摘要：目的研究角膜移植手术术前结膜囊菌群分布及其影响因素。设计回顾性病例系列。研究对象2017年8月至2019年4月北京大学第三医院眼科572例角膜移植手术患者。排除现存眼部感染者。方法回顾患者术前结膜囊细菌培养及药物敏感性试验结果及病例资料,包括术后早期感染患者的随访资料。结膜囊细菌培养阳性者作为病例组,阴性者为对照组。主要指标患者临床信息,结膜囊细菌培养结果,药物敏感性结果。结果572例中23例(4%)患者结膜囊细菌培养阳性,以革兰阳性菌为主(78.2%)。首位检出菌为表皮葡萄球菌12例(52.2%)。病例组及对照组在性别、年龄、眼别、术式、眼部手术史、糖尿病史等因素无统计学差异(P均>0.05)。病例组及对照组术前局部抗生素用药天数(1、2、3天及以上)阳性率差异具有统计学意义(χ^(2)=5.807,P=0.046)。不同原发病结膜囊细菌培养阳性率差异具有统计学意义(P=0.001),以免疫性疾病阳性率最高(38.5%)。药敏结果显示革兰阳性菌对利福平(100%)及万古霉素(88.9%)敏感性高。术后1例Stevens-Johnson综合征患者出现早期感染,其培养结果为大肠埃希菌。结论角膜移植术术前抗生素用药天数的延长可降低细菌培养阳性率。免疫性疾病患者术前结膜囊细菌培养阳性率高,可能与术后感染有一定关系,需关注感染风险。

摘要：目的探讨雷帕霉素(RAPA)对大鼠角膜移植排斥反应的防治效果。方法以SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体建立角膜移植实验模型。采用完全随机分组设计方案,将68只Wistar鼠(68只眼)随机分为4组,A组为Wistar鼠自体原位角膜移植,B、C、D组为SDWistar鼠之间进行同种异体角膜移植。术后灌胃给药,A组和B组给予空白液,C组和D组分别给予RAPA(3mg·kg-1·d-1)和环孢霉素A(CsA)(10mg·kg-1·d-1),连续用药12d。根据Holland排斥反应评分系统,判断术后植片排斥情况。比较各组角膜植片的平均存活时间和植片存活率。采用广义估计方程对角膜的新生血管评分进行统计学分析。术后14d,对各组角膜进行组织学检查。结果RAPA组发生排斥反应的时间明显延迟,同种异体移植对照组植片平均存活时间(MST)为(11.0±1.5)d,RAPA组MST为(36.1±14.9)d,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。RAPA组术后角膜新生血管的生长明显低于异体移植对照组(P<0.05)和CsA组(P<0.05)。组织学检查证实,术后14d,RAPA组角膜植片未见明显淋巴细胞浸润。结论口服RAPA能够延缓大鼠角膜移植排斥反应的发生,并能够抑制术后新生血管的生成。

摘要：目的探讨人纤溶酶原K5突变体（mK5）滴眼液预防大鼠角膜移植排斥反应发生的效果。方法实验研究。以F344大鼠30只作为供体，Lewis大鼠60只作为受体，建立同种异体角膜移植排斥反应模型。另取15只Lewis大鼠行自体原位角膜移植，即A组为15只F344大鼠自体原位角膜移植。采用完全随机分组设计方案，将60只Lewis大鼠（60只右眼）分为B、C、D及E组。术后术眼4次：／d滴眼液，每次1滴，A组和B组滴生理盐水，C组和D组滴mK5滴眼液，浓度分别为5mg／L和10mg／L，E组给予0．1％地塞米松滴眼液，连续用药14d。根据Holland排斥反应评分标准，判断术后植片排斥情况。比较各组角膜植片的平均存活时间，并观察各时间点角膜新生血管生长情况，计算其面积。术后第14天，对各组大鼠角膜植片做组织学检查。采用方差分析和SNK．q检验对以上所得结果进行统计学分析。结果B、C、D、E组植片平均存活时间分别为（9．3±2．1）、（21．1±7．3）、（23．5±10．8）及（28．2±19．1）d；C、D组分别与B组比较，差异有统计学意义（q=10．24，13．47；P〈0．05）；E组植片存活情况较C、D组好，但组间比较，差异无统计学意义（q=2．54，1．49；P〉0．05）。术后A、B、c、D及E组角膜新生血管开始出现的时间分别为（3．1±0．8）、（2．6±O．5）、（6．4±0．5）、（7．8±0．7）及（5．3±1．0）d；C、D、E组与A组比较（q=31．58，51．21，19．98；P〈0．05）；C、D、E组也较B组明显延长（q=43．87，67．14，24．53；P〈0．05）；C、D及E组两两组间比较差异有统计学意义（q=11．41，20．37，9．67；P〈0．05）。术后C、D组角膜新生血管的生长面积明显较B组少（q=30．76，62．14；P〈0．05），且与E组比较差异有统计学意义（q=15．20，25．64；P〈0．05）。病理学检查显示，B组角膜植片可见大量炎性细胞浸润和角膜新生血管形成，而C组与D组植片炎性反应较轻，无明显新生血管形成。结论mK5滴眼液可抑制同种异体大鼠角膜移植术后新生血管的生成，延缓角膜移植排斥反应的发生。

