摘要：目的研究survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染对肾透明细胞癌786O细胞的survivin蛋白表达、细胞凋亡、增殖的影响,及其对表阿霉素诱导细胞凋亡的作用。方法设计并合成特异性靶向survivin的ASODN及正义寡核苷酸(SODN),将其转入786O细胞。设空白对照组、脂质体对照组、SODN组和600nmol/LASODN组,处理24h后收获各组细胞。透射电子显微镜观察细胞形态变化,免疫组化法检测各组细胞survivin表达情况,流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡指数。结果ASODN组的细胞呈典型凋亡的形态学改变,而对照组细胞生长良好;ASODN组细胞survivin表达减弱,凋亡指数明显升高(P<0.05);转染ASODN24h后,表阿霉素诱导786O细胞凋亡的作用明显增强。结论survivinASODN能下调survivin蛋白表达,诱导肾透明细胞癌786O细胞凋亡,抑制786O细胞增殖,并增强表阿霉素诱导的细胞凋亡。

摘要：目的：优化聚谷氨酸与表阿霉素的交联条件。方法：采用均匀实验设计，考察ａ．表阿霉素的投量（ｍｇ），ｂ．反应时间（ｈ），ｃ．反应体系的ｐＨ值对交联率的影响。结果：表阿霉素的交联率（Ｙ）在实验范围内与各因素之间符合方程：Ｙ＝７６．７０＋０．３３７８ａ－２．２８５×１０－２ｂ－８．１４１ｃ，γ＝０．９８８８。此方程在ｐＨ５．４以上适用，药物交联率最高可达到３９％。

摘要：背景:多糖"锚定"脂质体在抗肿瘤药物、蛋白以及基因的传输领域有着极其重要的理论及应用价值,国外已有较多机构在进行相关的研究。目的:通过"锚定"的方式制备胆甾醇琥珀酰基壳聚糖锚定脂质体,并以表阿霉素作为模型药物,考察其对包载药物体外释放性质的影响。设计、时间及地点:体外实验,于2006-09/2008-05在天津市生物医学材料重点实验室完成。材料:以壳聚糖为原料,合成胆甾醇琥珀酰基壳聚糖,并采用胶体滴定法测定其胆甾醇基取代度。方法:采用pH梯度法制备表阿霉素脂质体,然后通过共孵育的方法合成了取代度为2.80%,5.58%和8.00%的载药胆甾醇琥珀酰基壳聚糖锚定脂质体。主要观察指标:荧光分光光度计检测药物浓度;透射电镜观察脂质体形态;亚微米粒度及电位分析仪检测脂质体的粒径大小、分布和电位;动态透析法考察包载药物表阿霉素在胆甾醇琥珀酰基壳聚糖锚定脂质体中的体外释放特征。结果:胆甾醇琥珀酰基壳聚糖锚定脂质体为规则球状形态,呈现典型的核壳结构,粒径为245.4~279.7nm,zeta电位为+21.09^+25.48mV;和载药脂质体及壳聚糖包衣脂质体相比,CHCS锚定脂质体能明显延缓表阿霉素的体外释放,在胆甾醇基取代度2.80%~5.85%范围内,表阿霉素的释放速度随着取代度的增加呈降低的趋势。结论:胆甾醇琥珀酰基壳聚糖锚定脂质体有着比普通脂质体及壳聚糖包衣脂质体更高的稳定性,能显著延缓包载药物的释放速度。

摘要：目的:采用星点设计-效应面优选PFV修饰的表阿霉素与五味子乙素的最佳制备工艺,并对该脂质体进行细胞毒性评价。方法:采用薄膜水化-硫酸铵梯度法构造PFV修饰的表阿霉素与五味子乙素脂质体。以包封率为考察指标,采用星点设计-效应面法对胆固醇含量、水化温度、表阿霉素含量三个因素进行优化。采用SRB染色法考察该脂质体对MDA-MB-231和MCF-7两种乳腺癌细胞的杀伤能力。结果:脂质体的最佳制备工艺为处方量5mL、胆固醇9.6mg、表阿霉素含量0.48mg、水化温度40℃,平均包封率为99.1%。该脂质体对MDA-MB-231细胞的IC50值为(1.36±1.14)μmol/L,对MCF-7的IC50值为(1.31±1.52)μmol/L。结论:该制备工艺重复性良好,可用于PFV修饰的表阿霉素与五味子乙素脂质体的制备,构建出的脂质体具备杀伤乳腺癌细胞的性能。

