摘要：目的:促进我国药物经济学研究和提高其运用水平。方法:阐述药物经济学国外研究现状以及国内运用中存在的问题。结果与结论:世界各国对药物经济学日益重视;国内对药物经济学研究和运用尚存在观点不明、设计和数据来源不当、方法选用欠妥等问题。

摘要：目的观察针对G3BPs蛋白靶标所设计的多肽P110联合顺铂对人结肠癌HCT-116细胞增殖和小鼠结肠癌C26移植瘤生长的抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测20μmol／LP110联合不同浓度顺铂对HCT-116细胞和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的增殖抑制作用。建立小鼠结肠癌C26皮下移植瘤模型，观察不同剂量P110和顺铂对小鼠移植瘤的抑制作用。结果20μmol／LP110＋10μmol／L顺铂、20μmol／LP110＋30μmol／L顺铂和20μmol／LP110＋90μmol／L顺铂对HCT-116细胞的增殖抑制率分别为（43．3±3．2）％、（46．4±4．6）％和（47．6±5．8）％，10、30和90μmol／L顺铂对HCT-116细胞的增殖抑制率分别为（15．6±3．3）％、（21．3±1．1）％和（36．0±0．9）％，P110能够增强顺铂对HCT-116细胞增殖的抑制作用，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。20μmol／LP110联合10μmol／L顺铂可有效的杀伤HCT-116细胞，且对HUVEC细胞的毒性作用较小。25mg／kgP110＋1mg／kd顷铂、50mg／kgP110＋1mg／kg顺铂、100mg／kgP110＋1mg／kg顺铂对小鼠移植瘤的抑瘤率分别为23．0％、30．4％和34．2％，均高于1mg／kg顺铂的抑瘤率（22．7％）。结论P110能够增强顺铂对结肠癌HCT-116细胞增殖和小鼠结肠癌C26移植瘤生长的抑制作用；联合用药能减少顺铂有效使用剂量，进而减少顺铂的毒性作用。

摘要：目的评价美罗培南与多西环素、环丙沙星、舒巴坦及头孢哌酮/舒巴坦联合用药对泛耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌效应。方法采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定不同浓度组合的抗菌药物对50株临床分离的泛耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度,并计算部分抑菌浓度(FIC)指数判定联合效应。结果美罗培南与多西环素联用后,其MIC50显著下降,FIC指数分布:FIC≤0.5占38%,0.52为0。美罗培南与环丙沙星联用后,其MIC50下降不明显,FIC指数分布:FIC≤0.5为0,0.52为0。美罗培南与舒巴坦联用后,其MIC50明显下降,FIC指数分布:FIC≤0.5为26%,0.52为0。美罗培南与头孢哌酮/舒巴坦联用后,其MIC50有所下降,FIC指数分布:FIC≤0.5为10%,0.52为0。结论美罗培南与多西环素、舒巴坦或者头孢哌酮/舒巴坦联合,对泛耐药鲍曼不动杆菌均表现为协同和相加作用,没有无关作用和拮抗作用,具有良好的体外抗菌活性;而美罗培南与环丙沙星联合表现出的相加作用和无关作用比例相当,对泛耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性较差。

摘要：目的　研究小分子干扰RNA片段 (smallinterferingRNAs,siRNA)对白血病多药耐药细胞系K5 6 2 A0 2mdr1基因和P 糖蛋白 (P gp)表达及功能的影响。方法　根据mdr1基因已知序列设计 3条含 2 1个碱基的siRNA(si mdr1 1,si mdr1 2 ,si mdr1 3)及阴性对照 (si neg) ,在脂质体的介导下转染K5 6 2 A0 2细胞 ;用RT PCR分析mdr1mRNA的表达 ;流式细胞术检测P gp表达和细胞内柔红霉素积累量 ;MTT法检测阿霉素对K5 6 2 A0 2细胞的半数抑制浓度 (IC50 )。结果　 3条siRNA均能不同程度地逆转K5 6 2 A0 2细胞的多药耐药。第 3条序列能更有效地封闭mdr1基因 ,使mdr1mRNA相对水平下降(5 8.0± 1 5 4 ) % ;P gp表达由处理前的 (76 .0± 1.0 ) %降到处理后的 (19.6± 1.9) % ;对阿霉素药物敏感性的相对逆转效率为 70 .4 % ;同时使K5 6 2 A0 2细胞内柔红霉素积累量增加。结论　siRNA可逆转mdr1基因编码蛋白P gp介导的多药耐药。

