摘要：目的探讨玻璃体注射化疗对存在玻璃体种植的视网膜母细胞瘤的临床疗效。设计回顾性病例系列。研究对象v2019年10月至2020年10月在北京儿童医院诊断和治疗的单眼cT2期视网膜母细胞瘤患者18例(18眼)。方法根据患眼玻璃体种植病灶的形态学特点分为1型尘埃样和2型球形。所有患者均接受了玻璃体注射化疗(左旋苯丙氨酸氮芥)。记录患者玻璃体注射化疗的次数,玻璃体种植瘤灶的消退时间、随访时间、是否出现手术相关并发症、是否存在肿瘤眼外转移等,并计算患者的保眼率。不同类型玻璃体种植组间注射次数和玻璃体种植瘤灶消退时间的比较采用秩和检验。主要指标玻璃体注射化疗的次数,玻璃体种植瘤灶的消退时间、随访时间、是否出现手术相关并发症、是否存在肿瘤眼外转移,保眼率。结果18例(18眼)单眼cT2期视网膜母细胞瘤患者中,10例(10眼)玻璃体种植病灶呈尘埃样(1型),8例(8眼)呈球形(2型)。经玻璃体注射化疗,所有患眼玻璃体种植瘤灶全部消退。在治疗和随访中,有8例(44.4%)在玻璃体注射位置周围出现椒盐样视网膜病变;2例(11.1%)出现玻璃体少量出血。未观察到肿瘤的眼外转移及死亡。随访(21.08±2.18)个月。1型和2型玻璃体种植接受玻璃体注射化疗次数的中位数分别为2.5次(2,3)和5.5次(5,6)(Z=-3.679,P<0.05),消退时间的中位数分别为1.875个月(1.56,2.00)和3.875个月(3.50,4.06)(Z=-3.586,P<0.05)。结论玻璃体注射化疗是针对存在玻璃体肿瘤种植的视网膜母细胞瘤的有效治疗手段。

摘要：目的探讨视网膜母细胞瘤(RB)局部浸润和远处转移的MRI和CT影像学表现特征。设计回顾性病例系列。研究对象14例伴有局部浸润和远处转移的RB患者。方法回顾性分析14例患者的MRI和CT影像学表现,包括直接浸润的方式、远处转移的部位、范围、信号和强化特征。主要指标MRI和CT表现。结果 14例患者中12例存在局部浸润,影像学表现为肿瘤沿视神经向后蔓延(11例),或侵犯眼周组织和邻近眶骨(1例)。14例患者中9例出现中枢神经系统转移病灶,3例发生骨转移,3例发生颈部淋巴结转移,2例于腮腺区见转移病灶,最常见的转移部位是中枢神经系统。结论 MRI或CT影像学检查可以及时发现RB远处转移的病变,为临床治疗提供依据。

摘要：目的探讨视网膜母细胞瘤组织芯片中PTEN,murine double minute 2(mdm2)及p53蛋白的表达及与肿瘤临床组织病理特征的关系。设计实验性研究。研究对象64例视网膜母细胞瘤和6例正常视网膜组织。方法免疫组化方法检测视网膜母细胞瘤组织芯片和正常视网膜组织石蜡标本中PTEN,mdm2及p53的表达情况,将肿瘤分为球后视神经受侵袭组和球后视神经未受侵组,检测两组间mdm2及p53表达差异,并结合肿瘤的组织病理学特征进行综合分析。主要指标视网膜母细胞瘤组织芯片中PTEN,mdm2和p53表达率。结果视网膜母细胞瘤中PTEN,mdm2与p53的阳性表达率分别为53.13%,48.43%和53.13%。球后视神经受侵袭组较球后视神经未受侵组mdm2(P=0.027)及p53(P=0.017)表达均明显增高。视网膜母细胞瘤中PTEN与p53表达呈负相关(r=-0.384,P=0.045),mdm2与p53蛋白表达呈正相关(r=0.28l,P=O.018)。结论视网膜母细胞瘤中mdm2和p53的过度表达与视神经侵袭程度存在一定相关性。mdm2及p53蛋白的检测可能成为视网膜母细胞瘤恶性程度的参考指标。

