摘要：简单快速地筛查有机磷和氨基甲酸酯类农药残留对食品安全具有重要意义。采用酶抑制法,以重氮固红RC盐为指示剂、乙酸吲哚酚为乙酰胆碱酯酶(AChE)底物,设计开发了一种一步式快速检测试纸条。该试纸条底部为塑料胶板,上面依次粘贴样品垫、酶垫、阻滞垫、底物垫、吸附垫和固定有重氮固红RC盐的硝酸纤维素(NC)膜,通过检测区域颜色的变化可以实现农药残留的定性或定量分析,操作方法简单快捷。不同农药的检出限分别如下:马拉硫磷为0.6 mg·L^(-1),氧化乐果为0.4 mg·L^(-1),乙酰甲胺磷为1.3 mg·L^(-1),敌敌畏为0.1 mg·L^(-1),呋喃丹为0.1 mg·L^(-1),涕灭威为0.07 mg·L^(-1),且在实际果蔬样品检测中显示出良好的重现性和高灵敏度。

摘要：目的通过聚合酶链式反应(PCR)与层析试纸条结合的方法,实现天麻快速可视化真伪鉴别,并对其检测效果进行评价。方法采用一步法提取天麻及其伪品基因组DNA,应用NCBI数据库设计天麻特异性引物。采用DNA分子克隆技术制备天麻阳性质粒,作为天麻阳性对照品。建立PCR-层析试纸条法鉴定天麻真伪,摸索最优实验条件,并进行方法学评价。结果①样品DNA提取的纯度符合要求,最优的PCR反应引物浓度为1μmol/L,循环为29次。②分子克隆的天麻阳性质粒序列与天麻DNA分子标记特异性指纹区片段序列同源性为98%,可作为天麻PCR-层析试纸条法的阳性对照品。③PCR-层析试纸条法的方法学评价结果显示:天麻对照药材在试纸条上出现两个条带,伪品和阴性对照品出现1个条带,与琼脂糖凝胶电泳法结果一致,特异性良好;PCR-层析试纸条法较琼脂糖凝胶电泳法的灵敏度高100倍,天麻DNA浓度为10-1 mg/L时,试纸条仍有模糊条带;在第3、6、9、12个月采用PCR-层析试纸条法进行检测,检测结果与预期一致,稳定性良好;混合样品验证显示,PCR-层析试纸条法的最低检测限为10%,而琼脂糖凝胶电泳法的最低检测限为50%。④采用PCR-层析试纸条法对15份市售天麻样品进行检测,鉴别出3个伪品,与琼脂糖凝胶电泳法结果一致。结论所构建的PCR-层析试纸条检测方法特异性强、灵敏度高、操作简便快速,可在短时间内实现鉴定结果的可视化,检测结果准确、稳定,为道地药材天麻的真伪鉴别提供了新方法。

摘要：为提高学生的综合实验能力和科研素养,设计了胶体金试纸条检测沙门氏菌综合性实验。首先组装试纸条并在检测线和质控线上喷涂沙门氏菌抗体和二抗构建试纸条检测平台,同时在纳米金表面修饰沙门氏菌抗体构建探针。检测时探针与沙门氏菌结合形成复合物,在试纸条上层析被检测线上的抗体捕获,产生颜色条带,通过裸眼观察实现定性检测,检测限为1×10~6 CFU/mL,通过手机拍照并用Image-J软件分析灰度值进行半定量分析。该方法简便快速、成本低廉、用户友好。实验内容丰富,具有较强的综合性,且密切联系学术前沿和社会热点问题,有助于培养复合型人才。

摘要：目的:对食品中硝酸盐酶法快速检测试纸条进行了设计并应用于几种蔬菜进行验证。方法:用2.0%的N-1-萘基乙二胺二盐酸、3.0%的对氨基苯磺酸和6.0%酒石酸溶液按体积1:1:1混合作为显色剂,利用定量滤纸为试纸条载体和硝酸盐还原酶为还原剂制作了酶法快速检测试纸条并与国家标准法对比检测了几种蔬菜中硝酸盐含量。结果:利用显色剂和硝酸盐还原酶还原剂与硝酸盐发生的显色反应可以实现对硝酸盐的快速检测。结论:该试纸条能够比较快速(1min)地对食品中的硝酸盐进行检测且准确度高、灵敏度高、体积小、成本低廉,开发潜力巨大。

