摘要：目的探讨虫草素(cordycepin,COR)减轻庆大霉素(gentamicin,GEN)肾毒性的作用及其抑制GEN诱导的氧化应激和细胞铁死亡的分子机制。方法将SD大鼠分为对照组、GEN组与GEN+COR组3组,动物模型构建成功后,检测各组大鼠血清肌酐和尿素氮水平,HE染色评价肾脏组织损伤程度。另外,检测各组SD大鼠肾脏组织中丙二醛和谷胱甘肽含量,并通过Western blot的方法分析细胞铁死亡标志蛋白GPX4、SLC7A11表达。结果与对照组相比,GEN组大鼠血清肌酐、尿素氮明显升高(P<0.01),同时给予50 mg·kg-1 COR后有效降低肌酐与尿素氮水平,HE结果也显示COR能够缓解GEN造成的肾脏组织损伤;COR可逆转GEN造成的大鼠肾脏组织中丙二醛水平升高与谷胱甘肽水平下降。同时,COR能够恢复GEN诱导的GPX4、SLC7A11蛋白水平下降。结论COR能够通过减轻细胞氧化应激与铁死亡缓解GEN造成的肾损伤。

摘要：目的:研究虫草素通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路抑制大鼠肩袖损伤后脂肪浸润的作用及其机制,为临床治疗肩袖损伤提供理论依据。方法:SPF级雌性SD大鼠50只,随机选取10只作为正常组,采用冈上肌肌腱和肩胛上神经压迫建立肩袖损伤修复模型,将手术成功的大鼠按照随机区组设计分为模型组、虫草素低、中、高剂量组(20、40、80 mg·kg^(-1))。治疗6周后,采用步态分析评估大鼠肢体功能;油红O染色和马松(Masson)染色观察肌肉组织病理变化情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;免疫组化(IHC)检测脂肪形成标记物氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Wnt3a、Wnt10b、β-catenin mRNA和蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠步幅长和爪印面积显著下降(P<0.01),湿肌质量减少比率明显升高、肌纤维横截面积明显下降(P<0.05),脂肪浸润面积比率下降、胶原纤维面积比率显著下降(P<0.01),IL-1β、IL-6和TNF-α含量明显上升(P<0.05),PPARγ、C/EBPα蛋白表达均显著升高(P<0.01),Wnt3a、Wnt10b、β-catenin mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,虫草素低、中、高剂量组大鼠步幅长和爪印面积均显著升高(P<0.01),湿肌质量减少比率明显降低、肌纤维横截面积明显升高(P<0.05),脂肪浸润面积比率和胶原纤维面积比率明显升高(P<0.05,P<0.01),IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显下降(P<0.05,P<0.01),PPARγ、C/EBPα蛋白表达均显著降低(P<0.01),Wnt3a、Wnt10b、β-catenin mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:虫草素能显著改善大鼠肢体功能,减轻大鼠肩袖肌肉萎缩、脂肪浸润及纤维化程度,并能抑制炎症反应,其机制与调控Wnt/β-catenin信号通路相关。

摘要：采用乳化离子交联法制备虫草素羧甲基壳聚糖纳米粒(1-CMC-NPs)。通过单因素试验和正交设计,以粒径和包封率为指标优化处方组成。结果表明,优化后1-CMC-NPs的包封率和载药量约为70%和9%,平均粒径约为148 nm,?电位约为-25 m V,外观呈球形或类球形。差示扫描量热(DSC)和X射线衍射(XRD)分析结果提示纳米粒中药物可能以无定形存在。体外释放试验中,1-CMC-NPs在不含及含血清的磷酸盐缓冲液(p H 7.4)中,48 h累积释放率为68.1%和80.4%,与其溶液相比,呈现明显的缓释效果。

摘要：目的：研究并建立用蛹虫草固体发酵方式高效生产虫草素的最佳方法。方法：通过对不同菌株在固体发酵过程中各生长期的虫草素含量变化进行跟踪测定以及正交旋转组合设计、正交试验设计等方法，影响虫草素产量和含量的各影响因子（包括菌种、生长期、培养基配方和环境条件等）进行系统优化。结果：JF-1是虫草素生产的最佳菌株，现蕾期是收获提取虫草素的最佳时期；最佳的培养基配方为水料比1．1：1（mL·g^-1营养水中酵母膏、蛋白胨、葡萄糖的用量分别为22．6，6．0，25．4g·L^-1水pH6．6；最佳的环境条件为：光照强度4400lx，每13光照时间18h，温度18—22℃。结论：用以上方法固体发酵生产虫草素，经过约13d的培养，培养基中虫草素达到0．60％，比传统液体发酵方法的最高产量高近2倍，并且培养时间缩短2d。

