摘要：【目的】建立快速筛查牛脊椎畸形综合征(Complex vertebral malformation,CVM)基因携带者的方法,在牛群中逐渐淘汰CVM基因携带者以减少养牛业损失.【方法】根据Gen Bank已发表的CVM基因的SLC35A3基因序列,设计合成了2对特异性引物和2条TaqMan探针,建立了牛脊椎畸形综合征Ta Man探针检测方法.对方法的特异性和敏感性进行分析后,应用该方法对临床样本进行检测,并与测序方法进行比较.【结果和结论】该方法能有效区分突变型、野生型和杂合型个体.各种基因型的检测灵敏度为:突变型质粒拷贝数1×10~3μL^(-1),杂合型质粒拷贝数1×10~4μL^(-1),野生型质粒拷贝数5×10~3μL^(-1).从292份荷斯坦牛全血中检出6份CVM基因携带者,与测序方法结果一致.本研究建立的方法简便快捷、准确率高,适合大样本筛选和口岸现场快速筛查.

摘要：根据已发表的牛β-防御素基因序列设计引物,从具有临床乳腺炎症状的荷斯坦奶牛血液中性粒细胞中提取RNA,克隆牛β-防御素基因并插入到原核表达载体pQE-30中,构建了原核表达质粒pQE-30/β-defesion。测序结果表明,克隆的目的基因长189bp,编码1个氨基酸,与已报道的牛β-防御素氨基酸序列同源性达95.6%。本研究为牛乳腺防御素的表达及功能、活性的研究奠定了一定的基础。

摘要：为了探讨奶牛的遗传基础对耐热性和免疫机能的影响,对弗荷杂交牛(弗莱维赫×荷斯坦F1)与荷斯坦牛的生理生化、免疫和抗氧化指标进行了比较研究.采用品种分组试验设计,根据组间胎次、泌乳天数及产奶量相近的原则,选取18头弗荷杂交牛和18头荷斯坦牛.结果表明,热应激期,弗荷杂交牛的血清T4,CORT,IL-1,T-AOC和SOD水平显著高于荷斯坦牛(P0.05).结果显示,热应激期,弗荷杂交牛的热适应性能、免疫功能和抗氧化性能高于荷斯坦牛,能较好地适应高温高湿的外界环境;非热应激期,弗荷杂交牛的免疫功能高于荷斯坦牛,机体的健康状况良好.

摘要：牛Mx1基因位于1号染色体上,含有14个外显子,编码648个氨基酸。研究以346头陕西地区荷斯坦牛为研究对象,根据GenBank所提供的牛Mx1基因序列,设计15对引物,采用混合DNA池扩增测序和PCR-RFLP的方法对牛Mx1基因的14个外显子进行多态性分析。结果表明,4个SNPs,分别位于外显子3(g.843330T>C,g.843411A>G)、外显子4(g.844048C>T)和外显子7(g.851325T>C)。其中,外显子4(g.844048C>T)为同义突变;外显子3(g.843330T>C,g.843411A>G)两个位点的突变分别导致了异亮氨酸(Ile)向苏氨酸(Thr)、谷氨酸(Glu)向精氨酸(Arg)的突变;外显子7(g.851325T>C)位点的突变导致亮氨酸(Leu)变为脯氨酸(Pro)。4个SNPs位点都存在三种基因型,但纯合子的突变频率较低。4个SNPs位点共构建了11种单倍型,其中以H6为最主要的单倍型。结果显示,陕西地区荷斯坦牛Mx1基因存在较丰富的多态性,这将为Mx1基因结构和功能的研究以及将来在育种实践中的应用提供基础资料。

摘要：试验旨在探究不同生长时期弗荷F1牛与荷斯坦牛的冷适应性和免疫功能。试验采用品种分组设计,选取30头弗荷F1牛和30头荷斯坦牛。冷应激试验在1月20日—2月20日进行,试验期7 d。结果显示,在冷应激条件下,弗荷F1牛在产奶中期的白细胞介素-2(IL-2)水平显著高于荷斯坦牛(P<0.05),在犊牛、育成、青年、干奶期的白细胞介素-3(IL-3)水平均显著高于荷斯坦牛(P<0.05),在育成、产奶期的白细胞介素-6(IL-6)水平显著低于荷斯坦牛(P<0.05),在育成期的白细胞介素-10(IL-10)水平显著高于荷斯坦牛(P<0.05)。弗荷F1牛在各时期的补体C3含量均显著高于荷斯坦牛(P<0.05),在育成、青年、干奶期的补体C4含量显著高于荷斯坦牛(P<0.05),在犊牛期的免疫球蛋白G(IgG)水平显著高于荷斯坦牛(P<0.05)。研究表明,在冷应激条件下,弗荷F1牛比荷斯坦牛具有更强的免疫性能和耐寒抗病能力,更加适应寒冷环境。