摘要：目的:探讨在人宫颈癌Caski细胞中抑制多胺调节因子-1(polyamine-modulated factor,PMF-1)表达对糖皮质激素类药物地塞米松(dexamethasone,DEX)抗肿瘤作用的影响。方法:设计合成靶向人PMF-1基因的si RNA,Western blotting法鉴定其对Caski细胞PMF-1中表达的影响。用DEX处理PMF-1表达抑制的Caski细胞和对照细胞,然后分析PMF-1表达下调是否影响瘤细胞对DEX的敏感性。MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,Western blotting法测定糖皮质激素受体(glucocorticoids receptor,GR)的表达水平,高效液相色谱法分析细胞内的多胺含量。结果:用靶向PMF-1基因的siRNA瞬时转染Caski细胞能显著性下调细胞中PMF-1蛋白的表达水平。与对照细胞相比,用DEX处理PMF-1表达下调的Caski细胞能更有效地抑制细胞增殖(P<0.01),上调细胞内GR表达水平(P<0.01),并显著抑制细胞分裂导致G2周期阻滞(P<0.01),同时能显著性地降低细胞内的多胺水平(P<0.01)。结论:抑制PMF-1表达可增强DEX对人宫颈癌细胞的抗肿瘤活性,其机制可能与降低细胞内多胺水平和增强细胞周期阻滞相关。

摘要：目的探讨针对多药耐药基因(MDR-1)上特异位点的反义寡核苷酸对体外培养的大鼠胶质瘤细胞多药耐药性的逆转作用。方法根据MDR-1基因的碱基序列设计合成硫代修饰的寡核苷酸,通过阳离子脂质体介导转染胶质瘤耐药细胞,应用流式细胞仪、RT-PCR等方法,对转染后的耐药细胞进行P-170、MDR-1mRNA水平的检测;用MTT法对转染后的细胞进行化疗药物敏感性试验,评价寡核苷酸对多药耐药性的逆转效果。结果流式细胞结果显示转染后胶质瘤耐药细胞P-170表达明显低于转染前(P<0.05);RT-PCR可见转染后细胞的MDR-1mRNA水平减低;药物敏感性试验显示反义寡核苷酸转染后胶质瘤耐药细胞对化疗药物的敏感性增强(P<0.05),含有脂质体的转染体系组对化疗药物的敏感性显著高于不含脂质体的转染体系组(P<0.01)。结论特异序列的反义寡核苷酸能够明显抑制大鼠胶质瘤细胞的P-170表达和减低MDR-1mRNA水平,进而对胶质瘤细胞的多药耐药性产生明显的逆转作用;应用阳离子脂质体作为转染载体可显著提高转染效率。

