摘要：采用自行设计组装的一套新型表面等离子体子共振(SPR)传感器,并通过测量计算免疫反应动力学参数——解离常数KD,对吉林地区常见的莱姆病螺旋体基因型(***型和***型)进行了鉴定研究.根据实验动物和实际病患血清的鉴定结果可以初步证明,采用波长型SPR传感器鉴定莱姆病螺旋体基因型具有操作简单、节省时间以及仪器易于小型化、便于推广等特点.

摘要：从莱姆病螺旋体染色体编码８３ｋｄ抗原蛋白（Ｐ８３）基因序列中选择编码近Ｃ端１５９个氨基酸的基因序列作为扩增的靶序列，自行设计并合成一对寡核苷酸引物，以莱姆病螺旋体Ｂ３１株基因组ＤＮＡ为模板，通过ＰＣＲ扩增得到约４７７ｂｐ的扩增片段，再把该片段与质粒载体ｐＢＫ－ＣＭＶ进行重组，经鉴定得到重组质粒ｐＢＸ１。重组质粒ｐＢＸ１可同时在真核和原核细胞中表达，其表达产物可用来制备莱姆病血清学诊断用的标准抗原；该重组质粒也可用来制备用于对莱姆病螺旋体进行分类鉴定的核酸探针。

摘要：目的以伯氏疏螺旋体标准株B31株基因组DNA为模板,PCR扩增bmpA全基因序列,定向克隆和高效表达重组BmpA并纯化。方法 1)以伯氏疏螺旋体标准株B31株基因组DNA为模板,设计定向克隆引物,PCR扩增bmpA全基因序列,定向克隆入表达载体pGEX-6p-1,酶切鉴定后转化大肠埃希菌BL21菌株,获得bmpA重组菌;2)从重组菌培养温度,诱导时间,诱导剂的剂量,菌密度(A600)等方面优化诱导条件,确定高效表达重组BmpA的最佳方案;3)用GSH柱纯化重组BmpA,探索纯化BmpA的最佳条件。结果 1)在基因水平和蛋白水平上均得到目的条带和目标峰,确定表达载体bmpA-pGEX-6p-1构建成功并表达重组BmpA;2)重组质粒在37℃,IPTG诱导浓度为0.1mmol/L,诱导时间为6h,菌液的A600值为0.5～1.0以及在LB培养基上培养GST-bmpA融合蛋白表达量达到最大;3)在最佳表达条件下1L重组菌能得到2.9～3.1mg纯化BmpA蛋白。结论成功构建了表达重组蛋白BmpA的大肠埃希菌原核表达系统,确定了高效表达重组BmpA的最佳方案,并证明用GSH柱纯化重组BmpA效果较好。

摘要：目的　构建莱姆病螺旋体PD91菌株外膜蛋白C(OspC)的表达载体 ,克隆表达OspC以便用于莱姆病诊断研究。方法　设计引物 ,用PCR从PD91扩增出ospC基因 ,定向克隆到表达载体PGEX - 5X - 1,构建重组质粒。通过PCR、酶切分析及序列测定等方法鉴定重组质粒。结果　ospC基因被正确克隆到表达载体PGEX - 5X - 1中。序列测定结果证实与国外已报道的ospC基因序列同源性在 6 5 %～ 92 %。 结论　OspC的编码基因在不同菌株间的同源性存在较大的差异。PGEX -5X - 1-ospC重组质粒的成功构建 ,为我国莱姆病特异性诊断试剂的研究奠定了基础。

摘要：为建立一个荧光定量PCR检测硬蜱体内莱姆病螺旋体的方法,根据GenBank登录的莱姆病螺旋体鞭毛蛋白FlaB序列,应用生物学软件进行序列比对,在保守的C段区设计与筛选特异引物和TaqMan探针。对荧光定量PCR反应体系与条件进行优化,验证方法的特异性、敏感性,并通过对感染螺旋体的蜱样本的检测,评价该方法的实用价值。结果显示,自然感染莱姆病螺旋体的35份蜱标本检测阳性符合率100%,正常蜱20份标本的检测结果均为阴性。该方法对牛巴贝斯原虫、泰勒原虫、边缘无浆体、金龟子绿僵菌、大肠杆菌等蜱体常见病原微生物所抽提的DNA的检测均呈阴性。荧光定量PCR方法检测质粒的灵敏度可达1×102拷贝/μL。TaqMan荧光定量PCR方法检测硬蜱体内莱姆病螺旋体具有较好的敏感性和特异性,可适于莱姆病的流行病学调查和监控。