摘要：对食品中硝酸盐快速检测试纸条进行设计并应用于几种蔬菜进行验证。用4.5%的N-1-萘基乙二胺二盐酸、7.5%的对氨基苯磺酸和15%酒石酸溶液按体积1∶1∶1混合作为显色剂,利用定量滤纸为试纸条载体和锌粉作还原剂制作了快速检测试纸条并与国家标准法对比检测几种蔬菜中硝酸盐含量。结果表明:利用显色剂和锌粉还原剂与硝酸盐发生的显色反应可以实现对硝酸盐的快速检测。该试纸条能够比较快速地(1min)对食品中的硝酸盐进行检测且准确度高、灵敏度高、体积小、成本低廉,开发潜力巨大。

摘要：设计了硝酸盐酶法快速检测试纸条并应用于原料乳检测进行验证。用质量分数为4.5%的N-1-萘基乙二胺二盐酸、7.5%的对氨基苯磺酸和15.0%酒石酸溶液按体积1:1:1混合作为显色剂,利用定量滤纸为试纸条载体和硝酸盐还原酶为还原剂制作了酶法快速检测试纸条并与国家标准法对比检测了原料乳中硝酸盐质量浓度。结果表明,利用显色剂和硝酸盐还原酶还原剂与硝酸盐发生的显色反应可以实现对硝酸盐的快速检测。结论:该试纸条能够比较快速(1min)地对原料乳中的硝酸盐进行检测且准确度高、灵敏度高、体积小、成本低廉,开发潜力巨大。

摘要：为将无酶点击化学连接链式反应(CCLCR)结合试纸条用于金黄色葡萄球菌核酸的可视化检测。根据金黄色葡萄球菌16S rRNA的一段保守序列设计1对特异性核酸分子探针,一条探针5'端修饰生物素(Biotin),3'端修饰叠氮(N3);另一条探针5'端修饰环辛炔(DBCO),3'端修饰异硫氰酸荧光素(FITC),通过与目标基因进行特异性杂交,CCLCR和热循环作用下扩增产物进行试纸条分析。结果表明:CCLCR最佳探针浓度为0.05μmol/L,热循环扩增的最佳连接温度为25℃,该方法能够特异性检测出金黄色葡萄球菌核酸,而对肠炎沙门氏菌等其他5种食源性病原菌的检测结果呈阴性,同时对金黄色葡萄球菌核酸的检测灵敏度为1×10-8μmol/L。综上,将CCLCR与试纸条结合作为检测金黄色葡萄球菌的方法,具有操作简单、检测准确、检测成本低等优点,有望作为金黄色葡萄球菌的常规检测方法。

摘要：选用溴酚蓝为显色剂,设计出用于蛋白质检测的试纸条。通过对试纸条加样量、反应时间和反应膜浸泡时间等的优化,实现了对蛋白质的快速检测。结果表明:在蛋白质浓度25～1000μg/mL范围内呈现线性相关,相关系数R为0.993,检测时间为4.5min,操作简便,准确度高,适于食品中蛋白质的现场检测。

摘要：为使牛日本血吸虫病抗体检测试纸条尽早在我国血吸虫病流行区用于牛血吸虫病的检测、普查、监测和检疫,受湖北省动物疫病控制中心委托,按照浙江省农科院畜牧兽医研究所《牛日本血吸虫病抗体检测试纸条临床试验设计方案》,我们承担了200头试验任务。

摘要：目的建立一种灵敏度高、特异性强、检测速度快的方法检测解脲支原体。方法基于环介导恒温扩增技术(LAMP),根据解脲支原体序列特征设计3对引物进行解脲支原体DNA切口酶核酸恒温扩增,扩增过程在一对引物中标记生物素,随着扩增的进行生物素直接引入扩增片段中,扩增结束后产物在密闭装置中进行免疫试纸条显色反应,根据显色卡的颜色判定结果的阴阳性。结果该技术检测解脲支原体较实时荧光PCR技术灵敏度要高10倍以上,其它病原体检测均阴性该方法特异性与实时荧光PCR技术相当。结论恒温扩增联合试纸条技术检测解脲支原体具有较高的敏感性和特异性,检测速度快,适合各医院开展。