摘要：目的:探讨利用CRISPRi下调MDR1基因表达增强肺腺癌A549/DDP细胞对顺铂敏感性的作用。方法:利用生物信息学技术预测MDR1基因启动子上潜在的CRISPRi干扰位点,设计干扰片段并构建重组载体,采用qRT-PCR、Western blot方法检测各组细胞中MDR1基因mRNA以及蛋白表达水平,筛选干扰效率高的重组载体进行后续实验。将人肺癌A549/DDP细胞分为3组,分别为A549/DDP、Scrambed、sgRNA-MDR1-1,每组设置3个复孔。将各载体转染细胞48 h后,流式细胞术检测各组细胞外排情况,MTT法检测各组细胞的IC 50值,激光共聚焦显微镜下观察各组细胞经顺铂处理后的细胞形态。结果:经测序比对,成功构建两种干扰MDR1基因转录的CRISPRi重组载体。转染A549/DDP细胞后,各转染组细胞MDR1基因mRNA以及蛋白水平均显著降低(P<0.01),其中sgRNA-MDR1-1的干扰效率最高,mRNA和蛋白水平干扰效率分别达60%和51%。与Scrambed组相比,转染sgRNA-MDR1-1组细胞的细胞外排能力降低(P<0.01),细胞对顺铂的IC 50值显著降低(P<0.01),细胞内染色质聚集边缘化。结论:利用CRISPRi技术干扰MDR1基因表达能增强肺腺癌A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。

摘要：为了探究昆明某鸡场沙门氏杆菌耐药表型与耐药基因的相关性,试验采用平板凝集试验对昆明市某鸡场2115只成鸡和771只育成鸡进行感染现状检测,从病死鸡只中分离培养沙门氏杆菌,对其进行革兰氏染色和PCR鉴定,并测定分离株对7类13种常见抗生素的敏感性,设计7类常见抗生素的6种耐药基因[aac(3)-Ⅳ、sulⅠ、tetA、qnrA、blaTEM、catAⅠ]对分离株进行检测并分析其相关性。结果表明:该鸡场感染的总阳性率为23.84%,成鸡阳性率为20.52%,育成鸡阳性率为32.94%。共分离得到21株沙门氏杆菌,对青霉素、阿莫西林、复方新诺明、林可霉素为完全耐药;对庆大霉素、头孢拉定、卡那霉素、呋喃唑酮、恩诺沙星的耐药性高,耐药率分别为85.71%(18株)、47.62%(10株)、42.86%(9株)、33.33%(7株)、33.33%(7株);对氟苯尼考较敏感,耐药率为28.57%(6株);对头孢噻肟、丁胺卡那、环丙沙星不耐药。21株菌全部检出耐药基因sulⅠ,18株菌检出耐药基因bla TEM、tetA和qnrA,19株检出耐药基因aac(3)-Ⅳ,17株检出耐药基因catAⅠ。说明该鸡场鸡群严重感染沙门氏杆菌,该菌广泛存在且具有多重耐药性,其耐药表型与所携带的耐药基因存在密切关系。

摘要：目的分离牛乳源性大肠埃希菌(***)并进行PCR检测及耐药性分析。方法根据GenBank上公布的牛源致病性大肠埃希菌基因序列,利用Primer5.0和DNAMAN生物信息学软件,根据该致病菌基因组序列16S～23SrRNA间隔区保守序列设计并合成1对引物,对牛乳中分离的大肠埃希菌进行基因扩增和序列测定,同时利用琼脂平板扩散方法分析阳性菌株的耐药状况。结果大肠埃希菌基因PCR扩增产物为396bp,与预期片段大小相符;测序结果与GenBank上公布的牛源大肠埃希菌(X80731.1)基因序列相似性为97.22%,与标准菌株大肠埃希菌(CVCC247)基因序列相似性为100%。分离菌株普遍对卡那霉素、氧氟沙星、氟哌酸高度敏感,对四环素、氨苄青霉素高度耐药。结论成功分离出牛乳源大肠埃希菌菌株,该组分离菌对四环素和氨苄青霉素高度耐药,为进一步建立牛乳中致病性大肠埃希菌的分子检测方法及指导临床用药提供了依据。

摘要：9719598 应用人为引物 PCR 法来区别肺炎链球菌和上呼吸道的其他链球菌/Messmer T O//Clin Biochem.-1995,28(6).-567～572 一军大9719599 使用者界面再设计:在临床微生物学实验室中创造性使用条形码/