摘要：目的探讨人眼巩膜组织中亮蛋白聚糖基因mRNA水平与高度近视及青光眼的相关性。方法2009年10月至2010年12月在首都医科大学附属同仁医院住院行抗青光眼手术的原发性开角型青光眼患者21例及自愿捐献角膜的健康成年人12例（正视眼）。11例行抗青光眼手术的原发性开角型青光眼患者（不伴有高度近视）及10例行抗青光眼手术的原发性开角型青光眼患者（伴有高度近视）术中切除的眼前节巩膜组织。提取巩膜组织中总RNA，针对亮蛋白聚糖基因设计特异性引物进行逆转录多聚酶链反应（***）检查，用凝胶分析系统测定各样本B肌动蛋白和亮蛋白聚糖基因PCR反应产物电泳条带灰度值，采用单因素方差分析进行比值（13肌动蛋白电泳条带灰度值／亮蛋白聚糖电泳条带灰度值）的统计分析。结果B肌动蛋白／亮蛋白聚糖比值在青光眼伴高度近视组[0．29±0．10]和青光眼组[0．29±0．10]之间比较，差异无统计学意义（P〉0．05），而与正常对照组[2．67±1．05]比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论高度近视候选基因亮蛋白聚糖与高度近视可能不相关，但可能与青光眼存在一定相关性，尚有待进一步研究。

摘要：目的探讨抑制opticin蛋白表达对牛玻璃体细胞与视网膜色素上皮（RPE）细胞共培养胶原凝胶收缩系统的调控作用。方法实验研究。设计并转染OPTC-shRNA质粒至体外培养的牛RPE细胞，通过免疫印迹法检测转染后3、5、7dopticin蛋白的相对表达量和抑制率。在牛I型胶原凝胶内加入牛玻璃体细胞和RPE细胞，构建细胞共培养的胶原凝胶体外收缩模型。实验共分为6组：OPTC-shRNA质粒转染RPE及玻璃体细胞组（A组）、空质粒转染RPE及玻璃体细胞组（B组）、未转染RPE及玻璃体细胞组（c组）、仅含未转染RPE细胞组（D组）、仅含玻璃体细胞组（E组）以及不含任何细胞空白对照组（F组）。应用One—wayANOVA、SNK-q检验和单因素回归分析比较各组凝胶收缩差异，并分析A、B、C组玻璃体细胞数的差异对胶原凝胶收缩性状的影响。结果成功构建并转染了有显著抑制作用的OPTC—shRNA质粒至牛RPE细胞。免疫印迹法检测结果显示，opticin蛋白表达抑制率在转染后3、5、7d分别为（83．91±2．88）、（84．71±4．27）、（82．85±2．72）％，差异无统计学意义（F=1．15，P〉0．05）。胶原模型构建后3d，A、B、C组中不同密度（2×10^7、1×10^8、5×10^8个／L）亚组玻璃体细胞密度凝胶收缩率分别为A组：（23．52±2．08）、（56．00±1．02）、（61．62±1．73）％；B组：（16．56±2．01）、（36．41±1．33）、（49．56±1．75）％；C组：（15．75±1．37）、（37．45±1．14）、（48．45±1．97）％，D、E组凝胶收缩率分别为（12．18±0．95）、（10．95±0．93）％，F组未观察到凝胶收缩。在相同玻璃体细胞密度下A、B、C组间凝胶收缩性两两比较，2×10^7个／L细胞密度：A组与B组、A组与C组间差异有统计学意义（q=11．38、12．72，P值均〈0．05）；B组与C组间差异无统计学意义（q=1．34，P〉0．05）；1×10^8个／L细胞密度：A组与B组、A组与c组差异有统计学意义（q=48．83、46．22，P值均〈0．05）；B组与C组差异无统计学意义（q=-2．61，P〉0．05）；5×10^8个／L细胞密度：A组与B组、A组与C组间差异有统计学意义（q=48．83、46．22，P值均〈0．05）；B组与C组间差异无统计学意义（q=1．74，P〉0．05）。A、B、c各组内不同玻璃体细胞密度之间凝胶收缩性两两比较（2×10^7个／L与1×10^8个／L、2×10^7个／L与5×10^8个／L、2×10^7个／L与2×10^7个／L）：A、B、C3组内各细胞密度之间差异均有统计学意义（A组：q=-55．97、-65．66、-9．69；B组：q=-34．53、-57．41、-22．88；C组：q=-41．94、-63．19、-21．25；P值均〈0．05）。进一步对组内不同玻璃体细胞密度与对应的凝胶收缩率进行回归分析，结果显示，共培养模型的凝胶收缩率与其中的玻璃体细胞密度呈一定的正相关性（A、B、C组r=0．919、0．981、0．937，P值均〈0．05）。D、E、F组凝胶收缩率两两比较，D组与E组、D组与F组、E组与F组差异均有统计学意义（q=54．87、49．33、5．54，P值均〈0．05）。结论opticin蛋白可调控牛玻璃体细胞与RPE细胞共培养胶原凝胶收缩性状。

