摘要：设计并合成了谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)模拟物6A,6A′-二苯胺-6B,6B′-二硒桥联-β-环糊精(6-AnSeCD).采用双酶偶联法测定GPX的活力结果显示,6A,6A′-二环己胺-6B,6B′-二硒桥联-β-环糊精(6-CySeCD)催化谷胱甘肽还原H2O2和枯烯H2O2的活力均比6-AnSeCD的高.为了进一步考察6-CySeCD和6-AnSeCD与GSH之间的相互作用,进行了分子动力学(MD)模拟和分子对接研究.结果表明,与GSH的结合使GPX模拟物的构象发生变化,这种改变可能是影响桥连GPX模拟物催化活性的关键因素.

摘要：以精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列为基础,在N-端引入硒代半胱氨酸(Sec)设计了SecRGD序列模拟谷胱甘肽过氧化物酶(GPx),利用Fmoc固相合成法合成了SecRGD.采用ESI-MS质谱和氢化物原子荧光光谱法对硒肽进行表征,采用酶偶联法进行GPx活力测定和酶动力学分析,用噻唑蓝(MTT)比色法评价了硒肽的抗氧化效果.结果表明,该硒肽的存在形式为SecRGD的二聚体.该硒肽具有GPx活力,其催化谷胱甘肽(GSH)还原H2O2的GPx活力为5.54 U/μmol,高于经典的GPx模拟物Ebselen.稳态动力学分析结果表明,该硒肽的催化机制为乒乓机制.该硒肽具有分子量小、易溶于水、毒性低及可有效保护Vero细胞免受氧化损伤的优点,具有作为抗氧化药物的应用前景.

摘要：目的长角血蜱(Hemaphysalis longicornis)不仅吸食家畜血甚至人血,还是多种疾病的传播媒介,对该蜱的研究具有重要的医学和兽医学意义。在大肠杆菌中表达长角血蜱的谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase)(HlGPx),为该酶在长角血蜱中的生理作用研究奠定基础,为该病媒的免疫防控提供参考。方法根据长角血蜱EST文库提示的片段序列的信息,设计引物采用PCR方法从长角血蜱成蜱的cDNA中扩增谷胱甘肽过氧化物酶基因。利用定点突变将该基因编码序列中一个编码硒半胱氨酸的密码子TGA突变为通用半胱氨酸密码子TGC,与表达载体pGEX-4T-1重组,转化BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达,SDS-PAGE及免疫印迹分析。结果成功获得了长角血蜱谷胱甘肽过氧化物酶全长序列,突变后在大肠杆菌中诱导表达了约51kDa的重组蛋白,Western-blot显示表达产物与抗GST抗体有很强的交叉反应。结论突变的HlGPx可以在大肠杆菌中表达并可用于下一步制备免疫血清及功能分析。

摘要：基于对天然谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)结构与功能的理解,我们利用超分子化学的方法和原理,选择γ-环糊精为骨架,通过引入催化基团硒或碲,设计并合成了7种基于γ-环糊精的新型谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)模拟物,并采用元素分析、红外光谱、核磁共振等手段对其结构进行了详细的表征和确认。运用GPX经典双酶体系法测定了它们的GPX活性,实验结果表明:6,6’双碲桥联γ-环糊精(6-diTe-γ-CD)表现出了最高的GPX活性,其催化GSH还原过氧化氢(H2O2)、叔丁基过氧化氢(t-BuOOH)和枯烯过氧化氢(CuOOH)的活力分别是传统小分子硒酶Ebselen的147.3、1897.9和663.9倍,该结果是目前报道的环糊精GPX模拟物中酶活力最高的。

摘要：目的采用析因设计分析时间和温度对血中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidases,GPx)活力的影响,为调查人群GPx活力水平提供血样保存的最佳条件。方法按照析因设计将保存时间(3个水平)和温度(3个水平)进行全面组合,共获得9种组合条件,将大鼠尾静脉血按照9种组合条件进行保存,把当天检测结果作为对照组。采用二硫双硝基苯甲酸(DTNB)法测定GPx活力。结果经析因方差分析,温度对GPx活力无影响(F=2.320,P>0.05),时间对GPx活力的影响有统计学意义(F=15.559,P0.05);当血样保存在液氮和4℃时,3、7、14d的GPx活力无变化。而在-80℃保存3天时(47.456±15.444)U/L与对照组(63.048±23.071)U/L比较有差异(t=2.101,P<0.05)。结论血样保存在液氮和4℃时对GPx活力无影响,保存在-80℃时对GPx活力影响显著。

摘要：多种外界因素可导致生物体内氧化与抗氧化系统失衡。存在于生物体内的抗氧化体系由酶类抗氧化剂如超氧化物歧化酶(SOD)、肉碱乙酰转移酶(CAT)等组成。当机体受到外界刺激而导致酶类抗氧化剂活性降低或非酶类抗氧化物质含量水平低下时，均可使机体组织因过氧化损伤而引起功能丧失。热应激是否也导致产蛋鸡体内产生此种效应，目前尚未见报道。 本试验旨在证实高温应激与超氧化处理是否对雏鸡肝脏组织造成过氧化损伤，并探讨在高温（40℃）和常温下超氧化处理时，通过卵黄囊注射抗氧化微营养素，雏鸡肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)活性及其含量变化的规律，进而为筛选适宜的抗氧化处理水平、超氧化处理水平、适宜的采样时间点提供理论依据。1 材料和方法1.1 试验动物新生Hy-Line公雏。1.2 试验设计