摘要：目的构建穿膜肽修饰表阿霉素与五味子乙素脂质体,通过正交试验设计优选出最佳制备工艺,并对构建的脂质体进行细胞毒性评价。方法采用硫酸铵梯度法制备脂质体,采用高效液相色谱仪测定脂质体包封率,利用正交设计优选出脂质体的最佳制备工艺,最后采用SRB染色法进行细胞毒性实验以考察脂质体对肿瘤细胞的杀伤效果。结果脂质体的最优处方为磷脂:胆固醇=5∶1(质量比),磷脂:表阿霉素=25∶1(质量比),水化环境pH=7.3,细胞粉碎功率为500 W。穿膜肽修饰表阿霉素与五味子乙素脂质体对LLT细胞的IC50值为(2.65±1.57)μmol/L,对U87细胞的IC50值为(4.96±3.46)μmol/L。结论优选出的穿膜肽修饰表阿霉素与五味子乙素脂质体的制备工艺条件的重复性良好,操作简便,构建的脂质体具有明显的肿瘤细胞毒性。

摘要：目的:优选R_8多肽修饰表阿霉素与双氢青蒿素脂质体的处方,并建立脂质体中表阿霉素的含量测定方法。方法:以薄膜分散法-硫酸铵梯度法制备R_8多肽修饰表阿霉素与双氢青蒿素脂质体,采用星点设计-响应面法对卵磷脂/胆固醇(EPC/Chol)质量比、超声功率、卵磷脂/表阿霉素(EPC/EPI)质量比进行优选,采用高效液相色谱法(HPLC)法测定脂质体中表阿霉素的含量。结果:优选后卵磷脂/胆固醇(EPC/Chol)质量比为4∶1,超声功率为300 W,卵磷脂/表阿霉素(EPC/EPI)质量比为25∶1,所得脂质体平均包封率为(94.5%±0.51%)(n=3);脂质体中表阿霉素的平均含量为(150.01±1.26)μg/mL(n=3)。结论:优化所得处方稳定,适用于制备R_8多肽修饰表阿霉素与双氢青蒿素脂质体;建立的HPLC法准确可靠,简单快速,可用于测定脂质体中表阿霉素的含量。

摘要：为进一步评价表阿霉素上市以来的临床疗效和安全性，采用统一的设计方案，多中心临床研究协作组开展了前瞻性研究。共２０个单位应用以表阿霉素为主的联合化疗方案，治疗了５１６例各类肿瘤，其中将表阿霉素代替阿霉素组成ＣＥＯＰ［环磷酰胺（ＣＴＸ）、表阿霉素（ＥＰＩ）、长春新碱（ＶＣＲ）、泼尼松（ＰＮＤ）］方案治疗的恶性淋巴瘤２１３例中，完全缓解８７例，部分缓解９９例，有效率为８７．３％；应用ＣＥＰ［ＣＴＸ、ＥＰＩ、顺铂（ＰＤＤ）］方案治疗的非小细胞肺癌１６１例，完全缓解２例，部分缓解７１例，有效率为４５．３％；采用ＥＭＦ［ＥＰＩ、氨甲喋呤（ＭＴＸ）、５－氟脲嘧啶（５－ＦＵ）］方案治疗乳腺癌７０例，完全缓解８例，部分缓解２８例，有效率为５１．４％。此外，对消化道癌、鼻咽癌也都有较好的效果。不良反应除消化道反应外，限制剂量提高的主要毒性为白细胞减少。以表阿霉素为主的化疗方案对肝功能和心电图影响轻微。结合文献报道，认为表阿霉素和阿霉素疗效相近，而心脏毒性较轻，因此可进一步增加剂量强度，从而达到在一定程度上提高临床疗效的目的。