摘要：目的 探讨深板层角膜移植术（DLKP）与穿透性角膜移植术（PKP）对圆锥角膜的不同临床疗效。方法采用病例对照研究设计，选择自2003年4月至2006年4月期间于我院行DLKP11例（11只眼）和PKP18例（18只眼）的29例圆锥角膜患者资料。对术前、术后的未矫正视力（UCVA）、最好矫正视力（BCVA）、植片情况、散光状况及手术并发症等进行分析。结果DLKP术后9例患者BCVA高于0．5，PKP术后14例患者BCVA高于0．5。DLKP组术后的平均球镜度数（DS）为（-1．21±3．36）D，平均柱镜度数（DC）为（-4．03±1．87）D，PKP组术后平均DS和DC分别为（-3．86±2．43）D和（-3．43±2．31）D，两组间比较差异均无统计学意义（DS：t=2．135，P=0．46；DC：t=-0．643，P=0．528）。共焦显微镜检查显示，DLEK组与PKP组术后角膜植片的上皮细胞、上皮细胞基底层及前弹力层角膜在形态上基本相似，均表现为植片基质细胞胞核略小，排列稍显紊乱，有裂隙样暗纹。DLKP组患侧眼内皮细胞的形态基本正常，平均密度为（2311．72±439．73）个／mm^2，对侧眼为（2477．81±535．92）个／mm^2，二者差异无统计学意义（t=1．06，P=0．78）；PKP组患侧眼内皮细胞面积较大，细胞大小不均匀，非六角形细胞比例高，平均密度为（1642．17±583．41）个／mm^2,明显低于对侧眼（2739．05±401．77）个／mm^2，二者之间比较差异有统计学意义（Z=7．32，P=0．006）。DLKP组的并发症主要是术中后弹力层穿孔、缝线松脱及层间浑浊等。PKP组的并发症主要是缝线松脱、眼压升高、排斥反应及内皮功能衰竭。结论DLKP术后的屈光状况与PKP术接近，虽然手术操作难度较高，但是术后发生内皮排斥和内皮衰竭的机率低、安全性高。（中华腰群杂志，2007，43：583-588）

摘要：目的探讨新型药物J2抗同种异基因小鼠角膜移植术后排斥反应的作用及其机制。方法实验研究。采用随机分组设计的研究方法。建立以C57BL／6小鼠为供体，BALB／c小鼠为受体的角膜移植实验模型，其中供体38只，受体100只，随机分为A、B、C、D四组，每组25只。A组为BALB／c小鼠自体原位角膜移植，B、C及D组均采用C57BL／6-BALB／c同种异体角膜移植，术后采用腹腔注射给药，自手术当日开始，A组、B组给予安慰剂，C组给予CsA10mg／kg体重，D组给予J215mg／kg体重，每天1次，连续给药12d。观察各组植片生存指数变化，苏木素-伊红染色及冰冻切片免疫组织化学观察角膜植片病理改变；分别在术后1、2、3及4周行逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测角膜植片中细胞因子的表达。各组间植片存活时间差异采用One—Way ANOVO分析进行比较，两组之间比较采用SNK法。结果B组角膜植片平均存活时间为（18．88±4．19）d，D组发生排斥时间明显延迟为（33．62±6．80）d，两组比较差异有统计学意义（q=8．33，P=0．00），而D组与C组比较差异无统计学意义（q=0．85，P=0．60）。组织学检查证实，术后21d，B组见大量细胞浸润，而D组与C组植片未见明显的细胞浸润。免疫组织化学检测显示安慰剂组角膜植片大量CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞浸润，J2组与CsA组植片仅有少量的CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞浸润。RT—PCR结果显示，在正常小鼠角膜未见IL-10和IFN-γ基因表达；异基因移植组从第1周开始表达各种基因，第3周表达明显增强；而J2组与CsA组从第1周开始表达，第2、3周表达减弱，第4周表达强于前3周。结论J2通过拮抗CD4与主要组织相容性抗原（MHC）Ⅱ分子结合抑制CD4^＋T淋巴细胞激活，从而具有抗小鼠角膜移植排斥作用。

摘要：目的探讨辅助角膜移植显微手术机器人系统的实验性应用效果。方法实验研究。采用人机协同手术方式，建立具有6个子系统的角膜移植显微手术机器人系统，并对20只兔眼角膜进行钻切、缝合实验；观察手术目标定位误差、切口圆周对称性、角膜钻切深度及缝合跨距等指标。结果20只角膜钻切、缝合手术操作均按照机器人及计算机导航系统的预定程序完成，其手术钻切中心定位误差为（0．356±0．040）mm，切口横纵跨度比为（0．855±0．040），角膜圆周不同位置钻切深度误差小于10μm，病理组织切片可见角膜切缘整齐，角膜切口附近各层组织结构及厚度无明显变化；缝合装置的缝合跨距（2．15±0．09）mm，与目标跨距2．00mm误差（0．15±0．02）mm。结论辅助角膜移植显微手术机器人系统设计合理；系统的基本功能可满足角膜移植手术的要求；在实验动物的角膜钻切、缝合过程中具有较好的稳定性和准确性。

