摘要：肿瘤细胞具有十分独特的生存与代谢模式,研究肿瘤细胞的药物代谢特征对于了解药物在肿瘤细胞中的代谢和消除快慢进而评估并预测药效、基于代谢特征优化抗肿瘤药物/前体药物设计具有重要意义。本文综述了肝、肠、乳腺和肺等常见癌组织的主要药物代谢相关酶的表达/活性及其与正常组织的差异,阐述了部分典型抗肿瘤药物在肿瘤组织中的代谢特征,结合对应的常用体外培养肿瘤细胞株中药物代谢酶的表达/活性特征,探讨实体肿瘤组织(体内)和肿瘤细胞株(体外)中酶表达与功能的异同性及差异的产生原因。

摘要：目的构建一套基于多重聚合酶连接反应-连接酶检测反应(polymerasechainreaction-ligasedetectionreaction,PCR-LDR)体系的分型法,用于同时检测多种人体主要药物代谢酶基因位点的突变。方法选择药物代谢酶相关单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,设计合成各SNP位点的PCR引物和LDR探针,以人口腔黏膜细胞中提取的DNA为模板,获得PCR-LDR反应连接产物,采用ABI 3130XL进行检测分析。结果采用本研究建立的PCR-LDR分型方法,对不同个体的14个SNP位点进行分型,分型结果与测序结果完全一致。结论本研究建立的PCR-LDR分型方法能够同时对14个SNP位点进行一次性分型,结果准确、可靠,是一种简便有效且低成本的SNP分型方法。

摘要：目的在piggy Bac(PB)转座子介导下,探索在HepG2细胞中实现多个药物代谢酶稳定共表达的策略,为建立体外药物代谢和肝毒性研究的理想细胞模型奠定基础。方法首先选择3种目前针对大片段DNA使用较广的转染方法:Lipofectamine~?LTX,Gen Jet^(TM)(Ver.Ⅱ)和Neon~?Transfection System,分别转染N端标记增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP-N2)和2A串联重组细胞色素3A4(CYP3A4)和CYP2C19的PB转座子质粒(pPB-CYP3A4-2A-2C19)至HepG2细胞,48 h后比较不同方法的转染效率和细胞毒性,确立高效低毒的HepG2细胞转染方法。然后选择该法进行转染,将设计的3组PB重组转座子:单基因转座子(PB-CYP3A4)、2A串联多基因转座子(PB-CYP3A4-2A-2C19)、多个单基因转座子混合物[PB-CYP3A4,PB-CYP2C8,PB-CYP2A6,有机阴离子转运多肽1B1的PB转座子(PB-OATP1B1)]分别转染HepG2细胞,利用嘌呤霉素和GFP进行单克隆细胞筛选:挑选具有抗性且表达GFP的细胞单克隆并进行扩大培养,采用实时荧光定量PCR、Western蛋白质印迹和高效液相色谱-串联质谱联用法分别检测各组药物代谢酶m RNA、蛋白质水平及酶活性,并进行统计分析。结果 3种转染方法比较发现,Gen Jet^(TM)法的转染效率显著高于其他2种(P<0.01),介导pEGFP-N2和pPB-CYP3A4-2A-2C19的转染效率分别高达(94.2±2.5)%和(89.3±3.3)%,且该法具有较低的细胞毒性。因此选择Gen Jet^(TM)法进行后续PB转座子转染。分别转染3组PB重组转座子发现,单个转座子PB-CYP3A4和PB-CYP3A4-2A-2C19转染后,筛选获得的抗性细胞克隆中各个药物代谢酶在m RNA、蛋白质及活性水平均显著提高,其中2A可实现CYP3A4和CYP2C19药物代谢酶协同稳定表达;而多个转座子混合共转染细胞中,仅有随机几个基因表达;且各药物代谢酶基因的表达不均衡,仅CYP3A4药物代谢酶基因在单克隆细胞中表达水平明显升高。结论 Gen Jet^(TM)法可成为PB重组转座子转染HepG2细胞的有效方法。PB转座子可介导基因稳定表达;但在实现多基因共表达时,与病毒载体法不同,理论上可行的PB多转座子共转染方法其基因表达效率下降,且各基因表达不均衡。相比之下,应用2A串联多个基因串联重组PB单转座子可实现各基因稳定表达。

