摘要：根据已发表的犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)Onderstepoort株序列设计1对引物,RT-PCR法扩增出约1 000 bp的融合蛋白基因片段,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pMD18-T载体。序列分析表明CDV蓝狐分离株F蛋白基因片段由1 044 bp组成,编码348个氨基酸,与其它CDV25259株、2544-Han95株、A75-17株、DOGDK91C株、5804P株、ONP株、PDV-2株核苷酸序列同源性分别为94.5%、94.1%、94.7%、94.2%、94.2%、97.6%和94.9%;氨基酸序列的同源性分别为98.6%、97.1%、98.0%、98.0%、98.3%、97.7%和98.6%;与其它CDV毒株相比,蓝狐分离株存在核苷酸缺失突变(1 030位～1 038位)和氨基酸缺失突变(344位～348位)。

摘要：根据GeneBank中报道的NDV融合蛋白基因（F）序列，设计了一对特异性引物，用该引物对NDVLN—SN株进行了RT—PCR扩增；将扩增得到的PCR片段纯化后与pGEM—T连接得到重组质粒pGEM—F，用于核苷酸序列测定。结果该基因ORF长1662bp，编码553个氨基酸；将LN—SN毒株与GeneBank中已报道的NDV毒株进行比较，F基因核苷酸序列的同源性在83．4％～99．9％之间，推导的F蛋白氨基酸序列的同源性在88．4％-99．8％之间。

摘要：参考禽副粘病毒的融合蛋白基因 (F基固 )cDNA序列 ,设计并合成了 1对引物 ,以分离到对鹅有致病力的Ⅰ型禽副粘病毒GPMV/QY97 1株的核酸 (RNA)为模板 ,用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)对其融合蛋白基因 3′端进行扩增 ,获得了预计的 884bp左右的片段。将该片段克隆进 pGEM TEasy质粒载体 ,获得重组质粒T GPMVF3′ ,采用限制性内切酶和PCR方法对该重组质粒进行鉴定 ,证明所克隆的片段即为目的基因片段 。

摘要：根据GenBank中报道的NDV融合蛋白基因(F)序列,设计了一对特异性引物,用该引物对所分离的LN-SN株进行了RT-PCR扩增;将扩增得到的PCR片段纯化后与pGEM-T连接得到重组质粒pGEM-F,用于核苷酸序列测定。结果该基因ORF长1662bp,编码553个氨基酸;将LN-SN毒株与GenBank中已报道的NDV毒株进行比较,F基因核苷酸序列的同源性在83.1%～98.9%之间,推导的F蛋白氨基酸序列的同源性在88.1%～99.5%之间。

摘要：为研究犬瘟热病毒（ＣＤＶ）融合蛋白各段功能，根据ＣＤＶＯｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株的融合蛋白基因序列，设计合成了１０条寡聚核苷酸引物。对此１０条引物进行不同的配对，将１株犬瘟热疫苗弱毒株细胞培养物的总ＲＮＡ进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增，利用１次ＰＣＲ扩增得到了７个基因片段，最长的达１６６９ｂｐ，最短的为３１４ｂｐ；应用套式或半套式ＰＣＲ。

摘要：参照GenBank发表的相关猪源副粘病毒和禽源副粘病毒融合蛋白F基因核苷酸序列,设计并合成了4对引物,采用RT-PCR技术对本研究室分离的猪源副粘病毒JL-1株F基因进行探索性扩增、序列测定,在此基础上设计引物扩增HN基因、进行序列测定,分析F、HN基因序列,对该病毒进行分子鉴定。结果显示,扩增出了JL-1株F、HN基因目的条带,序列分析表明其与猪源副粘病毒病家族其他成员即蓝眼病病毒、尼帕病毒、梅那哥病毒同源性很低,与禽副粘病毒1型(APMV-1)具有高度同源性。初步确定分离的猪源副粘病毒为禽副粘病毒1型。

摘要：选择NDV融合蛋白保守的编码区域 ,设计并合成了一对外引物和一对内引物 ,建立并优化了检测新城疫病毒核酸的逆转录套式PCR法 ,通过检测NDV感染的实验室病料和临床病料。结果表明 ,逆转录套式PCR法最低能鉴别出约 0 .3pg的NDVRNA ,攻毒后第 8天还能从非免疫鸡和SPF鸡泄殖腔拭子中检出NDV ,第 8天非免疫鸡泄殖腔拭子中NDV的最大检出率为 5 / 10 ,第 8天SPF鸡泄殖腔拭子中NDV的最大检出率为 6/ 10。对非免疫鸡和SPF鸡的泄殖腔中NDV最佳检出时间均在攻毒后第 5天。逆转录套式PCR方法对临床样品中NDV的最大检出率为 6/ 7。经核酸杂交验证 ,该法具有很高的特异性和敏感性 ,也比较简便快速 ,为从分子水平探讨NDV的发病机理、临床早期快速诊断提供了新的研究手段。

摘要：本研究通过对大量不同毒力NDVF基因核苷酸序列分析 ,根据毒力和序列间的相关规律 ,分别设计合成了两组引物 ,建立了一个可以迅速鉴别NDV强、弱毒株的RT_PCR方法 ,对强毒株可扩增出 133bp的特异性片段和 36 2bp的通用片段 ,弱毒株可以扩增出 2 5 2bp的特异性片段和 36 2bp的通用片段。只需一个RT_PCR反应 ,整个实验过程可在 5小时内完成。敏感性测定结果表明该方法的最低检出量不低于 5 0 0pg的NDVRNA。为了增加方法的实用性 。

摘要：依据新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因裂解位点的核苷酸序列与其毒力的相关规律,分别设计合成了四条寡核苷酸引物,建立了一个可迅速检测不同禽源新城疫毒株并可鉴定强、弱毒株的逆转录酶—聚合酶链式反应(RT—PCR)技术。对强毒株可扩增出362bp的通用片段和254bp的强毒株特异性片段;弱毒株则可扩增出362bp的通用片段和123bp的弱毒株特异性片段。本方法只需一个RT—PCR反应,整个过程在8小时内完成,既可检测感染鸡胚尿囊液,也可从病料直接检测。应用该方法对源于各种禽类的36份ND可疑病料样品进行检测试验,结果阳性检出率为73.5%,与常规方法检测的结果相一致。

摘要：本研究通过对不同毒力的新城疫病毒 (NDV)的融合蛋白基因 (F基因 )核苷酸序列分析 ,根据毒力和序列间的相关规律 ,分别设计出 3对引物P1+P2 ,P1+P3,P1+P4 ,建立了一种可以迅速鉴定新城疫病毒并且同时鉴别毒株毒力强弱的RT -PCR方法。引物P1+P2能特异性地对所有新城疫病毒可扩增出一条 36 2bp的片段 ,引物P1+P3能特异性地针对所有新城疫强毒株扩增出一条 2 5 4bp的片段 ,引物P1+P4能特异性地针对所有新城疫弱毒株扩增出一条 2 5 4bp的片段 ,整个试验过程可在 6小时内完成。对实验室分离的 4株病毒进行检测 ,结果同常规检测方法的结果一致。