摘要：为筛选κ-酪蛋白优势基因型,本研究设计4个SNP位点,利用基因组检测已知CSN3基因型的13头牛,采集抗凝血,提取基因组DNA,采用竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(Kompetitive Allele Specific PCR,KASP)对样本进行分型,CSN3基因有AA、BB、EE、AB、AE、BE六种基因型。本研究实现了对北京地区213头荷斯坦种公牛及1003头母牛中CSN3三种常见变异体的全面筛选,从育种角度出发,基于κ-酪蛋白不同基因型与奶酪生产的产量和质量相关性,利用分子检测方法筛选与优良性状的优势基因型,发掘荷斯坦牛特色优质种质资源,为牧场选择合适的荷斯坦牛,提高乳蛋白率,从种源解决相关领域的技术瓶颈。

摘要：为建立一种快速高通量的荷斯坦牛瓜氨酸血症(Citrullinemia,CN)分子检测方法,依据CN是由于精氨酸琥珀酸(ASS)合成酶基因编码第86位精氨酸的密码子突变为终止密码子的遗传学基础,利用Assay Design SW软件设计了1对引物和1条测序引物对三种不同基因型的基因材料进行测序分析。用建立的方法对55份进境荷斯坦牛血样进行检测,发现有1例为隐性基因携带者,将PCR产物进行常规测序,结果与焦磷酸测序检测结果一致。研究表明该方法可用于荷斯坦牛瓜氨酸血症的检测,是一种有效的新方法。

摘要：脊椎畸形综合征(Complex Vertebral Malformation,CVM)是由常染色体上SLC35A3基因单碱基突变(G→T)引起的隐性遗传疾病,该基因隐性纯合(CV/CV)时奶牛致死,但CVM携带者表现正常,所以CVM携带者公牛可以通过人工授精技术传播CVM缺陷基因。本研究自行设计检测CVM特异性PCR引物,扩增长度为173bp,然后利用PCR-SSCP方法对186个公牛样品和140个母牛样品进行了检测分析,该方法简便快捷、准确率高,使用样品宽泛,适合大样本筛选。研究结果表明,在所检测的样本中,荷斯坦种公牛和母牛CVM携带率分别为11.3%和12.1%,并通过系谱追踪发现,CVM遗传缺陷的共同祖先是美国名牛"Penstate Ivanhoe Star"(USA.1441440,CV)。通过剔除CVM携带者公牛可以有效地控制CVM遗传缺陷,但是,我国许多CVM携带者公牛冻精依然在商业化使用,所以,有效地监控CVM携带者在奶牛群中的状况对CVM防控计划是有益的。

摘要：准确把握奶牛预产期对实施精准饲养管理具有重要意义。不同品种、不同地域的奶牛妊娠天数的长短是有差异的。为了解荷斯坦牛妊娠天数长短及其影响因素,本文收集了河南省某大型奶牛场2018年3月至2019年10月产犊的荷斯牛产犊记录5000条,就分娩季节、新生犊牛性别、使用普通冻精或性控冻精配种、新生犊牛初生体重、母牛胎次等因素对妊娠天数的影响进行分析。结果显示,产犊季节、新生犊牛性别、不同冻精、不同胎次及犊牛初生体重对奶牛妊娠天数有极显著影响(P<0.01)。

摘要：HH5是新近发现的一种荷斯坦牛隐性遗传缺陷基因,其分子机理为9号染色体上138kb大片段缺失,造成二甲基腺苷转移酶1(TFB1M)基因丢失。TFB1M基因在核糖体小亚基合成中发挥重要功能,故缺陷纯合子胚胎在发育早期死亡,造成母牛流产。HH5基因的共同祖先为1957年出生的一头加拿大著名公牛,其因在世界范围内广泛扩散,奶业发达国家已将其列为常规检测的遗传位点。本研究首先通过Sanger测序分析HH5缺陷基因,发现除了已知的138kb大片段缺失外,还存在一个9bp插入片段(TGATTACAA);该基于此特征序列,设计等位基因特异性PCR分型方法,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳即可快速分型。笔者所在团队对北京郊区某奶牛场372头荷斯坦母牛检测,发现HH5携带者12头,携带率为3.23%。本研究为我国荷斯坦牛HH5遗传缺陷基因筛查提供了一种准确便捷的分子检测方法。