摘要：目的检测视网膜母细胞瘤(RB)中,O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子区甲基化状态及mRNA、蛋白产物的表达情况,并探讨其与RB临床、组织病理学特征的可能关系。设计实验研究。研究对象石蜡包埋RB组织20例,RB细胞系4株(Y79、SO-Rb50、SO-Rb50/VCR、WERI-RB1)。方法采用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测20例石蜡包埋RB组织及4株RB细胞系MGMT启动子区甲基化状态,并进一步以实时荧光定量PCR及蛋白印迹确认MGMT mRNA、蛋白的表达。收集患者临床资料(如性别、发病年龄等),并对RB组织标本HE、免疫组织化学染色切片进行组织病理学诊断,判断组织病理学特征(如肿瘤侵犯范围、虹膜新生血管等)。主要指标MGMT启动子区甲基化状态,MGMT mRNA及蛋白表达水平,患者临床及组织病理学特征。结果 20例石蜡包埋RB组织标本中,12例(60%)MGMT启动子区为部分/完全甲基化,余8例(40%)未甲基化,甲基化与未甲基化组的临床及组织病理学指标不具有统计学差异(P>0.05)。Y79、SO-Rb50、SO-Rb50/VCR 3株RB细胞系MGMT启动子区为部分甲基化;WERI-RB1细胞系MGMT启动子区为未甲基化。4株RB细胞系均有不同程度MGMT mRNA及蛋白的表达,WERI-RB1 MGMT mRNA表达水平(1.000±0.040)高于其他3株细胞系(Y79,0.617±0.026;SO-Rb50,0.356±0.020;SO-Rb50/VCR,0.389±0.017),差异具有统计学意义(P0.05)。结论在RB组织及细胞系中,存在较高的MGMT启动子区甲基化率,MGMT甲基化状态可影响其产物表达水平。

摘要：目的建立兔眼视网膜母细胞瘤(Rb)动物模型,便于和扩展应用眼肿瘤动物模型进行临床实验治疗。设计实验性研究。研究对象8只兔(16眼)及HXO-Rb44细胞株。方法全麻下在兔眼脉络膜上腔注入浓度为(1．17×107)／ml肿瘤细胞悬液0．1ml,分别于种植后的l、3、7、14天观察记录兔眼底改变,第14天摘除眼球后行病理观察和肿瘤细胞鉴定。主要指标观察肿物生长数量及生长方式,并以病理切片H-E和免疫组化染色证实细胞来源。结果种植后1周肿物开始生长,生长方式有肿块状和弥漫状,成活率为7／16。肿瘤细胞生长活跃,生长旺盛区与坏死区相间隔;细胞呈未分化的特点:核大深染,胞浆少,核与胞浆比例失调,异形性明显,并见大量的核丝分裂。经H-E和免疫组化染色,证明兔眼Rb的生长方式、分化类型及细胞特征与人眼Rb相一致。结论HXO-Rb44细胞株可以在兔眼内成活,并能形成实体性肿瘤,兔可以成为较理想的Rb模型动物。

摘要：目的探讨视网膜母细胞瘤(Rb)对眼球组织浸润侵犯程度的相关临床危险因素。设计回顾性病例系列。研究对象经组织病理学确诊的Rb患者394例。方法收集1990-2005年北京同仁医院较完整的394例Rb患者的临床病理资料,术前观察主要临床体征,术后光镜下判读Rb眼球各组织浸润程度,通过logistic多元回归分析Rb眼球组织浸润程度的临床危险因素。主要指标Rb各临床体征与眼球组织浸润程度及两者之间的相关性。结果394例Rb中侵犯视盘315例(79．7％),侵犯筛板纤维203例(51．4％),肿瘤穿过筛板至球后视神经内102例(25．8％),侵犯脉络膜102例(25．8％),视神经切除断端受累者26例(6．6％)。统计分析显示:脉络膜组织受累与病程(P=0．032)、结膜充血(P=0．023)、眼球突出(P=0．026)及继发青光眼(P=0．027)有关;视神经切除断端浸润与结膜充血(P=0．008)、虹膜新生血管形成(P=0．033)、眼球突出(P=0．000)有关。结论本组Rb视神经侵犯率较高。病程长、结膜充血、眼球突出是眼球组织侵犯的主要因素。

