摘要：运用响应面法对黑曲霉(Aspergillus niger)产葡萄糖氧化酶以及发酵条件进行了优化。根据单因素实验结果,利用Plackett-Burm an设计对影响其产酶相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的3个因素:葡萄糖,玉米浆和碳酸钙。用最陡爬坡试验逼近以上3个因子的最大响应区域后,采用Box-Behnken设计以及响应面分析法,确定其优化后发酵条件为(g/L):葡萄糖172.11、玉米浆11.05、碳酸钙52.29、牛肉蛋白胨3.5、(NH4)H2PO40.5、KC l0.15、MgSO4·7H2O 0.125、FeSO4·7H2O 0.125,220 r/min,30℃培养48 h。优化后的葡萄糖氧化酶酶活达786.3U/g,比在种子培养基中酶活350.5U/g提高了2倍左右。

摘要：本研究采用闪式提取技术提取蚯蚓葡萄糖氧化酶(GOD)。利用正交设计优化实验条件,得到最优条件为:固液比1∶4.5(g/m L),闪提时间45 s,超声时间30 min。通过酸沉淀,羧甲基纤维素CM-22离子交换层析和DEAE离子交换层析实现了GOD的纯化,回收率达到了60.8%,比活达到了2684.2 m U/mg,纯化倍数达到37.2倍。

摘要：为了提高葡萄糖氧化酶的产量,通过响应面法对诱变后的黑曲霉菌株的发酵条件进行优化,首先利用Plackett-Burman设计筛选出对酶活影响最显著的因素:牛肉膏蛋白胨、吐温-60和磷酸氢二铵;继而用最陡爬坡实验逼近最大影响区域;最后利用Box-Behnken设计及其响应面分析确定最优的发酵培养基(g/L):蔗糖87.5,牛肉膏蛋白胨3.15,NH4NO31.88,(NH4)2HPO40.34,KH2PO40.25,Tw-60 30.47,玉米粉12.5,培养基优化后的发酵酶活为87.5 U/m L,与优化前(45.27 U/m L)相比提高了93.28%。在7 L发酵罐中对显著影响因素吐温-60的不同添加时间进行对比,确定对数期流加吐温-60可以显著提高发酵的酶活,发酵后酶活为92.88 U/m L。

摘要：以4-巯基苯甲酸修饰纳米金粒子作为固酶载体和导电基体构建了新型纳米结构固酶葡萄糖/O2燃料电池,其制备简单,长期使用性能稳定。利用纳米金粒子通过表面修饰基团和酶分子活性中心附近疏水结合位之间的相互作用固定葡萄糖氧化酶（GOx）和漆酶（Lac）分子,分别制备了固酶阳极—4-巯基苯甲酸功能化纳米金粒子固定葡萄糖氧化酶修饰金盘电极GOx/4-MBA@GNP/Au和固酶阴极—4-巯基苯甲酸功能化纳米金粒子固定漆酶修饰金盘电极Lac/4-MBA@GNP/Au。电化学实验结果表明,两种电极在不引入任何外加电子中介的条件下,均可以实现酶活性中心-纳米金粒子之间的直接电子迁移,而且具有较快的催化反应能力（固酶阳极和阴极的转化速率分别为1.3和0.5 s^-1;催化葡萄糖氧化和氧气还原的起始电位分别为-0.23和0.76 V）。评估了固酶阳极和阴极组装成的纳米结构固酶葡萄糖/O2燃料电池的能量输出性能。该燃料电池在没有Nafion薄膜和阳极无N2气保护下,开路电压和最大输出能量密度分别可达0.56 V和760.0μW/cm^2,使用一周后输出能量密度仍然可以达到最初值的-88%。进一步测试结果显示,该燃料电池呈现出与游离漆酶类似的p H依赖关系和热稳定性,这些实验结果均暗示：影响整个酶燃料电池性能的关键在于漆酶基阴极催化氧还原的过程。此外,这种燃料电池的性能虽然受到共存干扰物抗坏血酸的影响,但在人类血清中测试结果显示其仍然具有较高的输出能量密度（132.0μW/cm^2,开路电压0.40 V）。本文研究结果给出了设计高性能葡萄糖/O2燃料电池的新思路,同时也为研究固酶燃料电池的构效关系提供了实验依据和有价值的启示。

