摘要：利用低共熔溶剂(DES)较强的氢键拆解能力定向解构角蛋白分子间的次级键,结合还原剂和DES高效断裂二硫键的能力,建立了一种弱损溶解并提取鸡毛中角蛋白的方法。以氯化胆碱为氢键受体(HBA)、乙醇胺、乙二醇、乳酸等为氢键供体(HBD),设计合成了3类(碱性、中性和酸性)13种功能性的DES,考察了还原剂用量(以鸡毛质量为基准,下同)、温度、DES中水质量分数对角蛋白相对分子质量和提取率的影响,通过密度泛函(DFT)理论计算和溶剂显色参数分析了DES内部的氢键网络结构,研究了DES对鸡毛角蛋白的弱损溶解机制。结果表明,以乙醇胺为HBD,不添加还原剂,在n(乙醇胺)∶n(氯化胆碱)=2∶1、DES中不含水、温度65℃、0.5h的最优条件下,再生角蛋白提取率为31.8%,相对分子质量最高,为66000。以乙醇胺为HBD制备的DES具有还原性,作为碱性DES,其内部的氢键数量多,氢键作用小,氢键能低,可以打乱鸡毛内部的氢键网络,而不会对鸡毛二级结构造成太大破坏。

摘要：以还原法提取羽毛角蛋白的残渣为原料,以壳聚糖和纳米纤维素为增强改性材料,通过冷冻干燥法制备出可重复使用、吸附效率高、绿色环保的羽毛角蛋白气凝胶。采用扫描电子显微镜、热重分析仪和紫外分光度计对羽毛角蛋白气凝胶的形貌结构、热稳定性、吸附性能进行研究。研究结果表明,羽毛角蛋白气凝胶具有多孔的网状结构、良好的热稳定性和优异的染料吸附性能。在30 mL初始浓度400 mg·L^(-1)的酸性橙7染液中加入0.1 g羽毛角蛋白气凝胶,30℃条件下静置吸附24 h,酸性橙7染料的去除率达到99%。经过3次吸附-解吸附实验后,角蛋白气凝胶的吸附性能没有显著变化。

摘要：以角蛋白和三聚氰胺树脂为原料,通过缩合反应制备了角蛋白/三聚氰胺树脂复合材料,探讨了反应pH值、反应温度、反应时间、角蛋白和三聚氰胺树脂质量之比对复合材料粒径、粒径分布系数和zeta电位的影响,并将复合材料应用于制革复鞣填充工序测试成革物理机械性能。结果表明:当反应pH值为7,温度为40℃,时间为4 h,角蛋白与三聚氰胺树脂质量之比为2∶8时,复合材料粒径分布最为集中,阴离子性最强。将复合材料应用于复鞣填充工序,与未改性角蛋白和市售蛋白填料相比,成革物理机械性能有所提高。

摘要：为了合理利用废牛毛,采用双氰胺树脂改性废牛毛水解角蛋白制备蛋白填料,并回用于制革复鞣填充工序。角蛋白/双氰胺树脂复合材料最佳制备条件为角蛋白∶双氰胺树脂为80∶20,时间4 h,pH值为7,复合材料粒径为741.5 nm,粒径分布系数为0.154,zeta电位为-19.1 mV。同时,角蛋白/双氰胺树脂复合材料具有良好的填充性能,用于黄牛鞋面革的填充工序撕裂力、抗张强度、崩破强度均有所提高。

摘要：目的:克隆抗角蛋白抗体的可变区(V区)基因,构建抗角蛋白单链抗体(scFv)表达载体并表达。方法:根据人源性抗角蛋白Fab段的基因序列设计引物,用PCR方法克隆抗角蛋白抗体的V区基因,并重组到scFv的表达载体中,在大肠杆菌进行表达,表达产物经体外变性复性后进行SDS-PAGE鉴定。用ELISA检测其特异性结合活性。结果:成功地克隆抗角蛋白抗体的V区基因,构建了scFv的表达载体,并在大肠杆菌中表达。ELISA检测证实,表达的scFv保留了亲本Fab抗体的特异结合活性。结论:获得功能性抗角蛋白的scFv,可用于进一步的临床应用研究。