摘要：目的了解某市医院临床护理人员对莱姆病相关知识的知晓情况,为莱姆病临床护理工作提供科学依据。方法自行设计问卷调查表,随机抽取3所医院护理人员,对提前设定好的问卷调查表限时作答上交,汇总分析。结果本次调查发放调查表280份,有效问卷回收率100. 00%;问卷结果仅0. 71%护理人员卷面回答全部正确,知晓率较高的相关知识是莱姆病神经损害型临床表现(67. 50%)和眼型临床表现(59. 64%),而在临床工作中仅0. 71%工作人员接触过莱姆病病例,其余人员对莱姆病相关知识知晓欠缺。结论某市3所医院临床护理人员总体对莱姆病相关知识知晓欠缺,直接影响莱姆病临床护理质量和治疗效果。

摘要：目的:复习小儿莱姆病在急诊科特定区域内的临床特征和诊断评估。设计:对确诊为莱姆病的儿科病人的人口统计资料、病史、临床表现和实验数据进行回顾性研究。工作地点:一所市区大学医院的儿科急诊室。参加者:1992年-1994年三年间诊治的莱姆病儿童。结果:29名儿童年龄3-19岁,在儿科急诊科就诊诊断为莱姆病。其中4名患儿有早期局部游走性红斑和不同程度的全身症状:10名为早期播散性莱姆病,伴有多发游走性红斑、神经受累(包括3名假性脑瘤患者)或心肌炎;其余15例晚期莱姆病患者伴有关节炎这些病例诊断特别困难,有7名儿童开始诊断为脓毒性关节炎,其中6名行关节切开术。这些病人血沉明显增快,且关节液可见白细胞,基于这些实验室检查结果来区分化脓性关节炎和莱姆病是困难的。结论:莱姆病是一种不常见的疾病,就诊于急诊科的儿童通常难以诊断。其中以早期播散性和晚期病变为主,典型游走性红斑在急诊科较其它科室少见。确诊莱姆病关节炎可能是困难的,疫区接触史和临床表现可有助于与化脓性关节炎鉴别。总之,事实上在急诊科对莱姆病的漏诊远多于误诊。急诊工作者识别莱姆病需要熟悉该病的流行病学知识和它的多种临床表现。

摘要：为了解新疆北疆地区硬蜱携带莱姆病病原伯氏疏螺旋体的流行现状,选择莱姆病病原伯氏疏螺旋体5S-23S rRNA基因间隔区设计嵌套式引物,建立了具有较高敏感性和特异性的伯氏疏螺旋体套式PCR检测方法,应用该方法对2018—2019年在新疆北疆6个地区采集的硬蜱进行伯氏疏螺旋体带菌率检测。结果显示:伯氏疏螺旋体总阳性率为15.17%(81/534),其中青河县阳性率最高,达23.64%(26/110)。提示:应进一步加强及重视北疆地区莱姆病的防控工作。

摘要：本试验采用重组酶介导等温核酸扩增(RAA)技术建立伯氏疏螺旋体核酸的检测方法。根据伯氏疏螺旋体16S rRNA基因保守序列设计并合成特异性RAA引物,采用重组酶介导扩增技术电泳法,以10倍系列稀释1 ng/μL伯氏疏螺旋体B31基因组DNA为模板进行RAA,测定该方法的敏感性。通过对大肠杆菌、沙门菌、钩端螺旋体基因组DNA扩增验证该方法的特异性。结果显示,该方法对伯氏疏螺旋体标准株的B31基因组DNA检测限约为100 fg/μL,对大肠杆菌、沙门菌、钩端螺旋体均无扩增,具有良好的特异性。RAA具有特异性高、检测快速、灵敏等优点,本研究建立的伯氏疏螺旋体RAA检测方法,为伯氏疏螺旋体临床样本的快速诊断提供依据。