摘要：背景:真皮的细胞外基质由胶原蛋白、弹性蛋白和其他基质成份组成。组织工程化人工皮肤作为一种体外皮肤模型应当具有合成、分泌和分解细胞外基质功能。目的:观察组织工程化人工皮肤胶原蛋白和蛋白多糖的代谢。设计:单一样本观察。单位:北京大学深圳医院皮肤科。材料:转铁蛋白;胰蛋白酶;3H-脯氨酸;天狼星红等。方法:实验于2000-06/2004-12在北京大学深圳医院皮肤科和吉林大学再生医学科学研究所完成。①参照文献进行组织工程化人工皮肤的制备。②3H-脯氨酸掺入法测定组织工程化人工皮肤合成胶原蛋白能力,于培养第1,2和3周的人工皮肤培养板孔中,分别加入3H-脯氨酸,培养4h,并与天然皮肤做对照。③苦味酸-天狼星红染色观察组织工程化人工皮肤合成、分泌胶原蛋白的功能;AB-PAS染色测定组织工程化人工皮肤合成、分泌蛋白多糖功能;均于培养第1,2,3,4和6周进行观察。主要观察指标:①组织工程化人工皮肤合成、分泌蛋白多糖测定结果。②组织工程化人工皮肤合成、分泌胶原蛋白的功能。③3H-脯氨酸掺入实验结果。结果:①培养第7,14天的组织工程化人工皮肤3H-脯氨酸掺入值与天然皮肤相近,培养第21天的组织工程化人工皮肤3H-脯氨酸掺入值明显高于天然皮肤。②培养的组织工程化人工皮肤,在偏振光显微镜下可见到有成束的红色双折光物质和细的绿色双折光物质。单纯基质网架只见到红色双折光物质。③培养第1,2周的组织工程化人工皮肤Ab-PAS染色阴性,单纯网架Ab-PAS染色呈阴性,培养第3～6周的组织工程化人工皮肤Ab-PAS染色阳性。结论:构建的组织工程化人工皮肤具有合成、分泌细胞外基质胶原蛋白和蛋白多糖的功能。

摘要：背景:蛋白多糖是软骨终板的主要组成部分,是维持椎间盘力学性能的生化基础。目的:通过测定退行性变颈椎间盘压缩性能及观测软骨终板基质蛋白多糖的变化,为退行性变的椎间盘显现异常力学特性作一分子机制上的探讨。设计:随机对照实验研究。地点和对象:实验在浙江中医学院生物力学室完成。对象为清洁级日本大耳白家兔24只,由浙江中医学院实验动物中心提供。干预:将24只家兔随机分为对照组和模型组,模型组家兔保持45°低屈曲位5h/(次·d)。于造模后1,2,3月测量力学观察指标和糖胺多糖,分析颈椎间盘退变时基质各成分的系统变化及其对椎间盘力学性能的影响。主要观测指标:椎间盘生物力学性能,椎间盘终板糖胺多糖总量,硫酸软骨素和硫酸角质素比值和透明质酸含量。结果:模型组终板抗压强度、断裂时的最大形变、终板基质蛋白多糖总含量、硫酸软骨素/硫酸角质素比值、透明质酸含量都低于对照组(t=1.78～6.23,P<0.05),并随造模进程的深入而减小。结论:长时间的应力不均状态,造成椎间盘终板材料力学特性改变;颈椎间盘基质蛋白多糖含量和成分改变是颈椎间盘生物力学性能减退的主要原因之一。