摘要：背景:生物可降解内固定材料已应用于临床,但目前仅用于非承重骨的内固定。研究一种具有较高的初始力学强度和早期降解速度缓慢,并能用于承重骨内固定的器材是临床所需要的。目的:对自行研究的人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒进行初始机械力学强度测试和动物体内降解观察。设计:重复测量设计。单位:南方医科大学珠江医院骨科中心,南方医科大学人体解剖学教研室。材料:实验于2002-09/2003-10在南方医科大学完成。选择54只成年SD大鼠。方法:①利用MTS-858MiniBionix型生物力学测试机分别对20根人发角蛋白复合聚乳酸棒的剪切强度、弯曲强度和弯曲模量进行测试,了解人发角蛋白复合聚乳酸骨科内固定棒的初始机械力学性能。②108个人发角蛋白复合聚乳酸试件随机植入54只SD大鼠双侧脊旁皮下组织中,分别于术后1,2,4,8,12,16,20,24,28周取出(每个时间点6只大鼠),测量重量损失,了解人发角蛋白复合聚乳酸在SD大鼠体内的降解情况。主要观察指标:①人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒的力学强度。②人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒动物体内降解情况。结果:54只大鼠均进入结果分析。①人发角蛋白复合聚乳酸骨折内固定棒具有良好的初始机械力学强度,其剪切强度为241MPa,弯曲强度为358MPa,弯曲模量为13GPa。②人发角蛋白复合聚乳酸在SD大鼠体内可以良好的降解,早期降解较慢,而晚期降解较快。结论:人发角蛋白复合聚乳酸骨科内固定棒具有良好的初始力学强度,且在体内可以良好的降解。

摘要：背景:大量的动物实验和临床应用已经证实,人发角蛋白(humanhairkeratin,HHK)人工腱能诱导机体形成自生腱,自生腱形成的过程实质上主要是胶原Ⅰ型的合成、分泌和组装的过程。目的:探讨胶原Ⅰ型mRNA在人发角蛋白人工腱诱导自生腱组织形成过程中的表达。设计:以实验动物为观察对象,完全随机对照实验。单位:南方医科大学组织学与胚胎学教研室和生物化学与分子生物学教研室。材料:实验于2003-05/2004-09在解放军第一军医大学实验动物中心完成。实验动物中心提供实验用新西兰大白兔33只,体质量2.0～2.5kg,雌雄不限。随机分成实验3,6,9,12,16,20周组,阴性对照9,20周组和正常对照组,其中实验3,6周组和正常对照组每组3只,其余每组4只。由生物化学与分子生物学教研室提供的人发角蛋白人工腱为经一系列生物化学处理的人发,按降解速度不同可分为快速(F)、中速(B)和慢速(Z)3个不同降解组分。人发角蛋白人工腱是由快速,中速和慢速这3种组分按4∶3∶3的比例混合编制而成。方法:①实验组行双侧跟腱手术,切断跟腱长1.0～2.0cm,两断端与人发角蛋白人工腱缝合,缝合腱膜,皮肤一期缝合。②阴性对照组为离断兔肌腱1.0～2.0cm,断裂肌腱不进行连接,而缝合腱膜和皮肤。③正常对照组为正常兔肌腱。实验组分别于第3,6,9,12,16,20周取材,阴性对照组分别于第9,20周取材。通过反转录聚合酶链反应技术测量各时期胶原Ⅰ型mRNA表达。主要观察指标:正常肌腱与人发角蛋白人工腱各个时期诱导形成的自生腱中胶原Ⅰ型mRNA/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GADPH)mRNA表达的比值。结果:33只大鼠全部进入结果分析。①正常肌腱组织中I型胶原mR-NA/甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA表达的比值为0.96±0.02。②阴性对照组9,20周组取材发现,两断端肌腱未连接,并且向两侧回缩。③实验组人发角蛋白人工腱植入后诱导形成的自生腱中I型胶原mRNA/甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA表达在第3周的已经出现,第3～6周为急骤上升,第6周到达高峰,第9～20周表达量呈稳定状态。实验组第6周表达量明显高于正常对照组(F=6.254,P0.05)。结论:人发角蛋白人工腱植入后,自生腱的形成主要是腱细胞增殖活化,合成并分泌胶原Ⅰ型蛋白,完成肌腱的修复。