摘要：目的为提高肝癌患者生存期和改善生活质量,探索研究纳米磁诱导肝癌Hep-6细胞凋亡,提供肝局部消融新方法。方法应用电泳,扫描电镜,透射电镜及流式细胞仪技术。实验设计分组为空白对照组;药物对照组;纳米磁处理组;在不同药物剂量与作用时间条件下重点观察纳米磁诱导人肝癌Hep-6细胞凋亡改变。结果①药物剂量:纳米磁组与表阿霉素对照组,再分为高剂量与低剂量组,按10mg/L,100mg/L终浓度作用人肝癌Hep-6细胞。②24h的结果实验组细胞凋亡率由25%上升到54%;36h的结果实验组和表阿霉素组与对照组的凋亡率分别为78%,53%,2%;各组结果之间的凋亡率差异显著(t=3.05,P<0.05),凋亡率和药量与时间呈正相关联(r=0.96,P<0.05)。结论纳米磁具有高载药量、靶向性、缓释作用,可诱导肝癌Hep-6细胞凋亡。

摘要：局部晚期乳腺癌(locally advanced breast cancer,LABC)一般是指乳腺原发病灶较大,手术切除较困难,但没有远处转移的临床Ⅲ期乳腺癌,其区域淋巴结转移率在90%以上,预后较差,如何有效治疗LABC,是临床上需引起重视的课题之一.术前化疗设计的生物学基础是癌细胞增殖可使耐药性细胞增多,早期采用无交叉耐药的化疗,有助于抑制耐药细胞的产生,从而提高化疗疗效[1].化疗可以使LABC降期以便手术治疗,而表阿霉素与诺维苯联合应用是目前对转移性乳腺癌化疗较有效的方案.我中心2003年8月至2004年10月采用表阿霉素加诺维苯作为LABC的新辅助化疗方案,治疗LABC患者46例,观察治疗后肿瘤的有效率、手术切除率及药物的安全性,结果报道如下.

摘要：目的探讨定量沉默c-Met基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、表阿霉素化疗敏感性的影响及其可能机制。方法设计3条针对c-Met基因不同位点短发夹RNA(shRNA)片段,瞬时转染MDA-MB-231细胞,挑选出沉默效率最佳的shRNA,并设定scramble为阴性对照组,MDA-MB-231细胞为空白对照组。将沉默效率最佳的TA-shRNA连接到PSD400慢病毒载体中进行病毒包装,收集病毒液并感染MDA-MB-231细胞,利用嘌呤霉素筛选出稳定表达针对c-Met的shRNA细胞系(PSD400-c-Met-shRNA-MDA-MB-231)及阴性对照组细胞(PSD400-scramble-MDA-MB-231)。利用多西环素(DOX)诱导稳定细胞系,Western blot检测稳定细胞系c-Met蛋白表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测敲低c-Met后对稳定细胞系增殖的影响。将诱导的稳定细胞系加入不同浓度表阿霉素,MTT法检测不同浓度表阿霉素作用对稳定细胞系存活率的改变,计算出药物半数抑制浓度(IC_(50));流式细胞技术检测细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白多聚二磷酸腺苷(ADP)-核糖聚合酶(PARP)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达。结果稳定细胞系PSD400-c-Met-shRNA-MDA-MB-231经DOX诱导后细胞生长受到明显抑制,且加入不同浓度表阿霉素处理细胞后,细胞的存活率和IC_(50)均明显降低(P<0.05);同时G_(0)/G_(1)期细胞百分比明显升高,S期、G_(2)/M期细胞百分比明显降低(P<0.05)。Western blot检测凋亡相关蛋白PARP和caspase-3上调明显。结论定量沉默c-Met基因可以抑制MDA-MB-231细胞的增殖,促进细胞凋亡,并提高了MDA-MB-231细胞的化疗敏感性,靶向c-Met基因可能是治疗乳腺癌的有效方法。