摘要：以黑曲霉H1-9b(Aspergillus niger H1-9b)作为葡萄糖氧化酶生产菌株,通过单因素和正交试验设计,优化提高酶活力的发酵条件。结果表明:最佳反应条件为:接种量200μL孢子悬液、装液量80mL、初始pH5.3、转速200r/min、表面活性剂吐温-80添加量3%。在此条件下,葡萄糖氧化酶活力提高到68.96U/mL,为不添加吐温-80发酵产酶量28.60U/mL的2.4倍。

摘要：从黑曲霉中克隆葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,E.C.1.1.3.4,GOD)基因,使其在毕赤酵母GS115中高效表达,为葡萄糖氧化酶的工业化生产提供理论依据。通过设计简并引物,扩增GOD,将该基因连接到质粒pPICZαA上并在毕赤酵母中表达,依据摇瓶水平优化最佳诱导产酶条件,在30 L发酵罐中进行发酵放大试验,共表达His4,采用DO-STAT的甲醇流加策略进行高密度发酵。结果表明,重组毕赤酵母GS115/pPICZαA-GOD在摇瓶水平经0.5%甲醇诱导96 h,发酵液上清GOD酶活达到32.25 U/mL。经优化得到最佳发酵条件为:在30℃、pH 6.0、250 r/min条件下,发酵液体积1%的甲醇诱导96 h,GOD酶活达到50.1 U/mL,相比初始发酵,酶活提高了55.3%。经30 L发酵罐放大试验,GOD酶活达到307.52 U/mL,提高了5.1倍。共表达His4使细胞湿重提高了72.5%,GOD酶活达到了461 U/mL,相比初始重组酵母提高了50.2%。SDS-PAGE分析发现GOD分子量约90 kD。重组GOD能在毕赤酵母中高效表达,且表达产物纯度高,杂蛋白少,有利于纯化。

摘要：本试验旨在研究葡萄糖氧化酶(GOD)对蛋鸡生产性能的影响。试验采用单因子随机分组试验设计,选取24000只55周龄的罗曼粉壳蛋鸡,随机分成2组,每组12个重复,每个重复1000只鸡,正式期12周。采用玉米-豆粕型粉状饲粮,试验组在对照组饲粮基础上添加300mg/kg GOD。试验结果表明,蛋鸡产蛋后期(55-67周龄)基础饲粮添加300mg/kg葡糖糖氧化酶,提高产蛋率2.88%(P<0.05),显著降低了料蛋比2.69%(P<0.05),极显著降低破蛋率和死亡率(P<0.01)。综合效益考虑,产蛋后期饲粮添加300mg/kg的GOD能较好地改善蛋鸡生产性能,特别是降低破蛋和死淘的效果极显著。

摘要：以产黄青霉A4(Penicillium chrysogenum A4)作为葡萄糖氧化酶胞外酶生产菌株,通过单因素和正交设计实验,优化提高酶活的发酵培养基组分。结果表明:最佳发酵培养基成分组合为:碳源(葡萄糖)10%、有机氮源(麦芽浸粉)0.5%、无机氮源(Na NO3)1.7%。在最佳培养基上研究得到的发酵条件为:接种量1 m L、装液量50 m L、培养温度30℃、培养时间6 d。在此条件下,葡萄糖氧化酶活力提高到17.2 U/m L,为初始发酵酶活的17.2倍。

摘要：本试验旨在研究葡萄糖氧化酶对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响.试验采用单因子随机分组试验设计,选取24000只55周龄的罗曼粉壳蛋鸡,随机分到2个处理组,各处理组12个重复,每个重复1000只鸡,正式试验期12周.采用玉米-豆粕型粉状饲粮,试验组在对照组饲粮基础上添加300mg/kg葡萄糖氧化酶.试验结果表明,蛋鸡产蛋后期(55~67周龄)基础饲粮添加300mg/kg葡糖糖氧化酶,显著提高产蛋率2.88%(P<0.05),显著降低了料蛋比2.69%(P<0.05),极显著降低破蛋率19.62%(P<0.01),极显著降低周死亡率40.9%(P<0.01).综合效益考虑,产蛋后期饲粮添加300mg/kg的葡萄糖氧化酶能较好地改善蛋鸡生产性能,特别是降破蛋和死淘的效果极显著.

摘要：以苹果果汁为原料,研究葡萄糖氧化酶对苹果汁在加工贮藏过程中主要褐变因素的影响,在单因素试验基础上,利用Box-Behnken响应面试验设计优化葡萄糖氧化酶抑制苹果汁褐变的最佳工艺条件为:酶添加量0.4%,作用温度37℃,作用时间35min,所得苹果汁褐变指数为0.154。此工艺条件下,葡萄糖氧化酶抑制苹果果汁褐变效果最佳。