摘要：本试验采用2×6因子完全随机设计,研究了纳米硒和亚硒酸钠2种硒源对肉鸡组织硒含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响。岭南黄公母混合雏780羽按饲养试验要求分为13组,每组4个重复,每个重复15羽。将纳米硒和亚硒酸钠2种硒源分别以0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1.0mg/kg6个硒水平添加到基础日粮中,配制成12种试验日粮,基础日粮作对照。结果显示:(1)亚硒酸钠添加浓度在0.2～0.4mg/kg硒添加水平范围内肉鸡生长性能和GSH-Px活性处于高峰平台,1.0mg/kg硒添加水平肉鸡生长性能和GSH-Px活性显著低于0.2～0.4mg/kg硒添加水平。纳米硒添加浓度在1.0mg/kg肉鸡生长性能和GSH-Px活性仍然保持在高峰平台。(2)硒源添加浓度在0.1～0.3mg/kg时,亚硒酸钠和纳米硒对肉鸡生长性能的影响无显著差异(P>0.05);硒源添加浓度在0.4～1.0mg/kg时,纳米硒组肉鸡生长性能显著高于亚硒酸钠组(P0.05);在0.5和1.0mg/kg硒添加水平上,纳米硒组GSH-Px活性显著高于亚硒酸钠组(P<0.05)。(4)不加硒的空白组全血和组织硒含量显著低于硒添加组。在同一硒添加水平上,纳米硒组和亚硒酸钠组肉鸡全血硒浓度差异不显著,但是,组织硒含量却受硒源的影响。硒源添加?

摘要：为了比较不同硒源对肉仔鸡组织硒含量及对肝脏和全血中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -Px)活力的影响 ,以不同的指标确定4种硒源在肉鸡饲料中的应用效果及适宜添加量 ,采用4×3因子完全随机设计 ,包括4种硒源 (硒化卡拉胶、硒蛋氨酸、富硒酵母、亚硒酸钠 ) ,3个水平 ,设基础日粮对照。测定21日龄和42日龄肉鸡的全血、肝脏、血浆、红细胞、肌肉的硒含量和GSH -Px活性。结果表明 ,硒蛋氨酸组在所有组织中均有最高的硒含量 ,4种硒源均能有效提高肝脏及全血GSH -Px活力 ,硒蛋氨酸和富硒酵母可显著提高红细胞中的硒含量 ,而亚硒酸钠则能有效提高红细胞的GSH

摘要：选用36头平均体重420 kg,年龄2.5岁的中国西门答尔阉牛,采用随机区组设计分为4组,以混合精料和风干玉米秸秆为基础日粮,研究日粮中添加不同水平氯化镧对西门答尔阉牛营养物质消化、血清谷胱甘肽过氧化物酶、生长激素、胰岛素、三碘甲腺原氨酸和四碘甲状腺原氨酸浓度的影响。结果表明:实验至第60天时,每天添加0.9 g氯化镧的饲粮有机物质、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率较对照组和其它处理组分别提高了8.09%、7.13%、15.20%、9.47%、13.09%和20.48%,血清谷胱甘肽过氧化物酶活性较对照组和其它处理组显著提高了8.22、3.95和5.04个单位,血清生长激素、胰岛素浓度、三碘甲腺原氨酸和四碘甲状腺原氨酸浓度均显著高。

摘要：谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）基因表达可反映生物对环境压力的抗逆能力.采用中心复合设计和响应曲面分析法研究不同温度（18 - 34 ℃）、盐度（20 - 40）对4 种壳色马氏珠母贝GPX 基因表达量的影响.结果表明,马氏珠母贝4 种壳色群体GPX 基因表达量随着温度和盐度的升高,呈现先降低后升高的趋势.温度的一次、二次效应对4 种壳色马氏珠母贝GPX 基因表达的影响有统计学意义（P 〈 0.01）.盐度的一次效应仅对黑壳色马氏珠母贝GPX 基因表达影响有统计学意义（P 〈 0.05）;盐度的二次效应对白壳色马氏珠母贝GPX 基因表达的影响有统计学意义（P 〈 0.05）,对黑、红、黄壳色马氏珠母贝GPX 基因表达的影响有统计学意义（P 〈 0.01）.温盐协同效应对黑、红、黄壳色马氏珠母贝GPX 基因表达的影响有统计学意义（P 〈 0.05）,且温度的效应大于盐度效应.经响应曲面分析法和优化,得到马氏珠母贝的GPX 基因表达量在适宜的温度、盐度范围内呈峰值变化,白、黑、红、黄等4 种壳色马氏珠母贝分别在（21.4 ℃,30.1）、（24.8 ℃,28.5）、（25.2 ℃,30.5）、（25.1 ℃,29.7）等温盐度组合条件下达到最优（低）值（0.072、0.065、0.057、0.078）,满意度分别为100%、100%、97%、100%.所建立回归模型方程的决定系数R2 范围为0.971 3 - 0.995 8,校正决定系数R2 范围为0.942 6 - 0.991 5,预测决定系数R2 范围为0.713 9 - 0.968 0,模型拟合度高,模型恰当,可用于预测温度、盐度对4 种壳色马氏珠母贝GPX基因表达量的影响.