摘要：根据转基因农作物中最常用的花椰菜叶病毒启动子(CaMV35S)和根癌农杆菌终止子(NOS)的序列,设计并合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针(FDCP),分别建立了常规PCR、应用FDCP的新型实时荧光PCR检测转基因成分35S启动子和NOS终止子的方法。利用该套方法对冷冻马铃薯条、大豆、冷冻玉米棒、甜椒、番茄等实物样品进行了检测,发现11份样品中有5份检出35S启动子、NOS终止子,6份样品结果为阴性。结果表明我们建立的两种PCR方法均能有效检测出35S和NOS片段,其中常规PCR方法具有灵敏度高、特异性好的特点;应用FDCP的新型实时荧光PCR方法则更为简便、快速、准确,有很好的应用前景和研究价值。

摘要：根据转基因农作物中最常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 3 5S)和根癌农杆菌终止子(NOS)的序列 ,设计合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针 (FDCP) ,分别建立了多重PCR、应用FDCP的实时荧光PCR同时检测转基因成分 3 5S启动子和NOS终止子的方法 .并利用该套方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等实物样品进行了检测 ,发现 1 3份样品中有 6份检出3 5S启动子、NOS终止子 ,其余 7份样品的检测结果为阴性 .表明作者建立的多重PCR方法能有效检测出 3 5S和NOS成分 ,其中多重PCR法具有灵敏度高、特异性好的特点 ,多重荧光PCR法则更为简便、快速。

摘要：为调查分析我国的常规大豆育种材料中是否混入转基因大豆品系,选取706份大豆品系,对可能含有的外源转基因调控元件(CaMV35S启动子、FMV35S启动子和NOS终止子)以及针对我国批准进口的主要耐除草剂转基因大豆转化体(GTS40-3-2和MON89788)成分进行PCR扩增,同时根据MON89788转化体侧翼序列和目的基因设计引物做特异性检测,为其定性检测提供技术支撑。结果表明,在选取的所有样品中,最终测得含有CaMV35S启动子的转基因成分所占比例为1%,含有FMV35S启动子的转基因成分所占比例为0.85%,含有NOS终止子的转基因成分所占比例为0.71%,耐除草剂转基因品系MON89788所占比例为0.85%,以此评估转基因大豆所占比例,为农业转基因监管部门开展转基因大豆监管工作提供数据支持。

摘要：为了建立适用于多种植物的转基因成分PCR检测的内对照系统 ,本文针对植物叶绿体DNArbcL基因的保守区域 ,设计了一对扩增片段为 4 33bp的PCR引物 ,通过对 2 3种植物的PCR扩增表明 ,该引物不但在 4种单子叶植物 (大米、玉米、小麦、洋葱 )、 10种原始花被亚纲的双子叶植物 (甘蓝、白菜、大豆、豇豆、花生、胡萝卜、芹菜、菠菜、大麻、棉花 )及 7种合瓣花亚纲的双子叶植物 (圣女果、番茄、辣椒、马铃薯、南瓜、黄瓜、菊苣 )中得到了稳定一致的扩增结果 ,而且在低等的藻类植物 (海带、龙须菜 )中也得到了特异性的扩增结果。进一步对扩增片段进行的DNA序列测定与分析表明 ,扩增片段的变异水平较低 ,具有较高的保守性。本系统的建立有助于排除PCR检测时的假阴性结果 ,从而提高检测的准确性 ,而且能克服现行的“一种植物一种检测内对照”的弊端 ,有利于提高检测效率、缩短检测周期。

摘要：转基因(植物)食品的安全性是科学界及公众普遍关心的问题。在转基因植物研究中,根据转基因植物所带有的转基因成分的DNA序列,设计引物对耐草铵膦转基因植物中转入的转基因成分进行了PCR分析,结果表明,采用PCR扩增对外源基因和遗传标记基因的分析方法灵敏、准确。

摘要：在利用实时荧光定量(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测转基因成分的含量时,数据分析的规范化与标准化对保证实验数据的准确性及实验室间数据的可比性具有重要意义。基于目前很多国家和地区对转基因产品有强制性标识要求的现状,测量不确定度在进出口食品的转基因检验中作用显著。本文在分析q RT-PCR实验至少应提供的信息(the minimum information for publication of quantitative Real-time PCR experiments(MIQE))数据分析的基础上,综合阐述了q RT-PCR转基因成分定量数据分析中众多因素对定量准确性的影响,以及q RT-PCR转基因成分定量不确定度来源主要要素及其相应的评估策略。尽管MIQE为q RT-PCR实验设计及数据处理提供了参考,但目前仍然有许多实验设计甚至已经发表的论文并未完全遵照相关要求,从而导致实验结果偏差甚至错误,其数据处理的某些环节尚缺乏一致性的要求。由于对一些影响因子缺少定量描述,在转基因成分定量检测的不确定度分析方面还缺乏一个通行的方法。

摘要：食品以及相关产品的安全,如今越来越为人们所关注。作为一个独特的消费群体,婴儿由于身体各器官尚处在发育初期,因此极易受到伤害,加上其表达能力尚不完善,一旦受到外来的伤害,只能用哭声来表达不适感觉。这大大增加了人们对婴儿病情诊断的难度,延误对受伤婴儿伤痛的治疗。因此,对于生产涉及婴儿食品以及相关产品的厂家,在产品安全方面就要承担比一般食品生产厂家更大的责任。

摘要：水稻是我国主要的粮农作物,是否含有转基因成分与粮食和食品安全息息相关。本试验基于出入境检验检疫行业标准SN/T 2584-2010《水稻及其产品中转基因成分实时荧光PCR检测方法》设计转基因成分花椰菜花叶病毒35S启动子(Promoter of cauliflower mosaicvirus 35S,pCaMV35S)、胭脂碱合成酶基因终止子(Terminator of nopaline synthase gene,tNOS)和水稻内源基因蔗糖磷酸合酶基因(Sucrose phosphate synthase,SPS)的引物及探针,建立水稻转基因成分的定性检测方法,并深入研究此方法的检出限、定量能力以及灵敏度。结果表明:此方法具有较强特异性、较低检出限(0.1ng,1ng)以及较高灵敏度(0.1%),并且此方法具有较好的定量能力(扩增效率:100%,95%;相关系数R2:0.9874,0.9881)。综上所述,此方法不仅具有灵敏的定性能力还具有定量潜能。

摘要：目的了解我国食品检测实验室的大豆粉中转基因成分的检测能力。方法国家认可委组织实施了大豆粉中转基因成分的检测能力验证工作。15个省、市、自治区的37家实验室参加了本次能力验证。本研究介绍了本次能力验证的实施过程,包括方案设计、样品制备、一致性稳定性试验、结果统计等,并对能力验证结果进行了分析。结果实验室检测结果满意率为94.60%,样品检测结果一致率为98.90%。结论参加能力验证的绝大多数实验室可以准确检测大豆粉中转基因成分,具备了分子生物学检测转基因食品的能力。

摘要：采用 CTAB微量法和试剂盒提取菊花、矮牵牛、非洲菊 3种花卉的基因组 DNA,试剂盒提取的效果较好。设计合成了 3对引物 ,分别扩增花椰菜花叶病毒 (Cauliflowermosaic virus,Ca MV) 35 S启动子、根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因终止子 (NOS!)、大肠杆菌 K12菌株新霉素磷酸转移酶 II(NPTII)基因。 PCR检测结果表明 ,3种花卉中仅矮牵牛的一个样品为阳性 ,含有这 3种转基因成分 ,酶切鉴定结果验证了PCR产物为非假阳性。