素的药敏性随之降低(IC_(50)^(MCF7-siCMPK1)/IC_(50)^(MCF7-Control)=3.6,P<0.01),且对紫杉醇、吉西他滨的药敏性也随之降低。结论 CMPK1与细胞的多药耐药相关,且CMPK1蛋白的表达与药敏性呈正相关,提示了CMPK1作为多药耐药治疗靶点的可能性。

摘要：目的　探讨应用硫代修饰人端粒酶RNA(hTR)反义核酸后胃癌细胞对顺铂 (DDP)和阿霉素 (ADM )敏感性的变化。方法　采用脂质体将针对hTR模版区设计的 13个碱基硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸CAGTTAGGGTTAG导入胃癌细胞SGC790 1,应用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法、流式细胞仪和TRAP PCR ELISA法测定联合应用化疗药后对细胞增殖、凋亡和端粒酶活性的影响。结果　化疗药物ADM和DDP对端粒酶活性抑制作用不同 ,而且有时间依赖趋势。hTR反义PS ODN可增加ADR和DDP抑制胃癌细胞系SGC790 1端粒酶活性、诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖的作用。结论　hTR反义PS ODN在体外能增加胃癌细胞系SGC790 1对化疗药ADR、DDP敏感性 ,其机制可能与其抑制细胞端粒酶活性、诱导细胞凋亡有关。