摘要：目的探讨贝伐单抗对同种异体角膜移植术后免疫排斥反应的影响,评价其对角膜植片存活的疗效及作用机制。设计实验研究。研究对象近交系F344大鼠15只为供体,近交系Lewis大鼠30只为受体。方法受体大鼠右眼行穿透性角膜移植术后随机数字法分为3组:对照组(A组)、贝伐单抗组(B组)、地塞米松组(C组),每组10只。B、C组分别于术后0、3、6、9天结膜下注射40μl贝伐单抗注射液及20μl地塞米松磷酸钠注射液;A组不做处理。术后裂隙灯下观察14天,记录排斥指数(RI,为植片水肿、混浊、新生血管长入评分合计)和新生血管侵袭面积(IA)。术后14天,采用免疫荧光法检测角膜植片中CD4^+、CD8^+免疫细胞的表达。主要指标角膜新生血管面积,免疫排斥时间,免疫细胞的数量。结果术后7天IA分别为:A组(22.50±3.67)mm^2,B组(14.21±2.79)mm^2,C组(15.38±0.84)mm^2;A组明显多于B组及C组(P=0.00和0.01),B组与C组无显著差异(P=0.059)。术后14天IA分别为:A组(27.96±0.50)mm^2,B组(18.76±2.73)mm^2,C组(23.74±2.14)mm^2。A组及C组多于B组(P=0.000)。免疫排斥时间A组8天,B组11天,C组13天。B组及C组角膜植片存活时间均长于A组(P均=0.000)。免疫细胞:CD4^+阳性细胞数:A组(13.2±2.94)个,B组(6.14±1.07)个,C组(3.5±1.78)个;CD8^+阳性细胞数:A组(14.4±2.44)个,B组(4.5±1.51)个,C组(3.38±1.68)个。术后14天,B组、C组角膜植片中CD4^+、CD8^+细胞亦明显少于A组(P均=0.000)。结论结膜下注射贝伐单抗可有效抑制大鼠同种异体穿透性角膜移植术后新生血管的生长,并可能通过此作用延缓移植排斥反应,延长角膜植片存活时间。但贝伐单抗抗移植排斥反应疗效略逊于地塞米松。

摘要：目的探讨超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）诱导大鼠高危角膜移植免疫耐受时CD4＋CD25＋调节性T细胞在眼局部及全身的表达情况。方法本实验采用对照设计，以13只SD大鼠作为供体，26只Wistar大鼠作为受体建立高危穿透性角膜移植模型。所有受体大鼠抽签法随机分为2组，对照组和SEB组分别腹腔注射生理盐水和SEB（75μg/kg体重），1次／4d，共3次，末次注射后1d行右眼穿透性角膜移植术。术后观察大鼠角膜植片的存活时间，并采用免疫荧光染色分析CD4＋CD25＋T细胞在大鼠角膜植片和虹膜的表达，使用流式细胞学方法分析外周血中的CD4＋CD25＋T细胞百分数。结果对照组大鼠角膜植片平均存活时间为（11．63±2．83）d，SEB组为（14．13±0．99）d，两组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。组织病理学检查可见发生排斥的角膜植片有大量炎性细胞浸润，炎性细胞数量与排斥反应程度呈正相关性。直接免疫荧光染色检查可见术前两组角膜组织均不表达CD4＋CD25＋T细胞，而术后20d两组均有表达。虹膜铺片直接免疫荧光染色检查术前对照组未见CD4＋CD25＋T细胞表达，而SEB组（首次注射SEB后第10天）虹膜片可见CD4＋CD25＋T细胞表达，术后第20天两组大鼠虹膜铺片均可见CD4＋CD25＋T细胞表达，并且SEB组阳性细胞数更多。流式细胞学方法分析显示手术前后、对照组大鼠外周血中CD4＋CD25＋T细胞的百分数无变化，而SEB组呈先升高、后降低的变化趋势。结论CD4＋CD25＋调节性T细胞参与超抗原SEB诱导大鼠高危角膜移植术后免疫耐受的形成。

摘要：0 引言角膜由于感染、外伤、变性、自身免疫疾病等原因产生混浊变形，严重影响视功能。人工角膜是取代混浊角膜组织而用异质成形材料制成的一种特殊屈光装置，植入患眼后以取得一定视力。人工角膜最初的设想是由法国眼科医生Pellier de Quensey于1771年提出的。

摘要：角膜移植是更换混浊角膜，恢复视力的有效治疗手段。由于板层角膜移植的光学效果不如穿透性角膜移植，所以其应用范围受到了限制。近年来，全厚板层角膜移植、深板层角膜内皮移植等新的板层角膜移植手术方式的出现，使得临床眼科医师需重新审视板层角膜移植的重要意义。本文分析了我国板层角膜移植的发展和存在问题，对新的板层角膜移植手术方式的设计理念、术式特点进行了评价，并展望了板层角膜移植的未来发展趋势。