摘要：目的检测PAX6、Ki-67及MMP-9在视网膜母细胞瘤(RB)中的表达,探讨其与RB临床组织病理学特征之间的关系及临床意义。设计实验性研究。研究对象石蜡包埋RB组织40例,其中<3岁组27例,≥3岁组13例。方法采用免疫组织化学Elivision法检测PAX6、Ki-67及MMP-9在40例RB组织中的表达情况,分析该3种蛋白表达与患者性别、眼别、年龄、视神经受侵情况以及是否化疗等临床组织病理学特征的关系,并分析3种蛋白表达之间的相关性。主要指标RB组织中PAX6、Ki-67、MMP-9的表达及临床组织病理学特征。结果 40例RB组织中,PAX6、Ki-67及MMP-9的阳性表达率分别为52.5%、55.0%、57.5%。Ki-67在年龄大于3岁组的阳性表达率高于年龄小于3岁组(χ2=6.825,P=0.016),PAX6(χ2=0.631,P=0.511)及MMP-9(χ2=0.129,P=1.000)的表达与年龄无显著相关性。3种蛋白的表达均与性别及眼别无显著相关性。PAX6、Ki-67及MMP-9在球后视神经受侵袭组的阳性表达率均高于未受侵袭组(χ2=14.401,P=0.017;χ2=11.831,P=0.046;χ2=13.961,P=0.038)。PAX6及Ki-67在未化疗组的阳性表达率均高于化疗组(χ2=8.120,P=0.010;χ2=6.465,P=0.025)。PAX6和Ki-67的表达呈正相关(r=0.347,P=0.028)。结论 PAX6的高表达促进了RB细胞的增生;PAX6、Ki-67和MMP-9的高表达与RB的侵袭有一定的相关性;化疗对RB中PAX6和Ki-67的表达有一定的抑制作用,在一定程度上可以降低RB侵袭转移的风险。

摘要：视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)中由于Rb基因缺失或失活,转录调控因子E2F1始终处于活化状态,细胞不断增殖,E2F1活性增加是恶性肿瘤的普遍现象.根据人E2F1基因设计了3段shRNA,构建RNA干扰表达载体pSilencer-shE2F1,瞬时转染人视网膜母细胞瘤细胞株HXO-Rb-44和人肝癌细胞株SMMC-7721,通过荧光定量PCR检测E2F1表达水平的变化,PI(碘化丙锭)染色检测细胞周期各时相细胞数量以检测其对细胞周期的影响.根据筛选出的有效shRNA序列构建腺病毒载体并包装出腺病毒Ad-shE2F1,在裸鼠前房模型中,体外按50moi的感染系数感染稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的人视网膜母细胞瘤细胞株48h后,收集细胞,将2×105细胞注射到裸鼠眼前房内,连续观察眼内肿瘤细胞生长情况并拍照记录.通过转染肿瘤细胞株检测E2F1转录水平,筛选到1个能明显抑制肿瘤细胞内E2F1表达的shRNA序列,并使细胞周期中S期细胞数减少.经Ad-shE2F1感染的RB肿瘤细胞与对照相比较,其在裸鼠眼前房内肿瘤生长减缓.结果说明,有效抑制hE2F1表达的shRNA具有抑制体内外人视网膜母细胞瘤生长的作用.

摘要：视网膜母细胞瘤(RB)是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤。化疗是眼内期RB的主要治疗方法,有助于最大限度保留患儿眼球。动脉化疗即经动脉对RB进行化疗,是近年来兴起的新的方法,可有效避免静脉化疗的全身毒副作用。该文就RB动脉化疗进展进行了综述。

摘要：目的：研究视网膜母细胞瘤（RB）患儿综合治疗的预后并探讨其相关临床因素。方法：回顾性系列病例研究。分析在深圳市眼科医院进行综合治疗的65例（92眼）RB患儿的临床资料。综合治疗的方法为以化疗为主联合局部治疗（光凝或冷冻）＋眼球摘除治疗。不同结局相关临床因素的比较采用独立样本t检验，其余指标采用Fisher＇s精准检验。结果：所有RB患儿的总生存率为92％，不同分期生存率差异无统计学意义。所有患儿总的保眼率为51％，E期和其他4期之间保眼率差异均有统计学意义（P〈0．01）。高风险D、E期RB患儿共60例，采用化疗联合局部治疗保眼的共42例，D期18例中11例保眼成功，E期24例中4例保眼成功。治疗成功与失败患儿的初诊时间和随访时间差异无统计学意义。根据眼内肿瘤的位置将42例患儿分为3组，分析显示即周边部（包括中周部）与后极部、后极部＋周边部保眼率差异有统计学意义（P=0．009、0．021）。42例患儿中4例死亡，均为肿瘤位置处于后极部的患儿，后极部与后极部＋周边部2组之间病死率差异有统计学意义（P=0．045）。结论：综合治疗提高了RB患儿的生存率，但患儿的生存率和保眼率与其临床分期及肿瘤所处的位置高度相关。