摘要：目的建立血浆虫草素及代谢物3’-脱氧肌苷(3′-Deo)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法,研究其在大鼠体内的药动学。方法以2-氯腺苷(2-Chl)为内标,甲醇沉淀蛋白,色谱柱为Kinetex C18(3 mm×100 mm,2.6μm),流动相为水(5 mmol·L^(-1)乙酸铵)-甲醇溶液,梯度洗脱。电喷雾离子源,正离子多反应监测。研究大鼠灌胃虫草素(10 mg·kg^(-1))后血浆虫草素及3′-Deo药动学。结果虫草素和3′-Deo分别在0.5~100和1~200 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好,定量下限分别为0.5和1 ng·mL^(-1)。大鼠灌胃虫草素后,血浆虫草素浓度较低,主要转化为3′-Deo。虫草素和3′-Deo的峰浓度(C_(max))分别为(5.4±3.4)和(142.0±50.0)ng·mL^(-1),血药浓度-时间曲线下面积(AUC_(0-360 min))分别为(658.4±459.3)和(18034.9±4981.1)ng·min·mL^(-1)。结论该方法简单、灵敏、准确,适用于虫草素与3′-Deo血药浓度测定及药动学研究。

摘要：虫草素(cordycepin,1)化学名称为3’-脱氧腺苷,是嘌呤类生物碱,也是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗菌素,由Cunningham于1951年发现并命名。虫草素具有抑菌抗炎、抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性[1],对真菌、细菌、病毒等多种病原体具有广泛的抑制作用[2]。在抗肿瘤方面,虫草素能够有效抑制口内鳞状癌、黑色素癌及宫颈癌细胞增殖,并对白血病有一定的治疗作用。

摘要：对蛹虫草14014产虫草素的静置发酵培养基和发酵条件进行了优化,旨在探寻大规模制备虫草素的工艺方法。为了提高数理统计的精度,缩短发酵周期,通过单因素实验,获得了种龄为3d,接种量为10%的液体培养物最佳接种方式。通过Placket-Burman设计从7个因素中筛选出了有显著影响的温度、酵母膏和蛋白胨三个因素。通过最陡爬坡实验、中心复合实验设计及响应面分析确定主要影响因素的最佳值及回归模型,并经实验验证模型的可行性。最佳培养基组成和培养条件为:葡萄糖60g/L,KH2PO40.7g/L,MgSO4·7H2O 0.7g/L,酵母膏9.00g/L,蛋白胨17.10g/L,初始pH6.30,温度27.1℃。在优化条件下,虫草素产量达到6.50g/L,含量比优化前提高2倍。

摘要：为了优化超高压提取蛹虫草汁中虫草素溶出量工艺,以压力、时间、料液比和循环次数为自变量,虫草素溶出量为响应值,进行响应面试验设计与优化,并建立预测数学模型。结果表明:虫草素超高压提取的最佳工艺为压力418 MPa、时间33min、料液比1:2(m:V)、循环1次,该条件下虫草素溶出量为(84.69±1.65)mg/g·提取物,与预测值(84.03mg/g·提取物)的相对标准偏差为0.61%,获得的数学模型能够用于预测超高压提高蛹虫草汁中虫草素溶出量的过程。

摘要：采用丝瓜络作为蛹虫草孢子附着点和植物油吸附基质,经半固态发酵生产虫草素,旨在提高液体表面培养的比表面积,进一步提高虫草素产量。利用单因素和Box-Behnken试验设计分别对玉米油和橄榄油条件下的加液量、孢子接种量和发酵温度进行响应面优化。结果表明,虫草素最佳工艺条件为:植物油用玉米油,加液量为3.0 mL/g,孢子接种量为9.49%,发酵温度为27.3℃,相对湿度90%。在优化后的发酵条件下,虫草素产量达到10.13 g/L,比初始半固态发酵虫草素产量提高了76.48%。综上,发酵温度的控制是获得虫草素高产的关键因素。蛹虫草丝瓜络半固态发酵能够通过提高比表面积获得较高的虫草素产量,为大规模工业化虫草素生产提供理论支持。

摘要：【目的】优化蛹虫草子座培养剩余基质中虫草素的提取工艺。【方法】以蛹虫草子座培养剩余基质为材料,采用二次通用旋转组合设计,研究提取温度、提取时间、液料比及提取液pH对虫草素提取得率的影响,建立虫草素提取得率与4个因素间的关系模型,分析其单因子和交互影响效应,通过参数优化得到虫草素的最佳提取工艺条件。【结果】4个因素对虫草素提取得率的影响大小依次为液料比>提取温度>提取液pH>提取时间。在最佳提取工艺条件下,即提取温度为63.3℃、提取时间为4.8h、液料比为36.8、提取液pH为6.7时,虫草素得率可达1.32‰。【结论】获得了从蛹虫草子座培养剩余基质中高效提取虫草素的优化工艺。