摘要：单纯型大疱性表皮松解症（ＥＢＳ）是一组常染色体显性的遗传性疾病，研究表明本病存在角蛋白Ｋ５／Ｋ１４基因点突变。ＥＢＳ的各个亚型突变发生部位有一定差异，其中Ｗｅｂｅｒ－Ｃｏｃｋａｙｎｅ亚型（ＷＣ－ＥＢＳ）突变多位于Ｋ５／Ｋ１４的连接区Ｌ１－２。本研究设计了扩增Ｋ５基因Ｌ１－２区ＤＮＡ片段的引物，应用ＰＣＲ对－ＷＣ－ＥＢＳ家系的患者及未发病成员进行扩增。ＰＣＲ产物测序发现患者Ｋ５第３４６密码子发生了Ａ→Ｃ的碱基替换，导致色氨酸（ＴＡＴ）变成丝氨酸（ＴＣＴ），而未发病成员则未见有碱基突变。结果表明，通过ＰＣＲ结合ＤＮＡ直接测序不失为快速、准确检测基因突变的方法。此外，连接区在角蛋白结构中不如螺旋区重要，因而此区基因突变对角蛋白二聚体形成的影响不大，这与临床上ＷＣ－ＥＢＳ病情相对较轻是一致的。

摘要：本研究应用ＡＢＣ免疫组化技术显示，奶油黄、液氮致局部冻伤及ＣＣｌ＿４所致的三种肝损伤中也有细胞角蛋白（ＣＫ）异常表达肝细胞。（１）在局部肝冻伤及奶油黄性肝损伤中表明不伴脂肪变性的肝细胞坏死不能直接引起肝细胞ＣＫ表达的改变；（２）在奶油黄性肝损伤中显示了卵圆细胞对肝细胞ＣＫ异常表达的诱导作用，表明层粘连蛋白（ＬＮ）可能是这种作用的媒介；（３）在ＣＣｌ＿４致慢性肝损伤中表明肝细胞ＣＫ异常表达和ＬＮ异常沉积无论在位相上还是在时相上都一致，提出肝小叶结构破坏可能也是通过ＬＮ异常沉积而影响肝细胞的ＣＫ表达；（４）应用电镜及免疫电镜技术表明ＣＣｌ＿４性肝损伤中肝细胞中间丝细胞骨架结构的改变伴随着ＣＫ１９阳性抗原决定簇的出现；（５）设计了一种局部肝冻伤模型，利用这种模型表明，ＣＫ１９阳性肝细胞在肝小叶结构完整性遭到破坏且伴纤维组织增生时出现，随小叶结构的恢复而消失。这是对关于肝细胞ＣＫ异常表达是肝小叶结构修复过程中局部肝细胞的修复性反应这一假说的有力支持。讨论了这种改变的意义。

摘要：为提高羽毛粉的消化率,本试验以白鸡毛为原料,采用均匀设计试验优化羽毛粉加工工艺。研究结果显示,优化后的羽毛粉酶解工艺为:反应pH 7.5,反应温度46℃,碱性蛋白酶添加量0.9%,脂肪酶添加量0.3%,酶解时间3.5 h,在此工艺下处理得到的酶解羽毛粉呈淡黄色,颗粒细腻均匀且无腥味。羽毛粉中可溶性蛋白质含量为157.35 mg/g,胃蛋白酶消化率为90.07%,小于5000 Da的多肽占比达92.42%。