摘要：本次试验以藏茴香叶片为试验材料,采用单因子设计和L_(16)(4~5)正交设计试验相结合的方法,对影响藏茴香ISSR-PCR扩增结果的Taq酶、引物、Mg^(2+)、dNTPs和DNA用量进行优化,并在此基础上,筛选出最适的循环次数和退火温度。结果表明正交试验各因素显著性为Mg^(2+)浓度>dNTPs浓度>Taq酶>DNA用量>引物浓度。在25μL的反应体系中,Taq酶1.0 U、引物0.6μmol/L、Mg^(2+)1.5 mmol/L、dNTPs 0.20 mmol/L、DNA 40 ng为最佳用量,最佳退火温度为55℃,最佳循环次数为30。用不同的引物和不同的藏茴香种质对优化的ISSR-PCR反应体系进行验证,表明确定的优化体系具有稳定性高、重复性好等特性。该反应体系的建立为藏茴香ISSR标记的开发、种质资源的鉴定、遗传多样性分析和分子标记辅助选择育种等提供科学依据。

摘要：本试验通过正交设计对藏茴香中挥发油提取工艺条件进行筛选，其结果表明不粉碎药材，加１０倍量水，浸泡１小时，前回流０．５小时。