摘要：人体内分布数百种结构多样、功能各异的药物代谢酶,其表达和功能易受遗传和环境因素的影响,导致其在不同人种、个体及组织中的分布都不尽相同。特异性探针底物作为药物代谢酶活性表征的关键工具分子,其在新药发现、药-药相互作用评价、临床药理学及精准医学检测等领域具有重要的应用价值。围绕人体分布的重要药物代谢酶,综述其特异性探针底物的设计研发及生物医学应用进展,以期为药物代谢酶的精准检测及相关应用研究提供参考。

摘要：肿瘤产生的耐药性,与药物代谢相关的分子机制包括药物灭活、药物外排增加、药物摄取减少有密切关系。药物代谢酶和药物转运体的表观遗传学调节机制,有望逆转肿瘤产生的耐药性,为开发抗肿瘤药物和设计临床治疗方案提供新策略。本文对表观遗传药物代谢酶和转运体如DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA调控等的新进展进行综述,希望为治疗多药耐药提供新思路。

摘要：目的:介绍近年来群体药动学(PPK)在抗肿瘤药物及其代谢酶研究中的应用进展。方法:查阅近5年国内外文献,综述PPK在抗肿瘤药物研究中的应用。结果:药物代谢酶基因多态性是影响抗肿瘤药物代谢的主要遗传因素,是个体差异的重要原因。目前,已有部分研究将基因多态性的因素引入PPK,将其对抗肿瘤药物代谢的影响进行了量化,并且在依据不同的基因型选择不同的给药方案方面取得了新的进展。结论:肿瘤药物治疗存在个体差异,PPK是设计个体化治疗方案的有效方法。

摘要：妊娠妇女合理用药是医生和药师必须认真对待的临床问题。妊娠期间体内大多数组织器官都会发生解剖和生理学的改变,从而影响药物的吸收、分布、代谢和排泄等体内过程,最终导致生物利用度的变化。因此为达到有效治疗浓度,孕期可能需要剂量调整。过去的十几年中建模与仿真技术在新药研发和临床治疗领域的应用不断扩展,例如用群体药动学(population pharmacokinetics, PPK)和生理药动学(physiologically based pharmacokinetics,PBPK)建模方法来设计特殊人群的给药方案。严谨设计和验证的模型能有效弥补临床试验的不足,为临床研究方案设计提供极有价值的参考,甚至替代部分临床试验。本文将介绍妊娠期影响药物药动学性质的生理学变化,并综述PBPK模型在妊娠期药动学研究中的应用进展。

摘要：儿童具有生长和发育两个特点，其个体发育包括药物代谢酶、转运蛋白、受体和器官的发育。儿童的生长和发育使得药物的吸收、分布、代谢和排泄及药物在儿童的不同发育阶段对发育中器官的药效都存在着与成人显著不同的差异。

摘要：精准医疗是以基因组信息为基础的个体化治疗,为患者量身设计出最佳治疗方案,以期达到治疗效果最大化和副作用最小化的医疗模式。群体药代动力学研究可根据患者的个体差异制定个体化给药剂量,在精准医疗模式下具有独特的优势。目前,中药存在不良反应逐年增高等安全性问题,将基于精准医疗的群体药代动力学引入中医药领域非常必要。但因中药与化学药物不同,具有多成分的特点,需将群体药代动力学、遗传学与统计学方法相结合,制定符合中药特色的研究方法。关键科学问题是需明确对中药有效成分代谢有影响的药物代谢酶基因型,并注意分析具有多态性的药物代谢酶在人体中的整体作用趋势。明确关键科学问题,突破瓶颈,从而实现中医药的精准医疗,走向国际化。

摘要：近年来,越来越多的研究表明中药的药代动力学特征能够被疾病状态所影响,生理及病理的变化在一定程度上会影响机体内的药物代谢酶、转运蛋白、细胞膜的通透性以及微生物菌群的改变,从而改变中药在机体内的吸收、分布、代谢和排泄过程,进而引起中药的药代动力学参数的改变。鉴于中药主要是用于病理状态的机体内,故研究机体病理状态下的药动学参数较正常状态下更有意义。该文拟就中药在糖尿病、脑缺血、肝损伤、炎性疾病、神经系统疾病以及发热等疾病状态下的药代动力学的研究作一综述,以期为临床针对不同的机体状态,设计合理安全的用药剂量提供一定的参考。