摘要：[目的]建立一个用于血小板抗原HPA-2、-3、-15基因分型的多重PCR和毛细管电泳(CE)方法,用其调查大连地区汉族人群HPA-2、-3、-15系统的基因频率。[方法]分别设计HPA-2、-3、-15等位基因序列特异性引物和一条公共引物,用荧光标记公共引物。多重PCR法扩增HPA-2、-3、-15。然后用毛细管电泳检测扩增产物,并根据产物片段长度的差异进行基因分型。将多重PCR-CE与常规PCR-SSP方法相比较。将获得的大连地区汉族人群HPA-2、-3、-15系统基因分型数据与国内其它地区比较。[结果]多重PCR-CE和PCR-SSP的基因分型结果完全一致。大连地区汉族人群HPA-2a、-2b、-3a、-3b、-15a、-15b基因频率分别为0.9200、0.0800、0.5750、0.4250、0.5800和0.4200;与国内山东、上海、浙江汉族人群相比,HPA-2、-3、-15等位基因频率差异无显著性意义(P>0.05);与新疆维吾尔族人群相比,HPA-2、-3等位基因频率差异无显著性意义(P>0.05),但HPA-15等位基因频率差异有显著性意义(P<0.05)。[结论]HPA多重PCR-CE基因分型方法快速、简单、准确;国内HPA-15等位基因分布存在着种族差异。

摘要：目的探讨熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型,了解大连地区汉族人群HPA-15基因多态性。方法设计合成HPA-15等位基因特异性引物和1条公共引物,其中在2条等位基因特异性引物的5'末端分别加入具有不同长度并富含GC碱基的序列。使用这3条引物,进行实时PCR反应。在PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,进行基因分型。应用熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法对100名大连地区汉族人群的血液标本进行HPA-15基因分型。此外对熔解曲线分析法的重复性进行评价。结果 100个血液标本的熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法的基因分型结果是完全一致的。10个血标本的2次熔解曲线分析结果是一致的。大连地区汉族人群HPA-15a、-15b基因频率分别为0.58和0.42。大连地区汉族人群与国内部分地区汉族人群相比,HPA-15等位基因频率的差异无统计学意义(P>0.05)。与新疆维吾尔族人群相比,HPA-15等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HPA的熔解曲线基因分型方法具有快速、简单、准确、通量高、重复性好等优点,要优于常规的PCR-SSP法。在国内HPA-15等位基因分布存在着种族差异。